1、温馨提示： 此套题为Word版，请按住Ctrl,滑动鼠标滚轴，调节合适的观看比例，答案解析附后。关闭Word文档返回原板块。课时素养评价四微生物的实验室培养(30分钟100分)一、选择题(共5小题,每小题7分,共35分)1.在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中加入琼脂这一理想的凝固剂,下列关于琼脂的说法错误的是()A.不被所培养的微生物分解利用,对所培养的微生物无毒害作用B.在微生物生长温度范围内保持固体状态C.琼脂凝固点低,利于微生物的生长D.琼脂在灭菌过程中不会被破坏,透明度好,凝固力强【解析】选C。琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用,在灭菌过程中不会被破坏,透明度好,凝固力强,A、
2、D正确。琼脂在水中加热至95 时开始熔化,温度降至40 时才开始凝固,微生物生长最适宜的温度范围一般为1630 ,所以在微生物生长温度范围内保持固体状态,B正确。琼脂的凝固点相对于微生物生长的温度较高,凝固剂的凝固点不能太低,否则不利于微生物的生长,C错误。2.防止杂菌入侵获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是()A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境【解析】选B。对接种环
3、等金属用具进行灼烧灭菌,应在酒精灯火焰的充分燃烧层,即外焰处灼烧。3.巴氏消毒法常用于酒、奶等食品的消毒,该消毒法就是加热到7075 、保持30 min,或加热到80 、保持15 min,能杀死一般杂菌和病原菌。与灭菌的要求相比,巴氏消毒法()A.不能杀灭芽孢和耐高温的细菌B.能杀灭芽孢等休眠状态的细菌C.能杀灭各种细菌,包括芽孢D.能杀灭各种真菌,包括孢子【解析】选A。由于酒、奶等食品中的某些成分在高温下易被破坏,不宜采取高温灭菌法,虽然巴氏消毒法不能杀灭芽孢和耐高温细菌,但由于奶、酒等的污染并不严重,巴氏消毒法还是能达到消毒要求的。4.在细菌的连续培养过程中,要以一定速度不断添加新的培养基
4、,同时以同样速度放出老的培养基。如图表示培养基的稀释率(培养基的更新速率)与培养容器中营养物质浓度、细菌代时(细菌数目增加一倍所需的时间)、细菌密度的关系。下列相关叙述不正确的是()A.在稀释率很低的情况下,稀释率的增加会导致细菌密度增加B.稀释率从A到B的变化过程中,细菌生长速率不断提高C.稀释率超过B点后,营养物质浓度过高导致细菌死亡率增大,细菌密度降低D.为持续高效地获得发酵产品,应将稀释率控制在B点附近【解析】选C。稀释率超过B点,细菌密度降低,并不是由于营养物质浓度过高而使细菌死亡,营养物质浓度增加不会造成细菌死亡。图中细菌密度减少是由于稀释率过高,细菌数目减少的速率过大,无法通过繁
5、殖速率的提高来补充造成的。5.在斜面培养基上接种时,其正确的操作顺序是()用左手大拇指、食指和无名指夹住菌种试管和待接种的斜面试管,管口并齐,使斜面向上保持水平状态。右手拧松棉塞,但不取下。在火焰边用右手无名指和小指夹住两个棉塞,将它们取下,同时左腕转动,灼烧管口一周。将接种环伸入管内,让环先接触培养基上未长菌的部位,使环冷却,然后轻轻挑取少量菌体,立即将接种环抽出。右手拿接种环,在火焰上灼烧灭菌。在火焰旁迅速将沾有菌体的接种环伸到斜面培养基的底部,由里向外轻轻画蛇形细线。抽出接种环,再用火焰灼烧管口,并在火焰上方将棉塞塞上。A.B.C.D.【解析】选B。在斜面培养基上接种时,其正确的操作顺序
6、是:用左手大拇指、食指和无名指夹住菌种试管和待接种的斜面试管,管口并齐,使斜面向上保持水平状态;右手拧松棉塞,但不取下;右手拿接种环,在火焰上灼烧灭菌;在火焰边用右手无名指和小指夹两个棉塞,将它们取下,同时左腕转动,灼烧管口一周;将接种环伸入管内,让环先接触培养基上未长菌的部位,使环冷却,然后轻轻挑取少量菌体,立即将接种环抽出;在火焰旁迅速将沾有菌体的接种环伸到培养基的底部,由里向外轻轻画蛇形曲线;抽出接种环,再用火焰灼烧管口,并在火焰上方将棉塞塞上。故选B。二、非选择题(共4小题,共65分)6.(17分) (2019全国卷)回答下列与细菌培养相关的问题。(1)在细菌培养时,培养基中能同时提供
7、碳源、氮源的成分是_(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH,其原因是_。硝化细菌在没有碳源的培养基上_(填“能够”或“不能”)生长,原因是_。(2)用平板培养细菌时一般需要将平板_(填“倒置”或“正置”)。(3)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是_。(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过_处理,这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。【解析】(1)蛋白胨含有C、H、O、N等元素,葡萄糖只含有C、H、O,NaNO3不含有C,所以培养基中蛋白胨能同时提供碳源和氮源
8、。不同细菌生长繁殖所需要的pH不同,因此培养不同的细菌,需要调节培养基的不同pH。硝化细菌属于化能自养型细菌,可以将空气中的二氧化碳等无机物合成为有机物,它可以在没有碳源的培养基上生长。 (2)用平板培养基培养细菌时,一般需要将平板倒置,以防止培养皿盖上凝结的水珠滴落,导致污染。(3)不同种的微生物在一定条件下培养,可在培养基上形成大小、颜色、形状等不同的菌落,这是一种比较稳定的特征,可根据菌落的特征区分不同种的微生物。(4)使用后的培养基需要用强烈的物理或化学手段进行灭菌,以杀灭其中所有的微生物,避免污染环境。答案:(1)蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的pH不同能够硝化细菌可以利用空气中的CO2
9、作为碳源(2)倒置(3)在一定的培养条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征(4)灭菌7.(15分)(2018全国卷)回答下列与酵母菌有关的问题:(1)分离培养酵母菌通常使用_(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基,该培养基应采用_灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到菌落,菌落的含义是_。(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进_(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进_(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是_。【解
10、析】(1)麦芽汁琼脂培养基含糖量高,更适合酵母菌培养;该培养基应采用高压蒸汽灭菌法灭菌;若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,进行有氧呼吸产生H2O和CO2,释放能量多,菌体增殖快;若进行厌氧培养,进行无氧呼吸,产生乙醇和CO2,释放能量少,菌体增殖慢。(3)制作面包时,在面粉中添加一定量的酵母菌,因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖,产生CO2,CO2是气体,遇热膨胀而形成小孔,使得面包松软多孔。答案:(1)麦芽汁琼脂高压蒸汽由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(2)菌体快速增殖乙醇产生(3)
11、酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软8.(19分)微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。如图甲、乙、丙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图,请据图回答有关问题:(1)图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一,它称为_,若用该培养基培养大肠杆菌,除考虑营养条件外,还要考虑_、_和渗透压等条件。(2)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。(3)图乙是平板划线法接种操作示意图,正确的操作顺序是AB_(用字母和箭头表示);找出图乙中两处错误的操作(用字母表示):_、_。(4)图丙是某同学用平板划线法接种后的培养基
12、培养12 h后的实验结果,如果培养基上_,则说明无菌操作基本符合要求。【解析】(1)图甲所示操作为倒平板,需要在酒精灯火焰旁进行操作。培养基中除营养成分外,还应考虑pH、氧气、无菌、温度、渗透压等条件。(2)检测培养基是否被污染的方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生,如有菌落,说明该培养基已被污染。(3)平板划线法的操作顺序为灼烧接种环,冷却,挑取菌种,划线,灼烧接种环,划线,灼烧接种环,平板倒置培养,即ABGFECDH。图乙中C操作应在酒精灯附近进行,D中划线的首尾不应该相接。(4)同一菌种的菌落颜色、形状、大小基本一致,如有杂菌污染,会有异常菌落出
13、现,可根据菌落的特征确定该菌落是否为大肠杆菌。答案:(1)倒平板温度(氧气)pH(无菌)(2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生(3)GFECDHCD(4)生长的菌落颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点9.(14分)某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题。(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基的配方如下:牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂蒸馏水5.0 g10.0 g5.0 g20.0 g定容至1 000 mL其中提供氮源
14、的是_,提供碳源的主要物质是_。(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培养基时各成分要有合适的_。在烧杯中加入琼脂后要不停地_,防止_。(3)将配制好的培养基分装到试管中,加棉塞后若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧后放入_中灭菌,压力为100 kPa,温度为_,时间为_。灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力自然降到0时,将试管取出。如果棉塞上沾有培养基,此试管应_。(4)使用高压蒸汽灭菌锅时应注意,要先向锅内倒入_,并加热煮沸,将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。(5)从一支试管向另一支试管接种时应注意,接种环要在酒精灯_(填“内”或“外”)焰灭菌,并且待接种环_后沾取菌种,试管口不能
15、离开酒精灯火焰附近。将接种的试管在适温下培养,长成菌落后放入_冰箱中保藏。【解析】(1)牛肉膏和蛋白胨均为天然成分,均能提供碳源和氮源,但是提供碳源的主要物质是牛肉膏。(2)微生物的培养基的成分应根据微生物的需要,并有合适的比例。在烧杯中加入琼脂后易出现糊底现象,应不断用玻棒搅拌。(3)培养基应在高压蒸汽灭菌锅内灭菌,压力为100 kPa,温度为121 ,时间为1530 min。如果棉塞上沾有培养基,则很容易造成杂菌污染,应将培养基废弃不用。(4)高压蒸汽灭菌的原理是利用高温水蒸气杀死各种微生物,因此高压蒸汽灭菌锅内应加入适量水,以产生足够的水蒸气,水经加热煮沸后应排出冷空气,否则压力达到100 kPa时温度不够121 ,灭菌效果就会大打折扣。(5)接种环的灼烧要用酒精灯的外焰加热,并待接种环冷却后才能沾取菌种,否则将会杀死菌种。菌种的临时保藏需放入4 的冰箱中。答案:(1)蛋白胨、牛肉膏牛肉膏(2)比例用玻棒搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂(3)高压蒸汽灭菌锅121 1530 min废弃(4)适量水(5)外冷却4关闭Word文档返回原板块
