1、选修 一第一章 微生物培养技术考纲要求三年考情1.微生物的分离和培养2.某种微生物数量的测定3.培养基对微生物的选择作用4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用2012北京,2012山东,2011山东,2011新课标全国卷,2010山东考点 一培养基配制1.培养基的成分营养物质含 义作 用主要来源碳源能提供碳元素的物质构成生物体的物质,异养生物的能源物质无机物:CO2、NaHCO3;有机物:糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等营养物质含 义作 用主要来源氮源能提供氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮代谢产物无机物:N2、NH3、氨盐、硝酸盐;有机物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子
2、生长必不可少的微量有机物酶和核酸的成分维生素、氨基酸、碱基等营养物质含 义作 用主要来源水细胞生命活动必不可少的物质不仅是良好的溶剂,还是结构物质培养基、大气、代谢产物无机盐提供除碳、氮元素以外的各种重要元素,包括某些大量元素细胞内的组成成分,生理调节物质;某些化能自养型细菌的能源;酶的激活剂培养基、大气2.培养基的分类种 类特 点应 用物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂观察微生物的运动、分类鉴定固体培养基微生物的分离、鉴定、活菌计数、保藏种 类特 点应 用化学成分天然培养基含化学成分不明的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确或用一定化学物质配制分类、鉴定用途选择培养
3、基添加某物质,抑制杂菌生长,促进所需微生物生长培养分离出特定微生物鉴别培养基根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂鉴别微生物3.培养基的配制原则(1)目的要明确:根据微生物的种类、培养目的等选择原料配制培养基,如培养自养型的微生物就不用加入有机营养物质。(2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要适宜:各种微生物适宜生长的pH范围不同。【思维拓展】不同生物需要的营养物质不同(1)微生物需要的营养成分有水、无机盐、碳源、氮源,有些微生物还需要特殊营养物质,如生长因子。(2)在人和动物中,营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。(3)在植物中,营养物质包括矿
4、质元素、水、二氧化碳三类。内容 种类主要方法应用范围概 念灭菌灼烧灭菌法酒精灯火焰灼烧微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属用具等,接种过程中的试管口或瓶口等用强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物,包括芽孢和孢子在内干热灭菌法干热灭菌箱160170加热1h2h玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属用具等能耐高温、需要保持干燥的物品高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌锅,100kPa,121,维持15min30min培养基等考点 二消毒与灭菌1.区别内容种类主要方法应用范围概 念消毒巴氏消毒法7075煮30min或80煮15min牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜进行高温灭菌的液体用较为温和的物理或化学方法
5、,杀死物体表面或内部的部分微生物煮沸消毒法100煮沸5min6min日常食品、罐装食品紫外线消毒法紫外线照射30 min接种室、接种箱、超净工作台化学药物消毒法用体积分数为70%75%的乙醇、碘酒涂抹,来苏水喷洒等用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒、空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等2.联系(1)都需借助理化性质营造微生物难以生存的不良环境。(2)其作用原理都是通过使蛋白质变性来抑制微生物的生命活动或杀死微生物。考点 三微生物的分离方法1.平板划线法、稀释涂布平板法、稀释混合平板法(1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其生长成单个的菌落,则这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。(2)目的
6、:分离由一个细菌繁殖而来的菌落。(3)菌落判断的依据:形状、大小、边缘、隆起度、颜色等。项目平板划线法涂布器涂布培养稀释涂布平板法不同点工具接种环涂布器过程接种环灭菌试管口灭菌沾取混合菌液接种(连续划线和交叉划线)制涂布器涂布器涂布培养液无菌滤纸覆盖相同点工具灭菌、酒精灯火焰旁操作工具灭菌冷却后才可使用(5)实例:从酒曲中分离酵母菌。(4)平板划线法与稀释涂布平板法比较：2.选择培养基分离法(1)原理:使分离对象大量繁殖,抑制其他微生物的生长。(2)适用范围:分离的微生物在混合样品中数量较少时。(3)实例:分离分解纤维素的细菌。【高考警示】平板划线法与稀释涂布平板法的注意问题(1)两种接种方法
7、特点不完全相同:平板划线法和稀释涂布平板法都能使细菌纯化,但平板划线法不易分离出单个菌落,不能计数;稀释涂布平板法能使单菌落分离,便于计数。(2)稀释涂布平板法的缺点:稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。(3)平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同:第一次操作:杀死接种环上原有的微生物。每次划线之前:杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。划线结束后:杀死接种环上残存的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。考点 四微生物的数量测定1.方法比较方法名称显微镜直接计数法间
8、接计数法稀释平板计数法操作步骤制成悬液显微镜下计数计算出单位体积内的微生物总数配制均匀的系列稀释液使其均匀分布于培养基内统计培养基中出现的菌落数方法名称显微镜直接计数法间接计数法稀释平板计数法优点所需设备简单能观察到微生物的形态特征能观察到菌落的特征在含菌数较少的情况下也可完成缺点难以计数微小的细菌计算公式每克样品中菌数=稀释倍数2.设置对照(1)目的:排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。(2)方法:证明培养基未被污染,用空白培养基作对照。证明选择培养基的选择作用,用牛肉膏蛋白胨培养基接种等量同种菌液作对照。【高考警示】(1)为了使结果接近真实值,应设置三个或三个以上
9、的平板,计算出菌落平均数。(2)计算时明显偏离实际值(本组实验其他平板计数值)的要舍弃掉后求平均值。(3)对照实验的设计首先要明确设计的目的,分析出实验的自变量之后才能准确设计。热点 一培养基配制及对微生物的分离作用【典例1】(2011新课标全国卷)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染,某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即和。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明
10、该菌株的降解能力。(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。【解析】实验目的是为了筛选出可以分解原油的高效菌株,因此在筛选的时候选择培养基的碳源为原油。纯化分离微生物的方法有两种:平板划线法和稀释涂布平板法;灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。答案:(1)原油 选择(2)平板划线法 稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰【互动探究】(1)若在该培养基中加入青霉素,能更好地起到筛选作用吗?提示:不能。青霉素培养基往往是真菌选择培养基,在加青霉素的培养基中,细菌生长被抑
11、制,因而不能筛选出能高效降解原油的菌株(细菌)。(2)细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌?提示:培养基、手、接种环。高压蒸汽灭菌的设备,通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环。热点 二微生物的纯培养【典例2】在农业生产中发现一种被广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。(1)制备土壤浸出液
12、时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行处理。(2)要在长期使用该除草剂的土壤中分离出目的菌,从物理性质、用途方面来看,上述培养皿中培养基的特点是。(3)在划线培养时,只有很少的菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是_或有氧条件抑制了这些细菌的生长。(4)在固体培养基上形成的菌落中,无透明圈菌落利用的氮源主要是,有透明圈菌落利用的氮源主要是,据此可筛选出目的菌。(5)科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B,然后对突变株A和B进行实验,结果如表所示:接种的菌种一般培养基实验处理及结果A不生长添加营养物质甲,能生长B不生长添加营养物质乙,能生长A+B能生长不添加营养物质甲、乙都
13、能生长突变株A不能在一般培养基上生长的原因是_。突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是。【解析】(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理。(2)从物理性质方面来看,题图中的培养基属于固体培养基;从用途方面来看,该培养基属于选择培养基。该除草剂为含氮有机化合物,降解该除草剂的细菌可以以除草剂为氮源。故该培养基中除加入除草剂外,不能再含有其他氮源,以选择出能降解该除草剂的细菌。(3)在以该除草剂为惟一氮源的培养基上,不能降解该除草剂的细菌(除具有固氮能力的细菌外)是不能生长的。(4)含一定量该除草剂的培养基不透明,形成透明圈是该除草剂被某些细菌降解的
14、结果。(5)突变株A的生长依赖于营养物质甲,突变株B的生长依赖于营养物质乙。不添加营养物质甲和乙,二者混合培养时都能生长,最可能的原因是突变株A为突变株B提供了营养物质乙,突变株B为突变株A提供了营养物质甲。答案:(1)稀释(2)在无氮固体培养基中添加了该除草剂(3)培养基中缺少这些细菌可利用的氮源(4)氮气 该除草剂(5)突变株A缺乏合成营养物质甲所需要的酶 突变株A生长需要营养物质甲,突变株B可以提供;突变株B生长需要营养物质乙,突变株A可以提供【变式训练】从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是:采集菌样富集培养纯种分离性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适
15、合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从环境中采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基,并在条件下培养。(3)接种前要对培养基进行处理。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在条件下进行。(4)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是,图B效果的接种方法是。一同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是,应当怎样操作才可避免此种现象?_。(5)如果探
16、究温度对纤维素酶活性的影响,自变量是,应该保持等不变(至少答两项)。【解析】(1)筛选菌种应从适于目的菌种生长、繁殖的环境中寻找,故培养噬盐菌应从高盐环境中采集。(2)富集培养时培养基及培养条件应能促进目的菌的生长、繁殖。(3)微生物的分离及培养中必须保证无菌,包括培养基的灭菌和操作过程的灭菌等。(4)纯化培养中接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,前一种方法形成的菌落分布较均匀,后一种方法形成的菌落分布不均匀,先划线的部分菌落密集甚至相连,后划线的部分菌落分布稀疏。(5)探究温度对酶活性的影响时,温度为自变量,酶活性为因变量,其他变量如底物和酶的用量、pH、反应时间等均为无关变量。答案:(1
17、)海滩等高盐(2)以淀粉为惟一碳源 高温(3)高压蒸汽灭菌 无菌(4)稀释涂布平板法 平板划线法 菌液浓度过高增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染 严格无菌操作;或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌 每划一个新区域前都要对接种环进行灭菌处理)(原因与操作要对应)(5)温度 纤维素的量与浓度、反应时间、pH热点 三微生物的计数【典例3】下面是探究如何从土壤中分离出自生固氮菌与计数的实验,完成下列问题:实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表层土壤制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离。材料用具
18、:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛有9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛有90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。(1)方法步骤:倒平板:分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在操作。制备土壤稀释液:取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1mL,转至盛有9mL的无菌水的试管中,依次稀释到107稀释度。涂布:按照由107103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布个。培养:放入恒温箱内,在2830下培养3d4d。细菌的计数:当菌落数目稳定时,选取
19、菌落数在的平板进行计数。如果测定的平均值为50,则每克样品中的菌落数是。(稀释度是105)(2)预期结果:相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数(选填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。原因是_。【解析】(1)在酒精灯火焰旁倒平板,可以减少杂菌的污染。为了保证结果准确,一般设置35个平板,选择菌落数在30300的平板进行计数,并取平均值,则每克样品中的菌落数为(500.1)105=5107。(2)牛肉膏蛋白胨培养基作为对照,以消除无关变量对实验结果的影响,该培养基适合其他细菌生存,所以,它比无氮培养基上的菌落数目多。答案:(1)酒精灯火焰旁 31303005107(2)多于 无氮培养基
20、上只有土壤中的自生固氮菌能生存繁殖,而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存【互动探究】(1)据上题可知,在稀释涂布平板法中,为何需涂布三个平板?提示:对照作用、减少实验误差等。一是作为对照实验,判断实验操作的准确性;二是作为重复实验,统计时取平均值,以减少实验误差。(2)用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目,其结果与实际值相比如何?提示:比实际值低。培养基上的一个菌落也可能是相连的两个或多个细胞,而统计结果一般用菌落数来表示,因此统计的菌落数要少于活菌的实际值。1.下表是一种培养基的配方,请回答:牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水0.5g1g0.5g2g200mL(1)该培养基从物理性质来
21、说,属于培养基。(2)无菌操作是微生物培养最基本的要求,其中灭菌指的是。对于培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是。(填代号)化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌紫外线灭菌 高压蒸汽灭菌巴氏消毒法(3)在平板划线法中,每次灼烧接种环后,为什么要等其冷却后再进行划线?。(4)稀释涂布平板法统计菌落数目时,一般选择菌落数在_的平板进行计数,在某一稀释度下平板上的平均菌落数为100个,所用稀释液的体积为0.2mL,稀释倍数为105时,则每毫升样品中的菌落数为。(5)以尿素为惟一氮源的培养基中加入指示剂,培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂将,利用这一特点,可准确地鉴
22、定该种细菌能够分解尿素。【解析】(1)培养基的配方中有琼脂,该培养基从物理性质来说属于固体培养基。(2)根据灭菌定义是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。对于培养基高压蒸汽灭菌,培养皿干热灭菌,接种环灼烧灭菌,实验操作者的双手化学消毒(酒精),空气紫外线灭菌,牛奶巴氏消毒法。(3)在平板划线法中,每次在灼烧接种环后,要等其冷却后再进行划线,以免接种环温度太高,杀死菌种。(4)稀释涂布平板法统计菌落数目时,一般选择菌落数在30300的平板进行计数;每毫升样品中的菌落数=(1000.2)105=5107。(5)鉴定该种细菌能够分解尿素,培养基中应加入酚红指示剂,培养某种细
23、菌后,如果pH升高,指示剂将变红。答案:(1)固体(2)使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子(3)以免接种环温度太高,杀死菌种(4)303005107(5)酚红 变红2.大肠杆菌是“明星菌”,在生物技术上常被称为“工程菌”。某生物小组的同学利用实验室提供的某品系大肠杆菌及其他必需材料,对该品系大肠杆菌进行了培养、计数。(1)大肠杆菌在生长过程中对各种营养成分所需的量不同,故制备培养基时各营养成分要有合适的。(2)在制备固体培养基进行倒平板操作时,平板冷凝后,甲同学将平板倒置,其原因是。(3)乙同学采用平板划线法接种,获得单菌落后继续筛选,在每次划线之前都要灼烧接种环,其目
24、的是_。(4)丙、丁同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下两种统计结果:丙同学在该浓度下涂布了一个平板,统计的菌落数为230;丁同学在该浓度下涂布了3个平板,统计的菌落数分别为21、212、256,然后取其平均值163作为统计结果。请评价这两位同学的实验结果的有效性:丙同学的结果,原因是。丁同学的结果,原因是。(5)戊同学在测定大肠杆菌的密度时发现培养基上还有其他杂菌的菌落,由此他判断该品系大肠杆菌被污染了。他的判断是否确切?为什么?。【解析】(1)从培养基制备的重要原则入手分析,制备时要注意控制各种营养物质的比例。(2)平板冷凝后培养皿盖上
25、会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。(3)灼烧接种环的目的是杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,以免对实验结果造成影响。(4)实验时,至少要涂布3个平板作为重复组,才能增强实验的说服力和准确性,丁同学虽然涂布了3个平板,但其中一个平板上的菌落数与另外两个平板上的菌落数相差甚远,故不能取这3个平板上的菌落数的平均值作为统计结果。(5)判断杂菌的来源时,只有排除其他可能的情况才能得出确切的结论。答案:(1)比例(2)培养皿上会凝有水珠,平板倒置可防止水珠落入培养皿中而造成污染,还可使培养皿表
26、面的水分更好的挥发(3)杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种(4)无效 没有设置重复组实验,结果不具有说服力无效 一个平板上的菌落计数结果与另外两个相差太大(或在操作过程中可能出现了错误,或只简单地计算了平均值)(5)不确切。因为不能确定杂菌是来自培养基还是来自培养过程3.白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一,应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子附着在宿主表皮、气孔或消化道上,遇适宜条件开始萌发,生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮,通过芽管入侵虫体,在虫体内生长繁殖,消耗宿主体内养分,产生各种毒素,形成大量菌丝和孢子,布满虫体全身。请回答下面的问
27、题:(1)从自然菌样中筛选较理想生产用菌种的一般步骤是:采集菌样富集培养性能测定。白僵菌的菌样应从采集。(2)分离白僵菌菌种的培养基属于培养基。在配制白僵菌培养基时加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分,蔗糖属于营养物质。(3)白僵菌纯化培养时常用的接种方法是和。(4)分离与培养过程中,培养基和接种工具都要进行处理,利用高温可以使微生物的等物质发生变性。【解析】(1)选择培养基用于选择分离菌种。(2)蔗糖属于微生物的碳源。(3)微生物常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。(4)微生物分离培养过程中,培养基、接种工具都要进行灭菌处理,其原理是高温使蛋白质、核酸变性而使细胞失去活性。答案:(1)纯种
28、分离 感病昆虫体内(2)选择 碳源(3)平板划线法 稀释涂布平板法(4)灭菌 蛋白质和核酸【方法技巧】选择培养基的使用方法(1)在培养基中加入某种化学物质:例如,加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌;加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在主要营养成分完整的基础上加入。(2)改变培养基中的营养成分:例如,缺乏氮源时可以分离出固氮微生物;石油作为惟一碳源时,可以分离出消除石油污染的微生物。(3)改变微生物的培养条件:例如,将培养基放在高温环境下培养,可以得到耐高温的微生物。4.(2013延安模拟)生产实践中很多的菌种来自土壤,从土壤中分离微生物的实验流程如下:土壤取样选择培养梯度稀释鉴
29、别培养。请回答下列有关问题:(1)将土壤浸出液接种到特定培养基上,可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来,获得纯种酵母菌,这一过程叫做。在培养酵母菌的过程中,对培养基、接种环常采用的灭菌方法分别是。(2)在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中,影响酵母菌酒精发酵的主要因素有,常使用的方法从发酵液中提取纯酒精。(3)从土壤中分离纤维素分解菌,最好选择在环境中采集土样,所选择的培养基应以作为唯一碳源。(4)纤维素分解菌能够合成纤维素酶,为了使纤维素酶反复使用,可以对纤维素酶进行处理,处理的方法有吸附法、共价键结合法和法。【解析】(1)在微生物培养过程中,培养基常用高压蒸汽灭菌,接种环常用灼烧灭菌。(2
30、)温度、pH影响酶的活性,氧气浓度影响发酵产物。因酒精沸点较低,故可用蒸馏法对酒精进行提纯。(3)纤维素分解菌生活在富含纤维素的环境中,分离所用的培养基应以纤维素作为唯一碳源,抑制以其他有机碳为碳源的菌类生长。(4)对酶进行固定化处理可以使酶被重复使用,提高利用率。答案:(1)纯培养 高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌(2)温度、pH、氧气浓度等 蒸馏(3)富含纤维素的 纤维素(4)固定化 包埋5.(能力挑战题)现在大力提倡无纸化办公,但是每年仍然不可避免地产生大量的废纸,其主要成分是木质纤维,人类正努力将其转化为一种新的资源乙醇。如图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工艺流程,请回答相关问题:(1
31、)自然界中环节需要的微生物大多分布在的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以为碳源、并加入的培养基上,筛选周围有的菌落。(2)在如上所述的筛选过程中获得了三个菌落,对它们分别培养,并完成环节,且三种等量酶液中酶的浓度相同,则你认为三种酶液的活性(一定相同、不一定相同、一定不同),可以通过_进行定量测定来鉴定其活性是否相同。(3)根据测定结果,环节常选择木霉,则中获得的酶是酶。(4)生产中可以满足环节的常见菌种是,为了确保获得产物乙醇,环节要注意。(5)该技术虽然有广阔的前景,但存在酶的成本高等问题,为了降低成本可利用等技术使酶能够重复利用。【解析】(1)富含纤维素的土壤中,含有大量以纤维素为碳
32、源的纤维素分解菌。刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素分解后,复合物无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,通过此方法来筛选纤维素分解菌。(2)酶液中酶的浓度相同,酶的活性不一定相同,可通过测定纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖量是否相等来鉴定其活性是否相同。(3)木霉能产生纤维素酶,可以将纤维素分解。(4)在乙醇发酵中常用的微生物是酵母菌,在接种过程中一定要避免杂菌污染。乙醇是酵母菌无氧发酵的产物,发酵过程中一定要保持无氧的环境。(5)可通过固定化酶技术使酶能够反复利用来降低酶的成本。答案:(1)富含纤维素(其他答案合理也可,如落叶较多等)纤维素 刚果红 透明圈(2)不一定相同 对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖(3)纤维素(4)酵母菌 发酵装置的密闭性(或保证无氧条件等)(5)固定化酶
