1、主动成长夯基达标1.某同学在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2 760、295和46，则菌落总数（个/mL）为()A.2.76104B.2.95104C.4.6104D.3.775104解析：菌落计数法，注意是计算不同稀释度的平均菌落数。首先选择平均菌落数在30300之间的，当只有一个稀释倍数的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘以稀释倍数即为该样品的细菌总数；若有两个稀释倍数的平均菌落数均在30300之间，则按两者菌落总数之比值来决定，若比值小于2应采取两者的平均数，若大于2，则取其中较小的菌落总数。本题295、46在30300之间，46103与295102比值为1.6，应
2、取二者平均数（46103+295102)2=3.775104。所有稀释倍数的菌落数均不在30300之间，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数。答案：D2.微生物发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种，消灭杂菌，获得纯种的方法不包括()A.根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基B.根据微生物缺乏维生素的种类，在培养基中增减不同的维生素C.根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸D.根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素解析：在微生物学中，要筛选优良单一的纯种必须用选择培养基，即通过加入某种特定的化学物质，允许特定种类的微生物生长，同
3、时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。而培养基中加入核酸并不能直接转化为微生物的遗传物质，因此对提纯分离菌种是无用的。答案：C3.PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93 左右的高温。如果请你来寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找（）A.土壤中B.海水中C.热泉中D.冷库中解析：在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的高温环境中去寻找。答案：C4.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（）A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、琼脂、水C.KH2PO4、Na2HPO4、
4、MgSO47H2O、尿素、琼脂、水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水解析：所用选择培养基的基本要求是满足分解尿素的细菌的生长条件，抑制或阻止其他微生物的生长。尿素是唯一的氮源。答案：A5.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL）（）A.2.34108B.2.34109C.234D.23.4解析：每克样品中的菌落数=（CV）M，其中C=234，V=0.1 mL,M=106。答案：B6.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个
5、菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有（）由于土样不同由于培养基污染由于操作失误没有设置对照A.B.C.D.解析：不同的土壤样品，培养基的质量等因素都可影响菌落数。设置对照实验可以排除上述因素的影响。答案：A7.关于土壤取样的叙述错误的是（）A.土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B.先铲去表层土3 cm左右，再取样C.取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D.应在火焰旁称取土壤解析：考查土壤取样的基本要求和方法。取样过程中要确保无杂菌的混入。答案：C8.请选出下列正确的操作步骤（）土壤取样称取10 g土壤取出加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中吸取0.1 mL进行平板涂布
6、依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A.B.C.D.解析：考查细菌分离和计数的实验操作步骤。答案：C9.关于测定土壤中细菌的数量，正确的叙述是（）A.测定土壤中细菌的数量，一般选用105、106和107倍的稀释液B.测定放线菌的数量，一般选用103、104和105倍的稀释液C.测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍的稀释液D.当第一次测定某种细菌的数量，可以将101107倍的稀释液分别涂布到平板上培养解析：测定真菌的数量，一般用102、103和104倍稀释；第一次测定某种细菌的数量，可用103107倍稀释；测定细菌数量，一般用104、105和106倍
7、稀释。答案：B10.关于微生物的培养，叙述错误的是（）A.细菌一般在3037 的温度下培养12 dB.放线菌一般在2528 的温度下培养57 dC.霉菌一般在2528 的温度下培养34 dD.不同种类的微生物，一般需要相同的培养温度和培养时间解析：不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。答案：D11.需要在火焰旁操作的有（）土壤取样称取土壤稀释土壤溶液涂布平板微生物的培养A.B.C.D.解析：微生物分离和计数的实验操作需要防止杂菌污染。土壤取样时要铲去表层土；微生物的培养需在适宜温度条件下。答案：D12.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（）A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示
8、剂B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红。答案：A13.土壤取样时最好选择哪种环境中的土壤做实验 （）A.街道旁B.花盆中C.农田中D.菜园里解析：在富含有机质的土壤表层，有更多的微生物生长。因此菜园里的土壤是最佳选择土壤取样的环境。答案：D14.下面是某同学做自生固氮菌分离实验的方案和观察结果：一、实验目的（略）二、实验材料和用具（略）三、实验方法和步骤1.接种（1）接种前，准备好盛有配方如下的培养基，放在培养皿
9、中并灭菌，供做实验用。NaNO3 2 g,K2HPO4 1 g,KCl 0.5 g,MgSO4 0.5 g,FeSO4 0.01 g，蔗糖30 g,琼脂1520 g，蒸馏水1 000 mL。（2）取10 g表层土壤，放在无菌研钵中，注入5 mL蒸馏水，用无菌玻璃棒搅拌均匀，备用。（3）将接种环放在酒精灯的火焰上灭菌，将培养皿盖轻轻放在桌面上，手拿培养皿。将接种环放在培养皿边缘冷却。然后，用接种环蘸取少量泥浆，轻轻点在培养基的表面，共点1520处。（4）接种后，轻轻盖上培养皿盖，将培养皿放在实验桌上。2.培养：将接种过的培养皿放入恒温箱，在2830 的温度下培养34天。3.观察：34天后，取出培
10、养皿，仔细观察培养基上的菌落，其中大而扁平、边缘呈波状或锯齿状并为褐色菌落的为自生固氮菌。4.镜检（略）该实验方案和观察结果有几处明显的错误，请指出并改正。解析：该题综合考查从土壤中分离某种微生物的具体操作步骤。涉及以下几方面的知识：根据自生固氮菌的特点如何制备选择培养基；取样、接种时的无菌操作；微生物的培养，不同微生物的培养条件不同；自生固氮菌的菌落特点。答案：（1）培养基中含氮源是错误的，应将NaNO3改为不含氮的钠盐。（2）用蒸馏水是错误的，应用无菌水。（3）把培养皿盖放在桌面上是错误的，改为略微打开培养皿盖。（4）没有写实验内容、接种人姓名、接种日期。（5）其中大而扁平、边缘呈波状或锯
11、齿状并为褐色菌落的为自生固氮菌是错误的，改为仔细观察稀泥浆周围出现的黏液（最初为无色透明乳白色褐色）。15.将50 mL牛奶煮沸，冷却到室温后倒入一消毒后的锥形瓶内，锥形瓶瓶口用棉团堵住，加入新鲜的花园土，每日观察牛奶的情况，共进行4天。（1）这个实验可证明的假设是 。（2）为这个实验所设计的对照实验是 。（3）实验结束时，牛奶会 ，检测方法是 。产生这一现象的原因是 。（4）牛奶在这个实验中的作用是 。（5）实验前先将牛奶煮沸的原因是 。（6）加入土样前，先让牛奶冷却到室温的原因是 。（7）用棉团堵住锥形瓶的原因是 。（8）实验前是否需要对锥形瓶进行消毒？ 。理由是 。解析：这是一道实验设计题，考查实验设计的原则、微生物的培养与鉴定、灭菌等知识。明确和把握题干信息是解题的关键。答案：（1）土壤中有微生物存在（2）在将土样放入锥形瓶前，先对其进行烘烤以杀死细菌（3）变酸可使蓝色的石蕊试纸变红土壤中的微生物进行发酵产生酸（4）为土壤中的微生物生长提供养分（5）杀死牛奶中存在的所有微生物（6）避免煮沸的牛奶杀死土壤中的微生物（7）阻止漂浮在空气中的微生物进入锥形瓶（8）需要保证在土样加入前，锥形瓶内无任何微生物
