1、1我国科学家张道远先生通过从耐旱灌木白花柽柳中克隆得到TSOD基因,利用转基因技术转化到棉花中,获得了具备更强抗旱性的T4代转基因棉花株系。下图为转基因抗旱棉花的培育过程示意图,请据图回答:(1)过程表示用_扩增目的基因的方法。过程用到的工具酶有_。步骤一般用_处理农杆菌,使其易吸收周围环境中的DNA分子。(2)将重组质粒导入棉花细胞除步骤所示的方法外,还可采用_。如果受体细胞是动物的受精卵,则一般采用的方法是_。(3)外植体培养成为试管苗的过程采用了_技术,利用了_的原理,步骤表示_。(4)为了确定抗旱转基因棉花是否培育成功,可先用放射性同位素标记的_作探针进行分子水平鉴定,再_进行个体水平
2、鉴定棉花植株的抗旱性。答案:(1)PCR技术限制酶(限制性核酸内切酶)、DNA连接酶Ca2(或CaCl2)(2)花粉管通道法(基因枪法)显微注射法(3)植物组织培养植物细胞的全能性脱分化、再分化(4)抗旱基因(TSOD基因、目的基因)移栽到干旱土地中2如图表示构建转入人抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程。请据图回答问题:(1)图示过程涉及的生物技术有_、_、_。(2)构建的基因表达载体除含有人抗体基因、标记基因外,还应具有_。(3)向转基因小鼠注射特定的抗原后,从小鼠的_中提取B淋巴细胞;过程通常用_诱导。(4)细胞X是_,体外培养细胞X所用的培养液必须添加_等天然成分,培养过程中会产生接
3、触抑制吗?_。答案:(1)转基因技术动物细胞培养动物细胞融合(其他合理答案亦可)(2)启动子、终止子(3)脾脏聚乙二醇或灭活的病毒(4)杂交瘤细胞血浆或血清不会3利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺生物反应器技术。青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点,可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶等医药产品,造福人类。据图回答下列问题:(1)在基因工程中,A表示_,如果直接从苏云金芽孢杆菌中获得抗虫基因,过程使用的酶区别于其他酶的特点是_,B表示_。(2)在研究过程中,研究人员首先从相关基因组中获取了目的基因,并采用_技术对目的基因进行扩
4、增,然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组载体的构建过程中需要的工具酶有_。(3)将目的基因导入受体细胞的过程中,在过程中一般采用_,在过程中一般采用_,受体细胞一般是_。(4)由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中,检测其体内是否出现药用蛋白,在分子水平上的检测方法及结果是什么?_。(5)要确定目的基因(抗虫基因)导入棉花细胞后,是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定,请写出在个体水平上的鉴定过程:_。解析基因工程的工具酶有限制酶、DNA连接酶,其中限制酶具有专一性:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的位点切割DNA分子。目的基因的检测与鉴定有四种方法:采用DNA分
5、子杂交技术检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因;采用分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA;采用抗原抗体杂交技术检测目的基因是否翻译成了蛋白质;进行个体水平的鉴定(进行抗虫或抗病的接种实验)。答案(1)目的基因一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的位点切割DNA分子重组DNA(2)PCR限制酶(限制性核酸内切酶)、DNA连接酶(3)农杆菌转化法显微注射法受精卵(4)从转基因山羊的乳汁中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原抗体杂交。如果出现杂交带,表明乳汁中出现了药用蛋白;如果不出现杂交带,表明乳汁中未出现药用蛋白(5)让害虫吞食转基因棉花的叶子,观察害虫的存活情况,以确定其是否具有抗虫性状