1、专题4DNA和蛋白质技术一、巩固提升1.红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题:(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步:、和。(2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是。以上所述的过程即是样品处理,它包括、收集血红蛋白溶液(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析,这就是样品的粗分离。透析的目的是。透析的原理是。(4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后
2、经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的目的是。血红蛋白有什么特点?。这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义?。2.PCR技术是把某一DNA片段在体外酶的作用下,合成许多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段;电泳技术则是在外电场作用下,利用分子携带的净电荷不同,把待测分子的混合物放在一定的介质(如琼脂糖凝胶)中进行分离和分析的实验技术,利用它可分离多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质和做亲子鉴定。下图是电泳装置及相应电泳结果。(1)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是。(2)图丙是把含21个氨基酸的多肽进行水解,得到的氨基酸混合物进行
3、电泳的结果,据图可推知该多肽由种氨基酸构成。(3)图丁通过提取某小孩和其母亲以及待测定的四位男性的DNA,分别由酶处理后,生成若干DNA片段,并进行扩增得到的混合物,然后进行电泳所得到的一组DNA指纹图谱。请分析:F1F4中,谁是该小孩真正生物学上的父亲?为什么?(4)电泳过程中分子的迁移速度除了与本身所带的净电荷的多少有关外,你认为还与什么因素有关?(至少列出一种)#参考答案1.答案:(1)样品处理粗分离纯化纯度鉴定(2)防止血液凝固红细胞的洗涤血红蛋白的释放(3)去除相对分子质量较小的杂质透析袋能使小分子自由进出,而大分子则保留在袋内(4)通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去血红蛋
4、白呈现红色,在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液这使血红蛋白的分离过程非常直观,大大简化了实验操作2.答案:(1)DNA的复制(2)6(3)F2,因为C和F2两者之间的DNA指纹图谱完全相同。(4)分子的大小、形态;凝胶的种类、密度;电泳的电压大小等。解析:本题的情境中电泳技术是全新的,考查在新情境下分析问题和解决问题的能力。(1)PCR把某一DNA片段在酶的作用下,在体外合成许多相同片段,原理是DNA分子复制。(2)某氨基酸混合物电泳后出现分离,共有6个区域,故该多肽由6种氨基酸构成。(3)子代的DNA是由亲代DNA复制而来的。子代与亲代DNA相同,故F2与C为父子关系。(4)分子的大小、形态,凝胶的种类、密度,电泳的电压大小等都会影响分子迁移速度。高考资源网w w 高 考 资源 网
