1、 高考资源网（） 您身边的高考专家2020届高考生物查漏补缺之选考题题型专练（三）1、利用某高致病性病毒特异性的VP40抗原蛋白来制备单克隆抗体的流程图如下,请回答:1.过程利用质粒构建表达载体,质粒的来源主要是_,质粒能够在受体细胞中_,是其作为运载体的原因之一。2.过程用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于_。在培养基中加入四环素,能获得含有目的基因的受体菌,原因是_。可以利用_检测VP40基因是否进入大肠杆菌。3.用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是_。对杂交瘤细胞还需进行_培养和抗体检测,最终获得单克隆抗体。2、玉米自交系(遗传稳定的育种材料)B具有高产、抗病等优良性质,
2、但难以直接培育成转基因植株,为使其获得抗除草剂性状,需依次进行步骤I、II试验。.获得抗除草剂转基因玉米自交系A,技术路线如下图。(1)为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是_(单选)。Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点酶切后,G基因形成的两个黏性末端序列不相同酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同A. B. C. D.(2)下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知,细胞脱分化时使用的激素是_,自交系_的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。2,4-D(2.0 mg/L)6-BA(0.5 mg
3、/L)IBA(2.0 mg/L)愈伤组织形成率(%)芽的分化率(%)根的诱导率(%)甲991390乙858087丙888312丁168583(3)农杆菌转化愈伤组织时,T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织,需使用含_的选择培养基。(4)转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织,出现蓝色的是_(多选)。A.无农杆菌附着的未转化愈伤组织B.无农杆菌附着的转化愈伤组织C.农杆菌附着的未转化愈伤组织D.农杆菌附着的转化愈伤组织(5)组
4、织培养获得的转基因植株(核DNA中仅插入一个G基因)进行自交,在子代含G基因的植株中,纯合子占_。继续筛选,最终选育出抗除草剂纯合自交系A。II.通过回交使自交系B获得抗除草剂性状(6)抗除草剂自交系A(GG)与自交系B杂交产生F1,然后进行多轮回交(下图)。自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代_。(7)假设子代生活力一致,请计算上图育种过程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例,并在图1中画出对应的折线图。若回交后每代不进行鉴定筛选,直接回交,请在图2中画出相应的折线图。(8)下表是鉴定含G基因植株的4种方法。请预测同一后代群体中,4种方法检出的含G基因植株的比例,从小到大依次是_
5、。 方法检测对象检测目标检出的含G基因植株的比例PCR扩增基因组DNAG基因x1分子杂交总mRNAG基因转录产物x2抗原-抗体杂交总蛋白质G基因编码的蛋白质x3喷洒除草剂幼苗抗除草剂幼苗x4对Hn继续筛选,最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系3、下图表示利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)做的研究,请分析回答下列问题。1. a过程表示基因工程,则其核心步骤是_,图中的致癌基因作为目的基因,质粒作为载体,二者需要_切割后连接成重组载体。2.将基因表达载体导入ES细胞的方法是_,为检测致癌基因是否己插入受体细胞DNA,可采用_技术。3. b过程若要从早期胚胎中获得更多ES细胞,则可将早期
6、胚胎培养至_(时期)。4. d过程移入的胚胎能够存活,是因为代孕子宫并不会对其发生_,同时能够与受体子宫建立正常的_联系。对移植前的胚胎进行性别鉴定时,宜取_的细胞进行鉴定。5.用肝癌细胞作抗原剌激B淋巴细胞,再将此淋巴细胞与骨髄瘤细胞融合后获得细胞代谢产物为_,经筛选的融合后细胞具有的特点是_。该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”,从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞。4、抗体的结构如图所示,它由两条H链和两条L链组成。同一物种C区氨基酸序列恒定,不同抗体结合抗原的V区氨基酸序列有差异。1.在生物体内,抗体是由_细胞分泌的,该细胞可以来自_增殖分化。2.传统方法获取抗体时,需要将相应的抗原反复注射
7、到动物体内,从动物的_中分离。显然,这种方法产生的抗体量和纯度等都很低,特异性差,单克隆抗的出现,克服了传统抗体的不足,单克隆抗体是指_。3.天然的抗体左右两个V区结构完全相同,只能结合相同的抗原。通过一定技术手段可以得到双功能抗体(又叫双特异性抗体),它的两个V区能结合不同的抗原。制备双功能抗体的基本方法如下:将能分泌抗体1的杂交瘤细胞(A细胞)与能分泌抗体2的淋巴细胞(B细胞)进行融合,形成可分泌两种亲代抗体和杂种抗体的杂种一杂交瘤细胞(AB)。细胞融合时需要用_、_或电激等诱导,融合后总共应该有_种细胞(最多考虑两两融合),用A、B字母表示出这些细胞组合_。4.双功能抗体在癌症治疗中可作
8、为“生物导弹”:用其中一个V区识别癌细胞表面_,用另一个V区将T细胞等杀伤细胞定向带到癌细胞所在的位置, 这里,T细胞对癌细胞的攻击属于_免疫。5.细胞融合方法得到的双功能抗体,只是将两个不同抗体的V区集中到了一个抗体上,人们无法改变V区的结构。通过_技术,可以对双功能抗体的V区进行设计改造,使其更适合人类的需要这种改造,最终还必须通过对_分子的改造来完成。5、人类的核移植胚胎干细胞经过诱导分化,形成相应的组织器官后,可以用于治疗人类疾病如:组织器官的移植。下图是治疗性克隆的过程图解。1.“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的核仍然具有_。相同的胚胎干细胞,“克隆”的结果各种各样,如有的是
9、胰岛细胞,有的是血细胞,有的是心肌细胞,究其根本原因是基因的_。2.重组的新细胞经过发育,要想获得基因型完全相同的两个胚胎,可采用_技术。正常情况下,去核的卵细胞取自于女性卵巢排卵后在输卵管中_期的卵细胞。3.若将上述技术用于白血病病人的骨髓移植,图中患者是A型血且红绿色盲女性,提供卵细胞的女性是O型血色觉正常,则骨髓移植成功后患者的血型是_型。4.按上述方法克隆器官在器官移植方面的主要优点是_;若将重组的新细胞发育成的早期胚胎植入人体子宫发育成胎儿或婴儿,则该过程称为生殖性克隆,对此项技术的应用,我国政府的态度是什么?并谈谈你的理解。(至少写出两条理由)_。6、科学家尝试使用/位点特异性重组
10、系统,在检测目的基因导入成功后,删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因。其技术过程如下(图中的代表基因前的启动子),据图回答:1. 是一种只有34个碱基对构成的小型片段,是由两个13个碱基对反向重复序列和中间间隔的8个碱基对序列共同组成,自身不会表达,插入质粒后也不影响原有基因的表达,其碱基序列如下:酶能特异性地识别此序列并在箭头处切开,其功能类似于基因工程中的_酶。从遗传学角度分析, 酶改变质粒产生的结果相当于可遗传变异中的_。2.将重组质粒导入到植物细胞中最常用的方法是_。作为标记基因,抗除草剂基因用于检测目的基因是否导入成功的原理是_。3.经检测成功后,抗除草剂基因已没有用途,继续留在植物体
11、内可能会造成的安全问题是_。经酶处理后,质粒中的两个序列分别被切开后,可得到如上图右侧的这两个分子。由于_的原因,抗除草剂基因不再表达,之后会在培养过程中消失。4. 序列是有方向性的。如果经酶处理后,发现抗除草剂基因反向连接在质粒一上,则原来质粒一中这两个序列的方向是_。A.两个都是正向B.两个都是反向C.一个正向一个反向D.与方向无关 答案以及解析1答案及解析：答案：1.细菌、酵母菌等; 自我复制和稳定存在; 2.感受态; 质粒上有四环素抗性基因（或“受体菌获得抗四环素的特性”）; VP40基因探针3.在体外培养条件下能无限增殖且能产生单一成分的抗体; 克隆化解析：1.质粒存在于许多细菌及酵
12、母菌中,质粒能够在受体细胞中稳定存在且自我复制。2.用Ca2+处理大肠杆菌使其处于感受态,选择性培养基中加入四环素,能获得含有目的基因的受体菌,原因是质粒上含有四环素抗性基因。可利用VP40基因探针通过DNA 分子杂交法检测目的基因是否进入受体细胞。3.杂交瘤细胞的特点是既能够无限增殖又能产生单一成分的抗体,对杂交瘤细胞需要进行克隆化培养和抗体阳性检测,最终获得单克隆抗体。 2答案及解析：答案：(1)A;(2)2,4D;(3)乙; 除草剂;(4)BD;(5)1/3(6)积累越来越多自交系B的遗传物质/优良性状(7)(8)X4,X3,X2,X1解析：(1)质粒作为将目的基因导入受体细胞的载体,每
13、种限制酶的切割位点最好只有一个,否则切割后会导致基因缺失,影响基因的表达;限制酶的识别序列和切割位点位于DNA上,G基因编码的序列是蛋白质,没有限制酶的识别序列和切割位点;双酶切后,G基因和Ti质粒形成的两个黏性末端序列均不相同。故选A。(2)细胞脱分化形成愈伤组织,由结果可知,使用2,4-D时愈伤组织形成率最高。比较4个自交系,甲自交系中芽的分化率比较低,丙自交系中根的诱导率比较低,丁自交系中愈伤组织形成率比较低,乙自交系中愈伤组织形成率、芽的分化率和根的诱导率都相对较高,故最适合培养成愈伤组织作为转化受体。(3)获得抗除草剂转基因玉米自交系A,则筛选转化的愈伤组织,需使用含除草剂的选择培养
14、基。(4)含有内含子的报告基因位于农杆菌Ti质粒的T-DNA中,无农杆菌附着的未转化愈伤组织不含内含子的报告基因,不会出现蓝色;不论有无农杆菌附着,转化愈伤组织中都含有Ti质粒,含内含子的报告基因,出现蓝色;农杆菌附着的未转化愈伤组织,含内含子的报告基因位于农杆菌中,农杆菌属于原核生物,其中的报告基因不能正确表达,不会出现蓝色。故选BD。(5)由于转基因植株的核DNA中仅插入一个G基因,设基因型为GO,自交后代含G基因的植株基因型为GG或GO,比例为1:2,纯合子占1/3。(6)回交是指杂交后代与自交系B杂交,会使后代积累越来越多自交系B的遗传物质/优良性状。(7)自交系B不含抗除草剂基因,设
15、基因型为OO,则自交系A(GG)与之杂交得F1,基因型为GO,都含有G基因,再与自交系B(OO)回交得H1,基因型为GO和OO,比例为1:1,含有G基因的植株占1/2,筛选去除基因型为OO的植株后,剩余的都是基因型为GO的植株,再回交,则与H1结果相同,含有G基因的植株占1/2。若不筛选,则1/2GO、1/2OO植株回交得H2,基因型为1/4GO、3/4OO,含有G基因的植株占1/4,1/4GO,3/4OO植株回交得H3,基因型为1/8GO、7/8OO,含有G基因的植株占1/8。(8)G基因导入受体受体细胞后,不一定转录形成mRNA,转录形成的mRNA不一定翻译形成相应的蛋白质,翻译形成相应的
16、蛋白质,不一定表现出抗除草剂性状,所以检测出含G基因植株的比例由大到大依次是X4,X3,X2,X1。 3答案及解析：答案：（1）致癌基因表达载体的构建；同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶） （2）显微注射法；DNA分子杂交;（3）囊胚（4）免疫排斥反应；生理和组织；滋养层细胞（5）抗体（抗肝癌细胞抗体）；既能无限增殖又能产生特定抗体解析：本题考査基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识。（1)基因工程的核心是基因表达载体的构建；目的基因和栽体需用同种限制酶进行切割。 (2)采用显微注射法将目的基因导入动物细胞；检测目的基因是否导入受体细胞，采用DNA分子杂交技 术。（3)囊胚的内细胞团细胞属于E
17、S细胞。（4)受体子宫不会对外来胚胎产生免疫排斥反应，同时外来胚胎能与受体子宫建立正常的生理和组织联系，这是胚胎能成活的生理学基础。（5)肝癌细胞剌激B淋巴细胞，再将此淋巴细胞与骨髄瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生特异性抗体。 4答案及解析：答案：1.浆; B细胞或记忆B细胞; 2.血清; 由单一B细胞克隆而成的细胞群分泌产生的抗体3.灭活的病毒; 聚乙二醇; 5; AA、BB、AB、A、B4.特定的抗原; 细胞; 5.蛋白质工程; DNA解析：1.本题考查动物细胞免疫和体液免疫以及动物细胞融合和蛋白质工程等知识。在动物体内,抗体由浆细胞分泌。浆细胞由B细胞或记忆B细胞
18、增殖分化而来。2.抗体主要存在于动物血清中,因此从动物体内获取抗体需要从血清中分离。单克隆抗体是指由单一B细胞克隆而成的细胞群分泌产生的抗体。3.促使动物细胞融合的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒和电激等。当最多考虑细胞两两融合时,融合后可能还有未融合的细胞A和B,随机两两融合的细胞有AA、BB和AB,共5种细胞。4.抗体可识别癌细胞表面特定的抗原。T细胞对癌细胞攻击属于细胞免疫。5.通过蛋白质工程技术可以改造自然界已存在的蛋白质,但最终还是通过改造DNA分子来实现的。 5答案及解析：答案：1.全能性; 选择表达; 2.胚胎分割; 减数第二次分裂中期; 3.A; 4.解决了临床上供体器官不足和移
19、植后免疫排斥问题 ; 禁止生殖性克隆。严重违反了人类伦理道德；冲击了现有婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念解析： 6答案及解析：答案：1.限制酶; 基因重组; 2.农杆菌转化法; 抗除草剂基因和目的基因在同一个质粒上3.抗除草剂基因可能转移到杂草中; 抗除草剂基因前没有了启动子4.C解析：1.限制酶能够识别双链分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂, 酶能特异性地识别此序列并在箭头处切开,其功能类似于基因工程中的限制酶.从遗传学角度分析, 酶改变质粒产生的结果相当于可遗传变异中的基因重组。2.将重组质粒导入到植物细胞中的方法有:农杆菌转化法、基
20、因枪法、花粉管通道法,其中最常用的方法是农杆菌转化法,由于抗除草剂基因和目的基因在同一个质粒上,故抗除草剂基因可以用于检测目的基因是否导入成功。3.经检测成功后,抗除草剂基因已没有用途,继续留在植物体内可能会造成的安全问题是抗除草剂基因可能转移到杂草中,经酶处理后,质粒中的两个序列分别被切开后,可得到如上图右侧的这两个分子,基因表达载体的组成包括:目的基因、启动子、终止子、标记基因.由于抗除草剂基因前没有了启动子的原因,因此抗除草剂基因不再表达,之后会在培养过程中消失。4. 序列是有方向性的.据图分析,如果经酶处理后,发现抗除草剂基因反向连接在质粒一上,则原来质粒一中这两个序列的方向是一个正向一个反向。基因工程的应用 高考资源网版权所有，侵权必究！
