1、酵母细胞的固定化一、研究背景 酶是生物细胞产生的具有催化作用的一种有机物，对于细胞的代谢极其重要。同学们知道，理论上催化剂在反应前后物质的质量等均不改变，那么酶应该可以为人们所反复利用。而实际上，大多数情况下，人们发现：1、酶对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感；2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；3、反应后的酶混在产物中，可能影响产品质量。 怎样解决这样的问题呢？二、设想 将酶固定在不溶于水的载体中，使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以反复利用。三、实际操作1、固定化细胞技术： a、概念： 固定化酶和固定化细胞技术是医用物理或化学技术将
2、酶或细胞固定在一定空间的技术 b、操作方法： 包埋法：适合固定化细胞，酶分子太小； 常用的包埋材料为：琼脂糖，醋酸纤维素，聚丙烯酰胺，明胶和海藻酸钠。 物理吸附法和化学结合法 c、特点： 固定化酶技术优点：既能与反应物接触，又能与产物分离，可反复利用； 固定化酶技术不足：只能催化一类反应； 固定化细胞技术优点：能催化一系列反应，成本低，操作容易 固定化细胞技术不足：与反应物不容易接触，可能导致催化效率下降2、酵母细胞的固定化操作a 酵母细胞的活化：称取1g干酵母，置于50ml小烧杯中，加10ml水，搅拌均匀，放置1h，活化b 配置物质的量浓度为0.05mol/l的CaCl2溶液：称取0.83g
3、无水CaCl，置于200ml小烧杯中，加入150ml水，充分溶解备用；c 配置海藻酸钠溶液：取0.7g海藻酸钠置于50ml小烧杯中，加入10ml水，用酒精灯小火或间断加热，并充分搅拌，反复几次，直至海藻酸钠溶化，并定容至10ml（保证海藻酸钠溶液浓度：过高，很难形成凝胶珠；过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。）d 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合：将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀。e 固定化酵母细胞：以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配置好的CaCl2溶液中，形成凝胶珠。3、用固定化酵母细胞发酵a 将凝胶珠用蒸馏水冲洗23次；b 置于25度下发酵24h4、检测观察凝胶珠的颜色和形状：颜色过浅，呈白色，浓度低；不能成形，浓度过高
