1、第六章 蛋白质和DNA技术第一节 蛋白质的提取和分离(时间:30分钟满分:50分)考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难提取和分离蛋白质的方法原理1、2、63、4提取和分离蛋白质的过程578一、选择题(共6小题,每小题4分,共24分)1带电荷的蛋白质在电场中移动的速度主要取决于 ()。A所带的电荷多少B蛋白质的分子大小C蛋白质相对分子质量D蛋白质的分子大小和所带的电荷多少答案D2使用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于 ()。A电荷的多少 B分子的大小C肽链的多少 D分子形状的差异答案B3下列不是蛋白质的提取和分离的实践意义的是 ()。A可以更加快速、简便、准确地对
2、细胞癌变作出诊断B发现和提纯了胰岛素,救助了数千万的糖尿病患者C绘制蛋白质指纹图谱D更好的参与“人类基因组计划”答案D4下列说法错误的是 ()。A蛋白质分离提纯技术,包括离心技术、层析技术和电泳技术等B电泳技术的特点是快捷灵敏、简便易行C聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PAGED不同蛋白质的混合溶液,在经过同一个电场电泳后,会在凝胶上形成不同的带纹,每一种带纹就是一种蛋白质答案D5下列有关血清蛋白的提取和分离叙述中,不正确的是 ()。A分离胶和浓缩胶单独存在时具有神经毒性,应避免接触皮肤B如果待测洗脱液不能再分离,则这个带纹中很可能含有一种单纯蛋白质C将已脱色的凝胶板自然干燥,即可获得电泳谱带D脱色时用
3、体积分数为7%的醋酸溶液浸泡漂洗数次答案C6分离纯化蛋白质的技术包括 ()。A电泳法 B离心沉降法C透析 D以上方法皆可以答案D二、非选择题(共2小题,共26分)7(10分)红细胞中含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2。实验室中常选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验、提取和分离血红蛋白,请回答下列有关问题。(1)实验前获取新鲜血液,要切记在采血器皿中预先加入柠檬酸钠,取血后,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。其中加入柠檬酸钠的目的是_。(2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析,这就是样品的粗分离。透析的目的是: _。透析的原理是: _
4、。(3)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。请分析样品纯化的目的是_。解析本题主要考查蛋白质的分离与纯化的基本原理及实验流程。(1)在新鲜血液中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。(2)透析是利用透析袋允许小分子物质自由进出,而大分子物质则保留在透析袋内,达到除去平均相对分子质量较小的杂质的目的。(3)样品纯化的目的是将平均相对分子质量不同的杂质蛋白去除。答案(1)防止血液凝固(2)去除平均相对分子质量较小的杂质透析袋可使小分子物质自由进出,而大分子物质则不能(3)将相对分子质量大的杂质蛋白去除8(16分)科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白,这种蛋白质具有极强的抗菌能力,受到研究者重视。(1)分离该抗菌蛋白可用电泳法,其原理是根据蛋白质分子的_、大小及形状不同,在电场中的_不同而实现分离。(2)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_和_。(3)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后,比较两种培养基中菌落的_,确定该蛋白质的抗菌效果。(4)细菌培养常用的接种方法有_和_。实验结束后,对使用过的培养基应进行_处理。答案(1)电荷(带电情况)迁移速度(2)碳源氮源(3)数量(4)平板划线法稀释涂布平板法(稀释混合平板法)灭菌