1、卷必考题型专练6现代生物科技专题(限时：25分钟)1(2016梅州检测)植酸酶在饲料行业中广泛应用，其可以分解动物饲料中的天然有机磷。饲料企业使用植酸酶主要是为了提高磷的利用率、节省饲料配方空间，降低成本。请回答下列问题：(1)饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性，利用蛋白质工程技术对其进行改造时，其基本途径是：从预期的植酸酶的功能出发设计预期的植酸酶的结构推测植酸酶应有的_序列找到相对应基因的_序列。(2)培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。在获得转基因植株的过程中，其核心步骤是_，将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是_，目的基因导入受体细胞后，是否可以稳
2、定存在并表达，还需进行分子检测，需检测的分子有_。(3)为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过_法转入猪的受精卵中，该受精卵培养至一定时期可通过_方法，从而一次得到多个转基因猪胚胎，进而获得多个转基因猪个体。【解析】(1)蛋白质工程的过程：(1)根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能设计预期的蛋白质结构推测应有氨基酸序列找到对应的脱氧核苷酸序列(基因)。(2)基因工程的核心步骤为基因表达载体的构建，基因工程中，通常利用农杆菌转化法将目的基因导入植物的受体细胞。目的基因的检测与鉴定包括以下几个，检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因DNA分子杂
3、交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质抗原抗体杂交技术。(3)基因工程中，目的基因导入动物细胞的受精卵中时，一般用显微注射法。受精卵培养到桑椹胚或囊胚时期可以利用胚胎分割移植方法，一次得到多个转基因猪个体。【答案】(1)氨基酸脱氧核苷酸(碱基)(2)基因表达载体的构建(构建表达载体)农杆菌转化法DNA(目的基因、植酸酶基因)、mRNA(目的基因转录的mRNA、植酸酶基因转录的mRNA)、蛋白质(植酸酶)(3)显微注射胚胎分割2(2016西工大附中)以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。 【导学号：15482101】(1)上图中过程的完成采用的方
4、法有：_，依据的生物学原理是_。(2)过程要用到的酶有_，过程采用的方法叫_。上图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶(两种酶切割序列完全不同)切割位点。若用限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离，分析得如下表。分子量(kb)1.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0酶M酶N酶M酶N凝胶电泳结果(1kb1 000对碱基，表示检测到该片段的存在)(3)该质粒长度为_kb，在该质粒中，M酶与N酶的切割点分别有_、_个。(4)氨苄青霉素抗性基因的作用是_。(5)在表达载体中，启动子的作用是_识别和结合的部位，驱动基因的_。【解析】(1)上图中过程表示动物细胞融合，采用
5、的方法有：用聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒，依据的生物学原理是细胞膜具有流动性。(2)过程表示逆转录，需要逆转录酶、DNA聚合酶，过程将目的基因导入微生物细胞采用的方法叫感受态细胞法。(3)该质粒为环状DNA，用酶M得到3个片段，则有3个切点。用酶N得到2个片段，则有2个切点。用酶N切割得到2个片段的长度分别为7和9，则该质粒的长度为16 kb。(4)氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因(鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的受体细胞筛选出来)。(5)在表达载体中，启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录。【答案】(1)用聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒细胞膜具有
6、流动性(2)逆转录酶、DNA聚合酶感受态细胞法(3)1632(4)作为标记基因(鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的受体细胞筛选出来)(5)RNA聚合酶转录3(2016湖北八校模拟)请回答下列有关胚胎工程和基因工程方面的问题：(1)目前，科学家通过细胞核移植实验，培育出多种哺乳动物新类型。在哺乳动物的核移植实验中，一般通过_(物理方法)将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育，当胚胎发育到_阶段时，将胚胎植入另一雌性(代孕)动物体内。(2)在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行_处理。另外，培养的卵母细胞需要发育至_，该时期在显微镜下可观察到次级
7、卵母细胞和第一极体。(3)利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是_。(4)若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、_、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的_(填“受精卵”或“乳腺细胞”)，导入方法是_。【解析】在核移植实验中通过电刺激可将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育；当胚胎发育到桑椹胚或囊胚时可进行移植；在体外受精时，需将收集的精子进行获能处理，并将卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才能进行受精；利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移
8、植的原因是体细胞分化程度高，不容易恢复全能性；基因工程中的基因表达载体包含目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等；动物基因工程中将目的基因导入的受体细胞是受精卵，用显微注射法导入。【答案】(1)电脉冲(或电刺激)桑椹胚或囊胚(2)获能M中期(减数分裂第二次分裂中期)(3)体细胞分化程度高，不容易恢复全能性(4)人干扰素基因(或目的基因)受精卵显微注射法4(2016高考押题卷)请回答下列有关细胞工程问题：(1)植物组织培养技术所依据的生物学原理是_。欲利用植物组织培养技术培育无病毒植株，选材时一般选取_。(2)在进行体细胞杂交之前，必须先利用_酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体。在进行
9、原生质体间的融合时，常使用的化学诱导剂是_。(3)在进行动物细胞培养之前，需先用_酶处理组织块，使其分散成单个细胞。进行动物细胞培养时，所需气体主要有_；另外，所用的合成培养基中通常需加入_等一些天然成分。(4)制备单克隆抗体过程中，经选择培养得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和_，经多次筛选可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。【解析】(1)植物分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，所以一般选取茎尖或根尖培育无病毒植株。(2)欲得到所需的原生质体，常用纤维素酶和果胶酶去除正常植物细胞的细胞壁。诱导原生质体间的融合常使用的诱导剂是聚乙二醇(PEG)。(3)由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此，在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。【答案】(1)植物细胞的全能性茎尖或根尖(2)纤维素酶和果胶聚乙二醇(PEG)(3)胰蛋白酶或胶原蛋白O2和CO2血清、血浆(4)抗体检测
