1、实验 检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质(5年20考)(2013课标、广东理综、江苏、上海单科,2012安徽、广东、江苏,2011全国)要点突破1实验原理检测物质鉴定试剂颜色反应还原糖斐林试剂砖红色脂肪苏丹(或苏丹)染液橘黄色(或红色)蛋白质双缩脲试剂紫色2.操作流程(1)还原糖的检测(2)脂肪的检测方法一:花生种子匀浆3滴苏丹染液橘黄色方法二:花生种子(浸泡)将子叶切成薄片观察:先在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,再用高倍镜观察,花生子叶切片中有橘黄色颗粒结论:花生种子的子叶中有脂肪存在(3)蛋白质的检测3斐林试剂和双缩脲试剂的比较比较项目斐林试剂双缩脲试剂不同点使用方法甲液和乙液等量混合均
2、匀后即可使用,且现配现用使用时先加A液再加B液实质新配制的Cu(OH)2反应碱性条件下的Cu2反应呈色反应条件需水浴加热不需加热即可反应颜色砖红色紫色浓度乙液CuSO4的质量浓度为0.05 g/mLB液CuSO4的质量浓度为0.01 g/mL相同点都含有NaOH、CuSO4两种成分,且所用NaOH溶液的质量浓度都是0.1_g/mL4.实验注意事项(1)在物质鉴定实验中应注意选择无色或颜色浅的材料,这样可以避免材料本身的颜色掩盖反应结果,如鉴定还原糖一般不用有色的叶片,鉴定蛋白质一般不用血红蛋白等。(2)物质鉴定实验一般不设立对照实验,若需设立对照实验,对照组应加入成分已知的物质,如验证唾液淀粉
3、酶是蛋白质,对照组可加入稀释的鸡蛋清。(3)在还原糖、蛋白质的鉴定实验中,在加相应试剂鉴定之前,要留出一部分组织样液作为对照,以便与鉴定后的样液颜色作对比,增强实验的说服力。(4)在蛋白质的鉴定实验中,如果用蛋清稀释液作为实验材料,一定要稀释到一定程度,否则,与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试管也不易洗刷干净。(5)在脂肪的鉴定中,洗去浮色时不能用清水,因为染液易溶于有机溶剂、不溶于水。思维激活连一连巧记 苏丹遇脂肪,颜色变化为橘黄;砖红色沉淀何时显?斐林试剂把糖验;蛋白质类双缩脲,紫色络合无处藏。典例透析【典例1】(2013江苏卷改编)在1、3、5号试管中分别加入2
4、mL蒸馏水,2、4、6号试管中分别加入2 mL发芽的小麦种子匀浆样液,然后在14号试管中滴加适量斐林试剂,5、6号试管中合理滴加双缩脲试剂,摇匀。预期观察到的实验现象是()。1、3、5号试管内都呈蓝色3组实验中甲组和乙组的实验结果相同4号试管内呈砖红色,其余试管内都呈蓝色4号试管内呈砖红色,6号试管内呈紫色A B C D解析1、3、5号试管加入的是蒸馏水,分别作为对照组,1、3号试管呈现斐林试剂的颜色蓝色,5号试管呈现双缩脲试剂的颜色,也为蓝色,正确;发芽的小麦种子匀浆液含有还原糖,加入斐林试剂后,水浴加热,4号试管内呈现砖红色,2号试管没加热,试管内不发生反应呈现蓝色,匀浆液中还含有蛋白质,
5、加入双缩脲试剂,室温下6号试管内呈现紫色,正确。答案B【典例2】2011重庆理综,30(1)某兴趣小组将豆腐块灭菌,接种微生物后培养2 d,加入适量食盐,经密封放置10 d后制得豆腐乳。在保质期内,豆腐乳放置时间越长,蛋白质含量越低,短肽和氨基酸含量越高。为探究其原因,该小组取适量豆腐乳制成样液,等量加入各试管,进行了以下实验。处理编号处理方法显色结果37 放置0 min加入等量双缩脲试剂紫色37 放置10 min?37 放置120 min?100 加热5 min后,37 放置120 min紫色实验中,加入双缩脲试剂A后,样液的颜色将_。处理中,100 加热的目的是_。如果处理与处理相比,显色
6、较_,且处理与处理相比,显色较_,则表明豆腐乳中蛋白质被微生物产生的_ 分解,最终使短肽和氨基酸等含量增加,因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。解析蛋白质和多肽可用双缩脲试剂进行检验,先加A液(质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液)后加B液(质量浓度为0.01 g/mL的CuSO4溶液)颜色呈紫色,但实验中若只加入A液,则此颜色不变;100 能使酶变性失去活性,作为对照实验;保质期内放置越久,口味越佳,说明豆腐乳中的蛋白质被微生物产生的蛋白酶分解得越彻底,所以得到的短肽和氨基酸含量越高,因此第组相对于时间较短的第组以及作为对照组的第组双缩脲显色反应颜色要浅。答案不变使酶失活浅浅蛋白酶(肽酶
7、)题后归纳物质鉴定实验中的重要操作归纳1加热只有鉴定还原糖时,需要在5065 温水浴中加热才能出现砖红色沉淀,其余两个实验不需加热。2用量鉴定蛋白质时,如待测组织样液为2 mL,则A液为1 mL, B液为4滴。注意B液用量不能过量,否则会与A液产生蓝色Cu(OH)2沉淀,干扰实验的紫色现象。3显微镜脂肪鉴定时可用显微镜,如要观察橘黄色脂肪颗粒,则需要在显微镜下观察。4物质鉴定中常见试剂使用方法及现象整合待测物质常用试剂使用方法实验现象脂肪苏丹 染液在待测液体中直接加入试剂后观察;或对待测组织装片滴加试剂染色后,在显微镜下观察橘黄色反应苏丹染液红色反应还原糖斐林试剂在待测物质的溶液中,加入相应试剂后,在5065 条件下水浴加热砖红色反应蛋白质双缩脲试剂在待测样液中加入试剂,摇匀观察紫色反应淀粉碘液在淀粉溶液中滴加碘液蓝色反应