1、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、选择题1下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是(A)AKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H4O、葡萄糖、尿素、琼脂、水BKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H4O、葡萄糖、琼脂、水CKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H4O、尿素、琼脂、水DKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H4O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水解析根据题意可知，该培养基中必须要有尿素，故可排除B、D；而培养基中必须含有有机物作为碳源，又可排除C，故只有A符合题意。2某同学在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2 760、295和46，则菌落总数(个/mL)为(C
2、)A2.76104B2.95104C3.775104D4.6104解析由于稀释倍数不同，计算时不能简单相加，应乘上相应稀释倍数再取平均值。某同学在101、102、103倍稀释的平均菌落数为2 760、295和46，由于101稀释倍数太小，获得的数据不准确，故应取后两者的平均值，则每毫升菌落总数为(29510246103)23.775104个/mL。3在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有(A)由于土样不同由于培养基污染由于操作失误没有设置对照ABCD解析A同学比其他同学的实验结果数据大许多，可
3、能是由于选取的土样不同、培养基灭菌不彻底或操作过程中被杂菌污染，也可能操作失误，如配制培养基时混入其他含氮物质、稀释度不够准确等。4请选出下列正确的步骤(D)土壤取样称取10g土壤放入盛有90g无菌水的锥形瓶中吸取0.1mL进行平板涂布依次稀释101、102、103、104、105、106、107稀释度ABCD解析分离分解尿素的细菌的过程是：土壤取样称取10 g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度吸取0.1 mL进行平板涂布，C正确。5能够测定样品活菌数的方法是(A)A稀释涂布平板法B直接计数法C重量法D比浊法解析直接计数
4、法是利用特定的细菌计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量，不能区分死菌与活菌。重量法是用于微生物测定的一种方法，有湿重和干重，测蛋白质和DNA含量反映细胞的物质量。比浊法是在一定范围内，菌的悬液中细胞浓度与浑浊度成正比，即与光密度成正比，菌越多，光密度越大。活菌在适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落，此法又称活菌计数法。二、非选择题6自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将他们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤如下：A制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液B为了得到更加准确的结果
5、，你选用_稀释混合平板法_(稀释混合平板法、稀释涂布平板法)接种样品C适宜温度下培养结果分析：(1)测定的大肠杆菌数，再对应稀释倍数的106的培养基，得到以下几种统计结果，正确可信的是(D)A一个平板，统计的菌落数是23B两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24C三个平板，统计的菌落数是21、5和52，取平均值26D四个平板，统计的菌落数是21、30、24和25，取平均值25(2)一同学在稀释倍数的106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL)_1.17108_。(3)用这种方法测定密度，实际活菌数量比测得的数量
6、_多_，因为_当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落。_。(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？_不能；因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程。_解析稀释涂布平板法是将土壤悬液对号放入平皿，然后再倒入溶化后冷却45左右的培养基，边倒入边摇匀，使样品中的微生物与培养基混合均匀，待冷凝成平板后，分别培养后，再挑取单个菌落，直接获得纯培养，故稀释涂布平板法结果更准确；结果分析：(1)D中设有多个重复组，且实验结果相差不大，故D结果最可信；(2)由于菌落数的平均值为23.4，稀释倍数是105，所取稀释液的体积为0.2 mL，故每毫升样品中的菌落数是23.40.21061.17108；(3)因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实验活菌数量要比测得的数量多；(4)因未设置空白对照，不能确定培养基是否被污染，故不能排除杂质菌来自培养基或来自培养过程。
