1、第1讲基因工程1(2015山东德州联考)下列有关基因工程的叙述，正确的是()ADNA连接酶将碱基对之间的氢键连接起来B目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变C限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大D常用的载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等解析：选C。理解基因工程操作的原理步骤和应用是解题关键。DNA连接酶连接的是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，不是氢键；目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因重组，不是基因突变；大肠杆菌不能作为基因工程的载体。2(2015浙江温州八校联考)下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述，正确的是()ADNA连接酶可把目的基因与载体的黏性
2、末端的碱基黏合，形成重组DNAB限制性核酸内切酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子CTaq酶是用PCR仪对DNA分子扩增过程中常用的一种耐高温的DNA连接酶D纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体，便于植物杂交育种解析：选B。理解基因工程操作的步骤和植物细胞工程原理是解题关键。DNA连接酶连接的是磷酸二酯键；DNA分子是双链，因此切割DNA分子产生两个片段时需要两分子的水；Taq酶是热稳定DNA聚合酶，是连接单个脱氧核苷酸的，不是DNA连接酶；植物杂交育种是借助有性生殖实现，纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体应用于细胞工程。3(2015山西长治期末)治疗白化病、苯丙酮尿症
3、等人类遗传病的根本途径是()A口服化学药物B注射化学药物C采取基因治疗法代替致病基因发挥功能D利用辐射或药物诱发使致病基因突变解析：选C。理解受基因控制的遗传病治疗的根本方法是基因工程治疗，是解题的切入点。遗传病是受基因控制的，要想根治，只有通过基因工程技术，将正常的基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这就是基因治疗。虽然用辐射或药物诱发致病基因突变，可以改变原有的异常基因，但在一般情况下，突变大多是有害的，很可能引起另一种疾病，A、B项所提到的方法不能根治。4(2015安徽蚌埠期末)基因工程产物可能存在着一些安全性问题，但不必担心。下列说法不正确的是()A三
4、倍体转基因鲤鱼与正常鲤鱼杂交，进而导致自然种群被淘汰B载体的标记基因(如抗生素基因)可能指导合成有利于抗性进化的产物C目的基因(如杀虫基因)本身编码的产物可能会对人体产生毒性D目的基因通过花粉的散布转移到其他植物体内，从而可能打破生态平衡解析：选A。理解染色体变异与基因工程的联系是解题的关键。三倍体转基因鲤鱼不能与正常鲤鱼杂交，即使能杂交，后代也是不育的，不会导致自然种群被淘汰。5(2014高考新课标全国卷)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题：(1)理论上，基因组文库含有生物的_基因；
5、而cDNA文库中含有生物的_基因。(2)若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中_出所需的耐旱基因。(3)将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物_的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的_，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的_是否得到提高。(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时，则可推测该耐旱基因整合到了_(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。解析：(1)基因组文库含有某种生物的全部基因，cDNA文库含有某种生物的部分
6、基因。(2)可从基因组文库中筛选所需基因，如耐旱基因。(3)受体细胞应为植物乙的体细胞。确认某基因是否正确表达，应检测其表达产物。检测植株的耐旱性是从个体水平进行鉴定。(4)如果耐旱基因整合到同源染色体的一条上，会在减数分裂中产生两种比例相同的配子，在后代中出现31的性状分离比。如果耐旱基因整合到同源染色体的两条上，则后代应全为耐旱植株。答案：(1)全部部分(2)筛选(3)乙表达产物耐旱性(4)同源染色体的一条上6(2015福建普高毕业班质检)为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情
7、况。其基本流程如下图：(Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达)请回答：(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，_(需要/不需要)启动子。(2)步骤中，用Ca2处理大肠杆菌，使之成为_细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有_基因。(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和Xgal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断_(蓝色/白色)菌落中的大杨杆菌为重组菌。(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与_形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。解析：
8、(1)重组载体中SHH基因表达需要启动子。(2)大肠杆菌细胞用Ca2处理后就成为感受态细胞；能在添加氨苄青霉素的培养基上生存的细菌含有氨苄青霉素抗性基因，没有氨苄青霉素抗性基因的细菌将会死亡。(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和Xgal的培养基上会形成蓝色菌落，重组菌中LacZ基因被SHH基因插入后不表达，重组菌在含有IPTG和Xgal的培养基上会形成白色菌落。(4)判断SHH基因的转录情况，也就是判断SHH基因是否转录出mRNA。答案：(1)需要(2)感受态Amp(或氨苄青霉素抗性或抗性)(3)白色(4)SHH转录的mRNA(只写mRNA不给分)7(2014高考天津卷)嗜热土壤
9、芽孢杆菌产生的葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：利用大肠杆菌表达BglB酶(1)PCR扩增bglB基因时，选用_基因组DNA作模板。(2)下图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入_和_不同限制酶的识别序列。注：图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同(3)大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为_。解析：本题考查了基因工程及影响酶活性的因素。(1)bglB基因存在于嗜热土壤芽孢杆菌中，所以为扩
10、增bglB基因，应选用嗜热土壤芽孢杆菌基因组DNA做模板。(2)用限制酶切割时，不能破坏质粒中的复制原点、启动子、终止子及标记基因(如抗生素抗性基因)，而且要将目的基因插入启动子和终止子之间，Nde 、Xba 、BamH 符合条件，而Xba 的酶切位点在质粒中有两处，这样会影响目的基因插入的准确性，所以应选择Nde 和BamH 。目的基因的黏性末端应与质粒相同，所以扩增的bglB基因两端需分别引入Nde 和BamH 不同限制酶bglB基因的识别序列。(3)导入目的基因后的大肠杆菌具有分泌BglB酶的能力，即可以降解纤维素。答案：(1)嗜热土壤芽孢杆菌(2)Nde BamH (3)转基因的大肠杆
11、菌分泌出有活性的BglB酶8(2015河北唐山一中期中)如图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：(1)图中cDNA文库_基因组文库(填“大于”“等于”或者“小于”)。(2)过程提取的DNA需要_的切割，B过程是_。(3)为在短时间内大量获得目的基因，可用_扩增的方法。目的基因获取之后，需要进行_，其组成必须有_以及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。(4)将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是_，其能否在此植物体内稳定遗传可以用_技术进行检测。解析：(1)cDNA文库小于基因组文库。(2)提取目的基因需要限制酶，逆转录法获得目的基因需要逆转录酶。(3)短时间内大量获得目的基因，可用PCR技术扩增的方法。基因表达载体的组成必须有目的基因、标记基因、启动子和终止子，基因表达载体的构建是基因工程的核心。(4)将目的基因导入某双子叶植物细胞常采用的方法是农杆菌转化法，目的基因只有整合到植物细胞的染色体上才能在植物体内稳定遗传，可通过DNA分子杂交的方法对目的基因是否整合到染色体上进行检测。答案：(1)小于(2)限制酶反转录(或逆转录)(3)PCR技术基因表达载体的构建启动子、终止子、目的基因(4)农杆菌转化法DNA分子杂交
