1、模块清通关卷模块四生物技术与工程（满分：100分时间：75分钟）一、单项选择题（本题共15个小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求）1.我国的酿酒历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。齐民要术记载：将蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲发，如鱼眼汤，净淘米八斗，炊作饭，舒令极冷”。意思是将酒曲浸到活化，冒出鱼眼大小的气泡，把八斗米淘净，蒸熟，摊开冷透。下列说法错误的是（）A“浸曲发”过程中酒曲中的微生物代谢加快B“鱼眼汤”现象是生物代谢产生的二氧化碳从溶液中溢出导致的C“净淘米”是为消除杂菌对酿酒过程的影响而采取的主要措施D“舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微
2、生物死亡2.2021山东淄博市高三模拟硝化细菌是化能自养菌，通过NHNONO的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，在水产养殖中具有重要作用。下表是分离硝化细菌的培养基配方，下列说法错误的是（）（NH4）2SO40.5 gNaCl0.3 gFeSO40.03 gMgSO40.03 gK2HPO40.75 gNaH2PO40.25 gNa2CO31 g琼脂5%定容1 000 mLA.（NH4）2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源B.培养基中的Na2CO3是硝化细菌的主要碳源C.K2HPO4和NaH2PO4能维持培养基的pHD.硝化细菌能清除水体中的铵态氮及亚硝态氮3.2022东北高三模拟屠宰场废弃血
3、污不经过处理直接排放，会对环境造成污染。传统的处理方法有填埋法和焚烧法等。填埋法易造成地表环境、地下水资源污染。焚烧法处理也会造成大气污染，且废弃物中所含的蛋白资源不能得到有效利用。研究人员以屠宰场血污堆积土壤为分离基质，利用血平板培养基（添加了动物血液），分离出了高效降解血红蛋白的菌株，并初步用于降解废弃血液、生产氨基酸液态肥料。下列叙述正确的是（）A上述菌株分离纯化过程中用到了稀释涂布平板法和平板划线法B对分离纯化得到的菌株培养后进行计数，只能采用稀释涂布平板法C血平板培养基上透明水解圈小的菌落分泌的蛋白酶的活性往往较高D实验中废弃培养基因含有降解血污的微生物，可以直接填埋4.2022湖北
4、十堰市模拟进行垃圾分类收集可以减少垃圾处理时间，降低处理成本。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于对湿垃圾（包括剩菜剩饭、骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物）的处理。下列有关叙述正确的是（）A在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和操作者的双手进行灭菌B培养过程需要向培养基通入无菌空气并进行搅拌，目的是使菌体充分接触营养物质和溶解氧，促进细菌繁殖C科研小组若从生活垃圾中分离分解尿素的微生物，可在培养基中加入酚红指示剂，如果有尿素分解菌存在，则培养基中该菌落的周围会出现黑色D卫生纸类垃圾可采用焚烧的方式处理，有效减少对环境的污染5. 实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事
5、先准备好的琼脂培养基上划3条等长的平行线（3条线均与图中的链霉素带接触），将培养皿置于37 条件下恒温培养3天，实验结果如图所示。以下关于链霉素的叙述，错误的是（）A它能阻止结核菌的生长B它对结核菌比对霍乱菌更有效C它对结核菌比对伤寒菌更有效D它可用于治疗伤寒病人6.野生型大肠杆菌可以在基本培养基上生长，发生基因突变产生的氨基酸依赖型菌株需要在基本培养基上补充相应氨基酸才能生长。将甲硫氨酸依赖型菌株M和苏氨酸依赖型菌株N单独接种在基本培养基上时，均不会产生菌落。某同学实验过程中发现，将M、N菌株混合培养一段时间，充分稀释后再涂布到基本培养基上，培养后出现许多由单个细菌形成的菌落，将这些菌落分别
6、接种到基本培养基上，培养后均有菌落出现。该同学对这些菌落出现原因的分析，不合理的是（）A操作过程中出现杂菌污染BM、N菌株互为对方提供所缺失的氨基酸C混合培养过程中，菌株获得了对方的遗传物质D混合培养过程中，菌株中已突变的基因再次发生突变7.化学需氧量（COD）是衡量污水中有机污染物含量的重要指标。从某污水处理系统中分离出多种细菌，经分离筛选获得具有高效降低COD能力的菌株，过程如图所示。下列相关说法正确的是（）A可用显微镜直接计数法统计菌液中的细菌数目来确定接种时菌液的最佳稀释倍数B制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需在倒平板后进行灭菌操作C由菌落分布情况可知，在该固体培养基上接种的方法是平板划
7、线法D挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是纯化菌株8.穿心莲内酯为穿心莲中抗菌消炎作用的活性成分，临床上用于治疗急性菌痢、胃肠炎等。为探究不同浓度穿心莲内酯对甲、乙、丙三种痢疾杆菌的杀菌能力，某研究小组将等量的甲、乙、丙三种痢疾杆菌分别用无菌水稀释成菌悬液，在平板固体培养基上制成含菌培养皿，在培养皿上放置经不同浓度穿心莲内酯浸泡过的滤纸片，培养一段时间后，测定三种细菌的抑菌圈直径取平均值，结果如下表。下列说法错误的是（）浓度组别1%5%10%15%20%甲菌种抑菌圈直径2.5 mm3 mm3.5 mm4 mm5 mm乙菌种抑菌圈直径1.6 mm 1.7 mm1.9 mm2.1 mm2.5
8、 mm丙菌种抑菌圈直径2.2 mm2.7 mm3.1 mm3.5 mm4 mmA.培养皿可采用干热灭菌法进行灭菌，制备含菌培养皿时应使用稀释涂布平板法B不同浓度的穿心莲内酯对三种痢疾杆菌都起杀伤作用，杀菌效果乙丙甲C若长期用药，三种痢疾杆菌种群的耐药基因频率可能会增大D本实验还需设计在含菌培养皿上放置未用穿心莲内酯浸泡过的滤纸片作为对照9.下列实验程序不正确的是（）A泡菜B果醋果酒CD试管苗10.植物体细胞杂交需要分离出有活力的原生质体，研究者通过实验研究了酶解时间对原生质体产量和活力的影响，结果如下。相关叙述错误的是（）注：原生质体活力（有活力的原生质体数/原生质体总数）100%A利用纤维素
9、酶和果胶酶去壁后可分离得到原生质体B随酶解时间延长两种原生质体产量均先增加后减少C适宜两植物细胞的最佳酶解时间分别为10 h和12 hD原生质体活力可通过质壁分离与复原实验进行验证11.紫杉醇是一种高效抗癌的药物。国内某团队研究光照条件对红豆杉愈伤组织生长和紫杉醇含量的影响，实验结果如表： 光照条件 接种干重gL1收获干重gL1紫杉醇含量%（干重） 光照 4.33 9.13 0.007 0 黑暗 4.38 12.10 0.016 4下列叙述正确的是（）A愈伤组织生长的原理是植物细胞具有全能性B.愈伤组织培养过程要在无菌条件下进行C光照能促进愈伤组织的生长并提高紫杉醇含量D培养基中的有机物仅能为
10、愈伤组织提供能量12.利用乳腺生物反应器生产药用蛋白是动物基因工程的重要应用，目前科学家已在牛和山羊等动物乳腺生物反应器中获得了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和抗胰蛋白酶等医药产品。下列有关乳腺生物反应器的叙述错误的是（）A受体细胞可选用受精卵或早期胚胎的桑葚胚细胞B获得转基因动物需利用胚胎移植技术C鉴别药用蛋白基因是否导入受体细胞一般利用DNA分子杂交法D转基因动物产生的生殖细胞可能含有药用蛋白基因13.2022山东烟台市模拟单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。有一对夫妇被检测出均为镰状细胞贫血基因的携带者，为了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为其产前核酸分子杂交
11、诊断和结果示意图，有关叙述不正确的是（）A根据凝胶电泳带谱分析，这对夫妇4次妊娠的胎儿中需要停止妊娠的是1和4B将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以达到治疗的目的C检测突变基因的RNA分子探针的核糖核苷酸序列为UGCACAAD正常人群中镰状细胞贫血基因携带者占1/10 000，2若与一正常女性再婚，生出患病儿子的概率为1/80 00014.目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等。采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（） 推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列蓝色荧光蛋白基因的合成表达出蓝色荧光蛋
12、白A BC D15.基因工程产物可能存在着一些安全性问题。下列说法不正确的是（）A三倍体转基因鲤鱼与正常鲤鱼杂交，进而导致自然种群被淘汰B载体的标记基因（如抗生素基因）可能指导合成有利于抗性进化的产物C目的基因（如杀虫基因）本身编码的产物可能会对人体产生毒性D目的基因通过花粉的散布转移到其他植物体内，从而可能打破生态平衡二、不定项选择题（共5题，每题3分，共15分。每题有一个或多个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分）16.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（）A用移液管吸取菌液进行梯度稀释时，可用手指轻压移液管
13、上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀B对4号试管中的稀释液进行平板培养得到的菌落平均数必然为5号试管的10倍C5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7109D该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低17.生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法正确的是（）A倒成平板后直接培养可判断有无污染B倒成平板后需要进行灭菌处理C图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙D生长图形法
14、还可用于某些菌种的筛选18.SOD是一种广泛分布于各种细胞中的抗氧化酶，它能催化超氧阴离子自由基形成H2O2，增强植物的抗逆性。下图为培育能够产生SOD农作物新品种的一种方式，有关叙述错误的是（）新细胞胚状体新品种A过程中最常用的方法是采用显微注射技术将SOD基因导入植物细胞B.、分别表示脱分化、再分化过程，无需严格的无菌操作C该育种方式利用了细胞工程和基因工程，能体现细胞的全能性D利用植物组织培养生产SOD时，需要将外植体培养到胚状体19.“中中”和“华华”是两只在我国出生的克隆猕猴，它们也是国际上首例利用体细胞克隆技术获得的非人灵长类动物。下图表示培育“中中”和“华华”的流程。下列相关叙述
15、正确的是（）A图示过程中利用的技术有核移植和干细胞移植技术等B这两只克隆猕猴不是由同一受精卵发育而成的C融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件D利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度要小些20.基因工程是一种DNA操作技术，其表达载体的构建和检测筛选是两个重要步骤。下图1为某种质粒简图，箭头所指分别为限制酶EcoR、BamH的酶切位点。已知目的基因X的两端分别有包括EcoR、BamH在内的多种酶的酶切位点。图2表示运用影印培养法（指在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落的一种微生物培养方法）检测表达载体是否导入大肠杆菌。下列有关叙述错误的是（）A同时使用EcoR和
16、BamH 切割质粒，可避免酶切后质粒的自身环化B.转化方法是将质粒表达载体溶于缓冲液后与经 Ca2处理的大肠杆菌混合C培养基 A 和培养基 B分别含有四环素和青霉素D从筛选结果分析，含目的基因X的菌落是1、2、3、5三、非选择题（本题共5小题，共55分）21.（12分）葡萄酒是葡萄汁经酵母菌发酵而成的。酿制葡萄酒的两个简易装置如图所示。回答下列问题：（1）试管中的X溶液有助于维持甲装置的瓶中气压相对稳定，与乙装置相比，用甲装置酿制葡萄酒的优点是_（答出两点即可）。（2）葡萄汁装入甲装置时，要留有约1/3的空间，这种做法的目的是_（答出两点即可）。（3）某同学若用乙装置进行发酵，并设置两个不同处
17、理组（乙A和乙B），乙A装置中保留一定量的氧气，乙B装置中没有氧气。在其他条件相同且适宜的情况下，测得一段时间内乙A和乙B中酒精含量的变化趋势及乙A中氧气含量的变化趋势如曲线图所示。图中曲线、依次表示、含量的变化趋势。（4）从异化作用的类型看，酵母菌属于生物；从同化作用的类型看，酵母菌属于（填“自养型”或“异养型”）生物。22.（10分）2021天津市高三三模绿水青山就是金山银山，污水治理是生态文明建设的一项重要任务，利用微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合
18、物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：成分MgSO4蛋白质X物质水琼脂用量5 g10 g7 g1 000 mL20 g（1）表中是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，表中X物质最可能为。（2）若图中污水取样是从聚乙烯醇（PVA）污染的水体中采集，通过图示过程分离出分解聚乙烯醇（PVA）的菌落，则进行过程1的作用是。（3）若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100 mL原菌液中有PVA分解菌个，该接种方法是，通过该方法测量的菌落
19、数值与实际值相比一般会（填“偏大”“偏小”或“相等”）。（4）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入用于鉴别PVA分解菌，若菌落周围，则该菌为PVA分解菌。23.（11分）W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路，制备一种膀胱生物反应器来获得W，基本过程如图所示。回答下列问题：（1）步骤中需要使用的工具酶有。步骤和所代表的操作分别是和。步骤称为_。（2）与乳腺生物反应器相比，用膀胱生物反应器生产W的优势在于不受转基因动物的（答出2点即可）的限制。（3）一般来说，在同一动物个体中，乳腺上皮细胞与膀胱
20、上皮细胞的细胞核中染色体DNA所含的遗传信息（填“相同”或“不同”），原因是。（4）从上述流程可知，制备生物反应器涉及胚胎工程，胚胎工程中所用到的主要技术有（答出2点即可）。24.（10分）2021江苏省高三质检草莓是我国的优质水果，营养价值很高，被誉为“水果皇后”，但却容易受到病毒的感染。科学家常采用两种方法培育新品种：其一，培育无病毒组培苗；其二，将草莓轻型黄边病毒的外壳蛋白基因（SMYELVCP）导入草莓基因组中培育出转基因抗病毒草莓。请分析回答下列问题：（1）若培育无病毒组培苗，通常采用植株进行组织培养，转化后的草莓外植体需经过过程才能长成完整植株。从遗传学角度看，它能形成完整草莓植株
21、的根本原因是_。（2）可利用PCR技术扩增目的基因SMYELVCP，其前提是，以便根据这一序列合成引物。为保证目的基因的表达，重组载体上应含有特定的（填“复制原点”“启动子”或“标记基因”），它能被受体细胞的所识别，以便于催化转录过程。（3）获得转基因草莓后，通过分子检测，此后还需要在个体生物学水平上鉴定 SMYELVCP是否发挥作用，方法是_。25.（12分）2022湖北黄冈市模拟丙肝病毒（HCV）是一种 RNA 病毒，人们将得到的 HCV 的多个抗原基因首尾相连，连接在同一调控元件下，可构成融合基因。对 HCV 感染的诊断步骤是：首先进行抗 HCV 抗体检测，若检测结果呈阳性则还需要进行
22、HCV 核酸检测。HCV 融合抗原可用于制作第三代 HCV 抗体检测试剂。请回答下列问题： （1）首先需要获得融合基因。即通过相关的 RNA 合成 cDNA 然后拼接起来，这个过程主要需要酶和 DNA 连接酶等。其次要利用 PCR技术扩增融合基因。即先根据融合基因的核苷酸序列，设计并合成引物，若该融合基因的序列为（虚线处省略了部分核苷酸序列），则 PCR 设计应选用的两种引物（部分）序列应分别为：5AACTAT3，。引物能与变性的融合基因单链结合，在催化作用下延伸，如此循环多次。 （2）构建融合基因表达载体。如图所示，表达载体上除了标注的 DNA 片段外，在融合基因上游还必须拥有的 DNA 片
23、段（箭头所示）是，其作用是_。 （3）用融合基因表达载体转化大肠杆菌感受态细胞。用含硫酸卡那霉素的培养基筛选出能生长的菌落，从而得到能产生HCV融合抗原的工程菌，原非感受态受体大肠杆菌细胞内应（填“含有”或“不含有”）硫酸卡那霉素抗性基因。 （4）某人体内 HCV 抗体检测结果呈阳性，但进行 HCV 核酸检测时结果呈阴性，最可能的原因是_。模块清通关卷模块四生物技术与工程1C“浸曲发”是将酵母菌活化，可以使微生物代谢加快，A正确；“鱼眼汤”是指酵母菌在呼吸过程中产生CO2，CO2从溶液中溢出导致的，B正确；在酿酒过程中，“净淘米”是为了去除杂质，“炊作饭”是为了消除杂菌的影响，C错误；“舒令极
24、冷”是将米饭摊开冷透，防止温度过高导致微生物(酵母菌)死亡，D正确。2B据题分析，硝化细菌通过NH4NO2NO3的氧化过程获取能量，故通过分析培养基成分可知(NH4)2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源，A正确；硝化细菌为自养型生物，能利用二氧化碳合成糖类，故硝化细菌的主要碳源是二氧化碳，B错误；分析培养基成分，其中K2HPO4和NaH2PO4可维持培养基的pH，C正确；据题，硝化细菌能将NH4氧化成NO2，进而将NO2氧化成NO3，故可用硝化细菌清除水体中的铵态氮及亚硝态氮，D正确。3A由图中两个培养基中菌落的分布可知，上述菌株分离纯化过程中用到了稀释涂布平板法和平板划线法，A正确；对分离纯化
25、得到的菌株培养后进行计数，可以采用稀释涂布平板法，也可以采用显微镜计数法，B错误；血平板培养基上透明水解圈大的菌落分泌的蛋白酶的活性往往较高，C错误；实验中废弃培养基因含有降解血污的微生物，需要进行灭菌处理后再填埋，避免污染环境，D错误。4B在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌，常用高压蒸汽灭菌法；操作者的双手需要进行清洗和消毒，避免操作者受到伤害，A错误；进行培养的微生物大多为需氧型，在培养过程向培养基通入无菌空气并搅拌，可以增加溶氧量并使菌体充分接触营养物质，以促进细菌生长繁殖，B正确；鉴别尿素分解菌时，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素分解菌代谢会产生氨，使p
26、H升高，菌落周围会出现红色，C错误；卫生纸类垃圾不可回收且富含纤维素，可采用卫生填埋的方法，利用环境中的纤维素分解菌将其降解，可有效减少对环境的污染，D错误。5D由题意可知，若链霉素能杀死某种细菌，则靠近链霉素带的位置该细菌无法生长，因此链霉素能阻止结核菌和霍乱菌的生长，且对结核菌的抑制作用更明显，A、B、C正确；链霉素不能阻止伤寒菌的生长，因此不能用来治疗伤寒病人，D错误。6B操作过程当中出现杂菌污染，基本培养基上生长的为杂菌，A合理；若M、N菌株互为对方提供所缺失的氨基酸形成的菌落，需要MN混合在一起才能生存，而该菌落来自于单个细菌形成的菌落，单个细菌不可能是混合培养的细菌，B不合理；M、
27、N菌株混合培养后在基本培养基上可以生存，推测可能是混合培养过程当中，菌株间发生了基因交流，获得了对方的遗传物质，C合理；基因突变是不定向的，在混合培养过程中，菌株当中已突变的基因也可能再次发生突变得到可在基本培养基上生存的野生型大肠杆菌，D合理。7A菌液稀释后可用显微镜直接计数法统计菌液中的细菌数目来确定接种时菌液的最佳稀释倍数，A正确；制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需在灭菌操作后进行倒平板，B错误；由菌落分布情况可知，在该固体培养基上接种的方法是稀释涂布平板法，C错误；挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是增大菌株的数量(扩大培养)，D错误。8B培养皿等玻璃仪器可采用干热灭菌法进行灭菌，
28、常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法常用来分离和计数，故制备含菌培养皿时应使用稀释涂布平板法，A正确；该实验中没有对照组进行比较，无法确定不同浓度的穿心莲内酯对三种痢疾杆菌都起杀伤作用，且相同浓度下，三种细菌的抑菌圈直径大小关系为：甲丙乙，因此抑菌效果为甲丙乙，B错误；若长期用药，具有耐药性的痢疾杆菌更多的存活下来，不具有耐药性的会死亡，这样三种痢疾杆菌种群的耐药基因频率可能会增大，C正确；设计实验时应遵循对照原则，在此实验中需要设计在含菌培养皿上放置未用穿心莲内酯浸泡过的滤纸片作为其他实验组的对照，D正确。9B果酒果醋的制作过程是先进行果酒发酵，再进行果醋发酵，果酒发酵
29、属于酵母菌的无氧呼吸，果醋发酵属于醋酸菌的有氧呼吸，B错误。10D细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，则利用纤维素酶和果胶酶去壁后可分离得到原生质体，A正确；据图分析，随酶解时间延长两种原生质体产量均先增加后减少，B正确；据图分析，清水紫花苜蓿和里奥百脉根的最佳酶解时间分别为10 h和12 h，C正确；原生质体已经去除细胞壁，不能发生质壁分离和复原，D错误。11B愈伤组织生长的原理是细胞增殖，A错误；愈伤组织培养过程要在无菌条件下进行，B正确；光照抑制愈伤组织的形成，C错误；培养基中的有机物能为愈伤组织提供能量和营养，D错误。12A培育转基因动物，受体细胞一般选用受精卵，A错误；目的基因导入受精卵
30、后发育为早期胚胎，要用胚胎移植技术移植入子宫发育为转基因动物，B正确；检测目的基因是否成功插入受体细胞染色体DNA，一般用DNA分子杂交法，C正确；转基因动物体细胞含有目的基因，故形成的配子可能含目的基因，D正确。13A根据电泳条带分析，假设患病基因用b表示，则夫妇基因型均为Bb，四个胎儿基因型分别依次是BB、bb、Bb、BB，应该终止妊娠的是2号胎儿，A错误；镰状细胞贫血是由基因突变导致的，属于遗传病，将正常血红蛋白的基因导入患者的骨髓造血干细胞中可达到治疗目的，B正确；据图可知，突变基因的核苷酸序列ACGTGTT，按照碱基互补配对的原则，则作为探针的核糖核苷酸序列为UGCACAA，C正确；
31、男性基因型为Bb，若与正常女子Bb(正常人群中镰状细胞贫血基因携带者占1/10 000)再婚，则生出患病儿子的概率为1/10 0001/41/21/80 000，D正确。14B蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因获得所需要的蛋白质。因此，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列蓝色荧光蛋白基因的合成表达出蓝色荧光蛋白。B正确。15A三倍体转基因鲤鱼由于联会紊乱，无法产生配子，因此高度不育，不会产生后代，因此
32、也不能通过竞争淘汰自然种群，A错误；载体的标记基因多为抗生素抗性基因，转入受体细胞后可能会通过指导合成有利于抗性进化的产物来表达，使受体细胞具有抗生素抗性，B正确；目的基因编码的产物可能具有毒性，从而对人体造成伤害，C正确；转基因植物的目的基因，有可能通过花粉传播进入其他植物体内，从而造成“超级杂草”等基因污染现象，打破原有的生态平衡，D正确。16ACD用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀，防止对后续的稀释过程造成影响，A正确；4号中稀释液进行平板培养，稀释倍数比5号的低10倍，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是5号的10倍，B错误；分析图解可知，菌液一共稀释106倍，
33、每克土壤中的菌株数为(168175167)30.11061.7109个，C正确；稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，D正确。17AD平板上不含任何生长因子，若倒成平板后直接培养，出现菌落说明已被杂菌感染，因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长，A正确；制备平板时，先灭菌再倒平板，B错误；图中菌落生活在乙丙区域之间，说明同时需要乙和丙，C错误；不同菌种所需生长因子不同，可利用生长图形法筛选菌种，D正确。18ABD过程中最常用的方法是采用农杆菌转化法将SOD基因导入植物细胞，A错误；、分别表示脱分化、再分化过程，均
34、需要在严格的无菌条件下完成，B错误；该育种方式利用了细胞工程和基因工程，从植物细胞培育成植物个体，能体现细胞的全能性，C正确；利用植物组织培养生产SOD时，只需要将外植体培养到愈伤组织即可，D错误。19CD图示过程利用的技术有核移植技术、胚胎分割技术和胚胎移植技术等，没有利用干细胞移植技术，A错误；这两只克隆猕猴是由同一个受精卵发育而来的，B错误；融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件，C正确；胚胎干细胞的全能性比体细胞的全能性高，所以利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度要小些，D正确。20CD为避免酶切后质粒的自身环化，可同时使用EcoR和BamH切割质粒，A正确；转化方
35、法是将质粒表达载体溶于缓冲液后与经Ca2处理的大肠杆菌混合，B正确；用EcoR和BamH两种限制酶对质粒进行切割时，会破坏四环素抗性基因，但不会破坏青霉素抗性基因，因此导入重组质粒的大肠杆菌能在含有青霉素的培养基上生存，但不能在含有四环素培养基上生存，所以培养基A和培养基B分别含有青霉素、四环素，含目的基因X的菌落是4和6，C错误、D错误。21答案：(1)不需要开盖放气；避免了因开盖引起的杂菌污染(2)为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气；防止发酵旺盛时汁液溢出(3)乙A中的氧气乙B中的酒精乙A中的酒精(4)兼性厌氧型异养解析：(1)试管中的X溶液有助于维持甲装置的瓶中气压相对稳定，与乙装置相比，用
36、甲装置酿制葡萄酒的优点是不需要开盖放气；避免了因开盖引起的杂菌污染。(2)葡萄汁装入甲装置时，要留有约1/3的空间，这种做法的目的是为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气；防止发酵旺盛时汁液溢出。(3)分析题意可知，图中曲线、依次表示乙A中的氧气、乙B中的酒精、乙A中的酒精含量的变化趋势。(4)从异化作用的类型看，酵母菌属于兼性厌氧型生物；从同化作用的类型看，酵母菌属于异养型生物。22答案：(1)聚乙烯醇(或PVA)(2)通过选择培养增加PVA分解菌的数量(3)1.6109稀释涂布平板法偏小(4)碘出现白色透明斑解析：(1)表格是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，即该培养基属于选择培养基，该培
37、养基的配制过程中应该以PVA为唯一碳源，因此表中X物质最可能为聚乙烯醇(或PVA)。(2)若图中污水取样是从聚乙烯醇(PVA)污染的水体中采集，通过图示过程分离出分解聚乙烯醇(PVA)的菌落，则进行的过程1为选择培养，其作用是通过增加PVA分解菌的数量。(3)要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用血细胞(血球)计数板直接计数。若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落(说明制备的平板合格，且实验操作可靠)，则100 mL原菌液中有PVA分解菌1600.1104100
38、1.6109个；这种接种方法为稀释涂布平板法，由于在涂布过程中会出现两个或多个细菌聚集在一起只能产生一个菌落的情况，则会导致该方法的测量值与实际值相比一般会偏小的情况。(4)根据题意可知，“PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑”，因此要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中还需要加入碘与PVA作用形成蓝绿色复合物，用于鉴别PVA分解菌，随着PVA被降解，白色透明斑出现，因此，若菌落周围出现白色透明斑，则该菌为PVA分解菌。23答案：(1)限制性内切核酸酶、DNA连接酶显微注射体外培养胚胎移植(2)性别、年龄(3)相同两种上
39、皮细胞都是体细胞，且来源于同一个受精卵(4)体外受精、胚胎移植解析：(1)在基因表达载体的构建过程中需要使用限制性内切核酸酶切割W基因和载体，同时需要DNA连接酶进行连接。将重组表达载体导入受精卵常用显微注射法，从受精卵到早期胚胎需要进行体外培养，将获得的早期胚胎通过胚胎移植移至代孕母体体内。(2)乳腺生物反应器和膀胱生物反应器都属于动物反应器。前者受动物性别(只能是雌性)和年龄(哺乳期)限制，后者不受动物性别和年龄限制。(3)题述两种上皮细胞都是体细胞，且来源于同一个受精卵，所以其细胞核中染色体DNA所含遗传信息相同。(4)胚胎工程中所用到的技术主要有体外受精、胚胎移植。24答案：(1)茎尖
40、或根尖脱分化、再分化根尖或茎尖细胞含有发育成完整个体的全部遗传信息(2)要有一段已知目的基因的核苷酸序列启动子RNA聚合酶(3)将培育的转基因植株用草莓轻型黄边病毒感染，并与未进行转基因的植株进行对比解析：(1)植物的茎尖或根尖含病毒少，甚至没有，故培育无毒苗通常采用植株的茎尖或根尖进行组织培养；转化后的草莓外植体需要经过脱分化、再分化后才能长成完整植株；根尖或茎尖能够形成完整草莓植株的原因是其细胞中含有发育成完整个体的全部遗传信息，具有全能性。(2)利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列；为保证目的基因的表达，重组载体上应含有特定的启动子；能够被受体细胞的RNA聚
41、合酶所识别，以便于催化转录过程。(3)获得转基因草莓后，可通过将培育的转基因植株用草莓轻型黄边病毒感染，并与未进行转基因的植株进行对比，以达到在个体生物水平上鉴定SMYELVCP是否发挥作用的目的。25答案：(1)逆转录3CGGAGA5Taq 酶(2)启动子RNA 聚合酶的识别和结合的位点，驱动融合基因转录出mRNA(3)不含有(4)其感染HCV后通过免疫反应已将HCV清除，但体内存在抗HCV抗体解析：(1) 以RNA为模板合成cDNA的过程需要逆转录酶，拼接需要DNA 连接酶；PCR过程中DNA合成的方向只能从5到3，根据融合基因的序列，两种引物分别为5AACTAT3和3CGGAGA5，PCR过程中需要的酶为Taq 酶。(2)基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。其中箭头所示为启动子，其作用是RNA 聚合酶的识别和结合的位点，驱动融合基因转录出 mRNA。(3)感受态细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，非感受态受体大肠杆菌不能吸收周围环境中DNA分子，因此细胞内不含有融合基因表达载体，即不含有硫酸卡那霉素抗性基因。(4)某人体内HCV抗体检测结果呈阳性，但进行HCV核酸检测时结果呈阴性，原因是其感染HCV后通过免疫反应已将HCV清除，但体内存在抗HCV的抗体。
