1、第二章 克隆技术第二节 植物的克隆植物克隆理 论 基 础植物克隆的方法）植物组织培养植物细胞的全能性技 术 基 础植物克隆的发展(不要求)一、植物细胞的全能性1、定义：植物体的每个有核的生活细胞都具有发育成完整植株的潜能。2、原因：植物体的每个有核的生活细胞含有发育成完整植株所需的全套遗传物质(或全套基因组)。3、特点：（2）不同植物或同一植物的不同基因型的个体，由于个体间的遗传性差异，细胞的全能性表达程度也不同。受精卵生殖细胞体细胞（1）不同植物细胞全能性表达的难易程度不同：一般情况：细胞分化程度越高，全能性越难表达（特例：生殖细胞分化程度高，且全能性易表达）（3）长期培养中,培养物胚胎发生
2、和器官形成能力会下降。遗传物质的改变 染色体畸变 细胞核变异 非整倍体的产生 细胞或组织中激素平衡被打破 对外源生长物质的敏感性发生改变 其他原因产生了缺乏成胚性的细胞系生长发育条件的改变（2）尽量选择性状优良、细胞全能性表达充分的基因型。4植物克隆成功的条件：（1）明确特定植物细胞全能性表达的条件。二、植物组织培养1植物组织培养的程序(4)培养：诱导形成愈伤组织、诱导再生出新植株(1)配制培养基(2)消毒、取组织块(3)接种2植物组织培养的发育过程离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体植物体脱分化再分化外植体3植物组织培养的方法(1)细胞培养指将组织培养过程中形成的愈伤组织或其他易分散的组
3、织置于液体培养基中，进行悬浮培养，得到分散游离的悬浮细胞，通过继代培养使细胞增殖，从而获得大量的细胞群体的一种技术。(2)器官培养植株器官愈伤组织胚状体试管苗植株指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体、指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体、无菌培养。无菌培养。(3)原生质体培养愈伤组织胚试管苗植株植物组织细胞愈伤组织细胞悬浮培养细胞原生质体纤维素酶和果胶酶0.5-0.6mol/L的甘露醇植株细胞愈伤组织单细胞胚试管苗植株4、植物组织培养的应用（1）植物的快速繁殖（2）无病毒植物的培育（3）提取细胞代谢产物（4）制造人工种子（5）转基因植物的培育培养植物细胞（包括原生质体）
4、，借助基因工程的方法，将外源遗传物质（）导入受体细胞（包括原生质体受体）中，或通过细胞融合，显微注射等将不同来源的遗传物质重新组合，再通过对这些转基因细胞或重组细胞进行培养，获得具有特定性状的新植株植物细胞工程的概念和操作过程植物细胞培养技术植物器官培养技术原生质体培养技术植物细胞杂交技术 无机营养成分：水、矿质元素 有机营养成分:蔗糖、氨基酸和维生素 琼脂：0.7-1%激素：生长素，细胞分裂素 PH值：5.06.0植物组织培养基主要成分切取接种愈伤组织试管苗适量的激动素和细胞分裂素配比可诱导芽的分化。适量的吲哚乙酸及适当减除其他某些激素，可诱导生根。细胞分裂素中等,生长素少去壁去壁纤维素酶果胶酶原生质体植物细胞原生质体融合离心、振动、电刺激、聚乙二醇再生细胞壁杂种细胞去分化愈伤组织杂种植株激素筛选等量激素再分化植物体细胞杂交试管苗大规模培养移栽至土壤
