1、 高二生物 导学案执笔： 审核： 审批： 学案编号： 授课人： 授课时间： 姓名： 班级： 小组： 课题课题1 DNA的粗提取与鉴定课型新授课时1教师复备栏（学生笔记）【学习目标】站得高明确学习目标（一）知识与技能1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质。2、理解DNA粗提取与鉴定的原理（二）过程与方法掌握DNA如提取计数，能利用DNA的性质进行实验设计和操作（三）情感、态度与价值观 通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作，锻炼科学的思维方法，培养实事求是的科学态度。 【学习重点和难点】重点：DNA的粗提取和鉴定方法 难点：DNA的粗提取和鉴定方法【学法指
2、导】启发式教学，拓展视野，感受科学技术的重要价值。【知识链接】复习旧知，以旧带新1、固定化技术中常用的载体有 、 、 、 和 等。2、影响酶活性的因素有 、 和 等。3、固定化技术包括 法、 法和 法。4、果胶酶的种类包括 酶、 酶和 酶等。5、被子植物花粉的发育要经历 时期、 期和 期等阶段。【学习内容】一、 自主学习：起步稳夯实基础促发展 学生阅读教材P5457,完成下列学案（一）、基础知识一、提取DNA的方法：1、提取生物大分子的基本思路是选用一定的 或 的方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用 与 、蛋白质和 等在物理和华学性质方面的 ，提取 ，
3、去除 成分。2、DNA和蛋白质等其它成分在 的NaCI溶液中 不同，利用这一点，选择适当的 就能使DNA充分 ，而使杂质 ，或者相反，以达到 的目的。3、DNA在盐溶液中的溶解度最小值是 mol/L，析出时最适宜的盐浓度是 mol/L，DNA不溶于 溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步 。4、蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA 影响，大多数蛋白质不能忍受 的高温，而DNA在 C以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ，但对DNA 影响。5、DNA的鉴定：在 的条件下，DNA遇 会被染成 。 （三）实验操作：1.实验材料的选取：原则上，凡是含有 的生物材料都可以考
4、虑，但是选用DNA含量 的生物组织，成功的可能性更大。2破碎细胞，获取含 的滤液 细胞破碎比较容易，以 为例，在鸡血细胞液中加入一定量的 ，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要选用 溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA时在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分地 和 ，过滤后收集研磨液。3、去除滤液中的杂质：4、DNA的析出与鉴定：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的 溶液（体积分数为95%）静置2-3min，溶液中会出现 ，这就是粗提取的 。用 检验，沸水中加热5min后，呈 色。二、合作探究:走得欢探索中收获，收获中提升 实验操作制备鸡血细胞液
5、加柠檬酸钠，静置或离心破碎细胞，释放DNA 加蒸馏水，同一方向快速搅拌过滤，除去细胞壁、细胞膜等。溶解核内DNA 加入NaCl至2mol/L，同一方向缓慢搅拌DNA析出 加蒸馏水至0.14mol/L，过滤，在溶解到2mol/L溶液中除去细胞质中的大部分物质。DNA初步纯化 与等体积95冷却酒精混合，析出白色丝状物除去核蛋白、RNA、多糖等。DNA鉴定 二苯胺，沸水浴，呈现蓝色【整理学案】：构建网络，内化知识【达标测评】步步高巩固成果，对答如流1.在研究DNA的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是（ ）A.除去血浆中的蛋白质 B.除去
6、染色体上的蛋白质 C.除去血细胞表面的蛋白质D.除去血细胞中的所有的蛋白质，使DNA释放，便于进一步提纯2与析出DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是（ ）A.操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度 B.在操作A时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证DNA分子完整 C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度，两者均可析出D.当丝状粘稠物不再增加时，此时NaCl的浓度相当于0.14mol/L3洗涤剂能够瓦解（ ），但对DNA没有影响。A.细胞壁 B.细胞膜 C.细胞核 D.细胞质4在沸水浴的条件下，DNA遇（ ）会被染成蓝色。A.斐林试剂 B.苏丹染液 C.双缩脲试剂 D.二苯胺5在DNA提取过程中，最好
7、使用塑料试管和烧杯，目的是（ ）A.不易破碎 B.减少提取过程中DNA的损失 C.增加DNA的含量 D.容易洗刷6下列操作中，对DNA的提取量影响最小的是（ ）A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质B.搅拌时，要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌C.在“析出DNA粘稠物”时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增加D.在用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却E在DNA的溶解和再溶解时，要充分搅拌7DNA的粗提取中，将与滤液体积相等的、冷却的（ ），静置23min，溶液中会出现白色丝状物。A.09%的NaCl B.0.14mol/L的NaCl溶液 C.质量分数15
8、%的HCl D.体积分数为95%的酒精溶液8.以血液为实验材料时，需要向血液中加入（ ），防止血液凝固。A.醋酸钠 B.龙胆紫 C.柠檬酸钠 D.醋酸洋红9.在向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（ ）A.加快溶解DNA的速度 B.加快溶解杂质的速度 C.减少DNA的溶解度，加快DNA析出 D.减小杂质的溶解度，加快杂质的析出10.去除滤液中的杂质时，直接在滤液中加入嫩肉粉，利用嫩肉粉中的（ ）分解蛋白质。A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.木瓜蛋白酶 D.肠肽酶【学后反思】答案：DCBDB BDCCC课后习题基础训练1在DNA的粗提取和鉴定的实验中，提取鸡血细胞的核物质和析出含D
9、NA的粘稠物的操作过程中均用到蒸馏水，其作用在于 （ ）A前者用来溶解血细胞，后者用来溶解DNAB前者使血细胞吸水破裂，后者用来稀释NaCl溶液C前者用来分离细胞核与细胞质，后者用来提取DNAD前者使DNA从核中分离出来，后者使DNA析出2为了便于提取鸡血细胞中的DNA，下列所采取的措施中，最恰当的是：向经抗凝剂处理的鸡血细胞液加入（ ） A蒸馏水BATPC0.3g/mL的蔗糖溶液 D二氧化碳3下列不适宜作为DNA提取的实验材料是 （ ） A鸡血细胞 B蛙的红细胞 C人的成熟红细胞 D菜花4用过滤的方法得到细胞中的氯化钠溶液后，还要用酒精处理，可以得到较纯化的DNA这是因为： （ ）ADNA易
10、溶于酒精，而滤液中某些杂质不易溶于酒精BDNA不易溶于酒精，而滤液中某些杂质易溶于酒精CDNA和滤液中其他成分更易溶于酒精DDNA和滤液中其他成分都不溶于酒精5.在研究DNA的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是（ ）A.除去血浆中的蛋白质 B.除去染色体上的蛋白质 C.除去血细胞表面的蛋白质D.除去血细胞中的的蛋白质，使DNA释放，便于进一步提纯6.在向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（ ）A.加快溶解DNA的速度 B.加快溶解杂质的速度 C.减少DNA的溶解度，加快DNA析出 D.减小杂质的溶解度，加快杂质的析
11、出7在沸水浴的条件下，DNA遇（ ）会被染成蓝色。A.斐林试剂 B.苏丹染液 C.双缩脲试剂 D.二苯胺8在DNA提取过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是（ ）A.不易破碎 B.减少提取过程中DNA的损失 C.增加DNA的含量 D.容易洗刷9DNA的粗提取中，将与滤液体积相等的、冷却的（ ），静置23min，溶液中会出现白色丝状物。A.09%的NaCl B.0.14mol/L的NaCl溶液 C.质量分数15%的HCl D.体积分数为95%的酒精溶液10.以血液为实验材料时，需要向血液中加入（ ），防止血液凝固。A.醋酸钠 B.龙胆紫 C.柠檬酸钠 D.醋酸洋红11洗涤剂能够瓦解（ ），但对D
12、NA没有影响。A.细胞壁 B.细胞膜 C.细胞核 D.细胞质能力提升1.去除滤液中的杂质时，直接在滤液中加入嫩肉粉，利用嫩肉粉中的（ ）分解蛋白质。A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.木瓜蛋白酶 D.肠肽酶2在DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品的浓度和名称分别是（）01 g/ml的柠檬酸钠溶液 200mol/L的NaCl溶液 014 mol/L的NaCl溶液 体积分数为95%的酒精溶液 0015 mol/L的NaCl溶液 004 mol/L的NaCl溶液A B C D3与析出DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是（C）A操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度B在操作A
13、时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证DNA分子完整C加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度，两者均可析出D当丝状粘稠物不再增加时，此时NaCl的浓度约为0.14mol/L.二、非选择题（3个）1提取鸡血中DNA时，要除去血液中的上清液，这是因为什么？2填写本实验完成下列实验操作时所用试剂。提取鸡血细胞中核物质 溶解核内DNA： 析出2mol/LNaCl溶液中的DNA DNA粘稠物的再溶解 提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物 DNA的鉴定 3.关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题：鸡血细胞中红细胞 ，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中 细胞数目较多，可以提供丰富的 。实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全血，主要原因是 。生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后，结果是 ，这是因为这些动物和人一样，成熟的红细胞中 ，但若改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行。这是因为 。参考答案 1因为上清液是血浆，不含有血细胞，DNA存在于试管底部的鸡血细胞的细胞核中2 蒸馏水2mol/LNaCl溶液蒸馏水2mol/LNaCl溶液冷却的95%的酒精二苯胺3含细胞核；红；DNA 鸡血细胞液中DNA相对含量很难提取到DNA；无细胞核；肝细胞有细胞核研磨
