1、双基限时练(五)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、选择题1关于微生物培养，叙述错误的是()A细菌一般在3037 下培养12天B放线菌一般在2528 下培养57天C霉菌一般在2528 下培养34天D不同种类的微生物，一般需要相同培养温度和时间解析不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌一般在3037 下培养12 d；放线菌一般在2528 下培养57 d；而霉菌一般在2528 下培养34 d。答案D2用作“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的培养基要严格()A防腐B消毒C灭菌 D化疗解析用作“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的培养基必须保证不含包括芽孢和孢子在内的所有微生物，所以
2、应采用高压蒸汽灭菌法。答案C3分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()加尿素不加尿素加琼脂不加琼脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐A BC D解析分离土壤中分解尿素的细菌，需用选择培养基，故培养基中要加琼脂；作为选择培养基，用尿素作为唯一氮源而不能加硝酸盐；分解尿素的细菌为异养型，培养基中需加葡萄糖作为碳源。答案C4下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是()A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上C将实验组和对照组平板倒置，37 恒温培养24 h48 hD确定对
3、照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析检测细菌总数，用蒸馏水配置培养基，常用高压蒸汽灭菌法灭菌后，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组置于适宜条件培养，在确定对照组无菌后，选择菌落在30300的一组平板为代表进行计数，故D项错误。A项是培养基的灭菌方法，B项设置了一系列对照实验，C项是细菌的培养方法，A、B、C三个选项均正确。答案D5请选出下列正确的操作步骤()土壤取样称取10 g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中吸取0.1 mL进行平板涂布依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀
4、释度A BC D解析分离分解尿素的细菌的过程是：取样稀释培养与观察，故正确顺序为。答案C6可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()A以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂D以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析在以尿素为唯一氮源的培养基中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，pH升高，加入酚红指示剂，指示剂将变红。答案A7需要在火焰旁操作的有()土壤取样称取土壤稀释土壤溶液涂布平板微生物的培养A BC D解析为了防止杂菌污染，称取土壤、稀释土壤和涂布平板均需在酒精灯火焰旁进行，取样的器具均需经过灭菌。微生物培养在恒
5、温箱中，需适宜条件使微生物生长，不能进行灭菌。答案D8在做“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养与观察，则乙组实验属于()A空白对照 B标准对照C相互对照 D条件对照解析本题中甲为实验组，乙为对照组，给实验组一定条件，给对照组不同条件，为条件对照。答案D9用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是()A未接种的选择培养基B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D接种了的选择培养基解析将菌液稀释相同倍数，接在含牛肉膏蛋白胨培养基比选择培养基中菌落数明显增
6、多，因此，含牛肉膏蛋白胨的培养基作为对照。答案C10用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是()A涂布了一个平板，统计的菌落数是230B涂布了二个平板，统计的菌落数是215、260，取平均值238C涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233解析在设计实验时，至少要涂布三个平板，作为重复组，才能增强说服力与准确度，C项三个平板中一个与另两个相差太多，说明操作中可能有错误。答案D11下列叙述错误的是()A因为土壤中各类微生物的数量
7、不同，所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离B测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同C只有得到了3个或3个以上菌落数目在30300的平板，才说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数D牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落解析土壤中各种微生物数量不同，细菌大约为70%90%，其次是放线菌，真菌最少，故不同类型微生物，要按不同稀释倍数进行，验证选择培养基作用，需用标准培养基作对照，通过比较两者菌落数来说明前者有选择作用，而只要得到2个或2个以上符合条件的平板即为成功。答案C12某生物兴趣小组以带有
8、落叶的表层土壤(深5 cm左右)为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表。下列有关叙述正确的是(多选)()A.该实验能探究不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用B该实验的自变量为土壤是否灭菌的处理，实验中的对照组是1和3C为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理D预期结论是1、3组的落叶不被分解，2、4组中的落叶被不同程度的分解解析该实验能探究不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用，土壤湿度是自变量，对照组是1、3，预期结果是1、3组的落叶不被分解，2、4组中的落叶被不同程度的分解，A、C、D项正确。答案ACD13菌落的特征包括
9、()菌落的形态菌落的结构菌落的大小菌落的颜色菌落的隆起程度菌落的数量A BC D解析不同种类的细菌形成的菌落不同，菌落特征包括菌落的大小、形态、颜色及菌落的隆起程度。答案A14某种细菌必须从环境中摄取亮氨酸才能正常生活，此菌株对链霉素敏感(即缺乏抗性)。实验者用诱变剂处理此种菌株，欲从经处理的菌株中筛选出不依赖亮氨酸且对链霉素不敏感(即有抗性)的变异类型，则应选用的培养基是下表中的()选项亮氨酸链霉素ABCD注：表格中“”表示加入，“”表示未加入；4种培养基除添加亮氨酸和链霉素有差异外，其他成分及条件均相同且适宜细菌生长。解析本题要求选育“不依赖亮氨酸且对链霉素不敏感的类型”，故培养基应满足无
10、亮氨酸(不依赖)有链霉素(不敏感)。答案C15在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有()由于土样不同由于培养基污染由于操作失误没有设置对照实验A BC D解析做分离分解尿素细菌实验时，出现不同结果，存在多种可能原因：可能由于所取土样不同，不同土样中含量可能不一致；如果由于培养基被污染，也可能导致结果偏高；另外，由于操作失误，稀释度不够，也可能导致结果不同。答案A二、非选择题16为了研究微生物的抗药性突变是自发产生的还是在环境因素的作用下产生的，1952年Lederberg夫妇利用大肠杆菌设计了一个
11、影印培养法实验。影印培养法的实验原理是：把长有数百个菌落的细菌母体培养皿倒置于包有一层灭菌丝绒布的木质圆柱体(直径略小于培养皿平板)上，使其均匀地沾满来自母体培养皿平板上的菌落，然后通过这一“印章”把母板上的菌落“忠实地”一一接种到不同的其他培养基上。下图就是利用影印培养技术证明大肠杆菌产生抗链霉素突变基因的实验。具体方法是：首先把大量对链霉素敏感的大肠杆菌涂布在不含链霉素的平板1的表面，待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基平板2上，随即再影印到含有链霉素的培养基平板3上。经培养后，在平板3上出现了个别抗链霉素的菌落。对培养皿2和3进行比较，在平板2上找到与平板3上那几个抗
12、性菌落的“孪生兄弟”。把平板2上与平板3上菌落相应的一个部位上的菌落挑至不含链霉素的培养液4中，经培养后，再涂布在平板5上。重复以上各步骤，最后在试管12中获得了较纯的抗性菌落。 根据以上材料回答下列问题： (1)大肠杆菌的同化作用类型为_，与酵母菌相比，大肠杆菌细胞在结构上的主要特点是_ _。(2)从培养基的功能上看，含有链霉素的培养基属于_培养基。若在培养皿的培养基中加入伊红和美蓝，则培养皿中长出的菌落颜色表现为_。(3)大肠杆菌抗链霉素基因存在于细胞的_结构上，在基因工程中，该结构常作为_。(4)3号、7号、11号培养基中加入链霉素的作用是_，3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多
13、，这说明了_。 (5)该实验最关键的设计思路是_。(6)你认为该实验得到的结论是_ _。解析本题通过微生物的培养与生物变异来源知识结合，突出考查学生分析问题，解决问题的能力。影印法是本题所给信息，从题中所给过程分析，2号、3号、6号和7号、10号、11号培养基为影印接种的对应结果。通过3、7、11号上抗链霉素菌株位置可找到2号、6号、10号上培养的抗性菌株。答案(1)异养型没有成形的细胞核(2)选择深紫色并带有金属光泽(3)质粒运载体(4)选择混合菌中的抗药性菌落生物的突变频率是很低的(5)通过影印接种的方法，在没有链霉素的培养基中获得抗链霉素的菌落(6)微生物的抗药性突变是自发产生的，而不是
14、在环境因素的作用下产生的17下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基，据表回答下列问题。(1)该培养基中含有的最主要碳源是_。该培养基除了能够提供碳源外，还可以提供_。(2)该培养基按物理性质划分属于_培养基，该培养基具有选择作用的原因是_。(3)在该培养基中，可以通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解，所依据的原理是_。该方法是在培养基中加入_，若尿素被分解，则培养基变成_色。解析据表分析可知：该培养基中含有的最主要碳源是葡萄糖，该培养基还能提供氮源、水和无机盐；按物理性质该培养基为固体培养基，且以尿素为唯一氮源，是选择培养基，只有能分解尿素的微生物才能生长繁殖；在分解尿素的过程中，微生物产生的
15、脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高，所以可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解。在培养基中加入酚红指示剂，如果变成红色，证明尿素被分解。答案(1)葡萄糖氮源、水和无机盐(2)固体该培养基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能生长繁殖(3)在分解尿素的过程中，微生物产生的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高酚红指示剂红18某研究所对受污染的某水库中的大肠杆菌进行了数量的测定。(1)研究人员首先配制了如下表所示的培养基，其中的蛋白胨主要为大肠杆菌的生长提供_。牛肉膏5.0 g蛋白胨10.0 gNaCl5.0 g琼脂20.0 gH2O定容至1 000 mL(2)研究人员取
16、污水10 mL加无菌水_mL制备稀释倍数为101的稀释液，并依次制备102、103、104、105、106的系列稀释液。(3)在每个稀释倍数的液体中均取出0.1 mL用_法接种样品至少_个培养皿。为避免杂菌污染，接种时要对实验者和实验室进行_，并且要在_附近进行操作。(4)培养后在稀释倍数为102的4个平板上菌落数分别为24、27、21、3，那么每m3中约含大肠杆菌_个。用这种方法统计样品中活菌数的原理是_ _。(5)用这种方法测定的细菌数量比实际活菌数量要少，这是因为_。解析本题考查微生物的培养和计数，蛋白胨可以为微生物的生长提供氮源和维生素等营养物质。微生物接种计数的方法一般是稀释涂布平板
17、法，为了避免杂菌污染，接种时要对实验者和实验室进行消毒，并且在酒精灯火焰附近操作。由于每个菌落一般是由一个细菌增殖而来，故可以通过计数培养基上的菌落数来代表细菌数，但当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，因此，用这种方法测定的细菌数量比实际活菌数量要少。答案(1)氮源和维生素(2)90(3)稀释涂布平板3消毒酒精灯火焰(4)2.41010在稀释倍数合适的时候，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌(5)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落191943年，曾获诺贝尔生理学或医学奖的美国科学家鲁里
18、亚和德尔布吕克设计实验，研究大肠杆菌的抗噬菌体突变是发生在接触噬菌体之前还是之后。请阅读以下资料回答问题。实验的方法和步骤如图所示：培养皿中培养基的基本配方：(1)在培养基中加噬菌体的作用是_；加伊红与美蓝的目的是_。(2)由于大肠杆菌的同化作用类型是_，因此，在培养基中还加入了一些相应的物质，其中_是大肠杆菌生长的主要碳源，_是氮源。(3)从生态学的角度看，噬菌体与大肠杆菌这两种生物之间的关系是_。(4)该实验有两个假设，假设一：大肠杆菌的抗噬菌体突变发生在大肠杆菌与噬菌体接触之前；假设二：大肠杆菌的抗噬菌体突变发生在大肠杆菌与噬菌体接触之后。你认为图中的实验结果支持上述哪个假设：_，如果另
19、一个假设成立的话；实验结果应该是：_。(5)在这个实验设计中，研究者根据培养皿中菌落数的差异推断_，从而证明假设的成立。请你分析出现A4和A5实验结果的原因：_ _。解析(1)(3)噬菌体与大肠杆菌为寄生关系，有些大肠杆菌对噬菌体具有抗性，利用加噬菌体培养基将其筛选出来。伊红美蓝培养基用于鉴别大肠杆菌，因其在此培养基上的菌落呈深紫色。(2)大肠杆菌同化作用类型为异养型，所以培养基中加了乳糖等含碳有机物。(4)由于生物的变异具有不定向性，且通过图示可以看出，将A试管中10 mL菌液先均分到50支试管中再培养20 h以后涂布到50个含噬菌体的平板上，菌落数有了明显的差异，说明抗性发生了差异；B试管
20、中10 mL菌液先一起培养24 h后再均分为50份分别涂布，结果各培养基菌落数相当，则说明假设一成立。若假设二成立，则A、B两组所有培养基上菌落数应无显著差异。(5)通过培养基上菌落数差异可以推断出大肠杆菌抗噬菌体变异的时间，A5菌落数为103，A4为7，说明A5变异时间早，经过了大量的繁殖，具有抗性的个体远远多于A4中的抗性个体。答案(1)选择具有抗噬菌体突变的大肠杆菌便于识别大肠杆菌的菌落(2)异养型乳糖蛋白胨(3)寄生(4)假设一A、B两组所有的培养基上菌落数没有显著差异(5)抗噬菌体变异发生时间的差异A5比A4发生突变的时间早，具有抗噬菌体突变的大肠杆菌数较多，培养皿中出现的菌落数就多
