1、选修B选修1 生物技术实践选修1 生物技术实践选修1 生物技术实践栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关第37讲 微生物的利用栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关高频考点深度剖析 培养基 考点突破 1概念:培养基是由人工配制成的含有适于细菌生长繁殖需要的各种营养物质的基质。2类型栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关划分标准 种类 特点 用途 按物理性质分 固体培养基 在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等 常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面 半固体培养基 在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态 可用于
2、观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面 液体培养基 培养基中不加任何凝固剂 常用于发酵工业 栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关划分标准 种类 特点 用途 按用途分 选择培养基 根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基 培养分离特定的微生物 鉴别培养基 加入某种试剂或化学药品,使培养后会发生某种变化的培养基 区别不同类型的微生物 栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关3.培养基的成分:包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关特别提醒微生物按
3、照同化作用方式可分为自养型和异养型。自养型微生物的碳源是无机碳源,如二氧化碳;异养型微生物的碳源是有机碳源,如葡萄糖。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关1灭菌原因:为了获得纯净的培养物,关键是防止外来杂菌的污染。2无菌操作的条件(1)各种器皿必须是无菌的;(2)各种培养基必须是无菌的;(3)细菌转移操作的过程必须是无菌的。无菌技术的知识归纳 栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关3三种常用灭菌方法的比较灭菌方法 适用材料或用具 灭菌条件 灭菌时间 灼烧灭菌 接种环、接种针或其他金属用具 酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 直至烧红 干热灭菌 玻璃器皿
4、(吸管、培养皿)和金属用具等 干热灭菌箱内,160 170 1 h2 h 高压蒸汽灭菌 培养基等 100 kPa,121 15 min30 min 栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关4.避免被杂菌污染的方法(1)注意灭菌操作原则,灭菌彻底,降低环境污染几率,手和实验服要清洁,减少操作时间,对污染源的改善考虑周到。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关(2)注意微生物生长条件,如pH、渗透压、温度等。细菌喜中性偏碱的环境,喜蛋白质丰富的营养物质,喜37 的温度;而霉菌喜中性偏酸的环境,喜糖类丰富的营养物质,喜25 30 的温度。因此,可以根据不
5、同微生物的“喜好”来减少污染。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关1大肠杆菌(1)特性:革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。(2)用途:是基因工程技术中被广泛采用的工具。大肠杆菌的培养与分离 栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关2培养:实验中用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌。3分离(实验部分)栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关培养基灭菌 倒平板 接种 划线分离 培养观察 50 mL LB液体培养基和50 mL LB固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌 将固体培养基倒入4个灭菌后的培养皿中,水平放置,使之形成平面 在装有液体培
6、养基的三角瓶中接种大肠杆菌,培养12 h 用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次,在固体培养基的平板上连续划线,盖好培养皿 培养皿倒置(盖在下面),放在37 恒温培养箱中培养1224 h后,可看到划线的末端出现不连续的单个菌落 栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关4.菌液划线分离的方法5保存菌种用接种环取出单个菌落,用划线法接种在斜面培养基上,37 培养24 h后,4 冰箱保存。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关特别提醒(1)在倒平板过程中,不能将培养基溅在皿壁与皿盖上,防止杂菌污染。(2)本实验需设置空白培养基在相同条件下一起培养,
7、以确定是否有杂菌污染。(3)培养皿倒置的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基中,造成污染。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关培养基的种类及灭菌技术(2011高考新课标全国卷)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:考题链接 例1栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于_培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即_和_。栏目导引 选修1 生物技术实践
8、高频考点深度剖析知能演练强化闯关(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力_。(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关【解析】(1)从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株,使用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基,通过控制碳源这种营养成分,来促进能高效降解原油的菌株的生长,抑制其他微生物的生长。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关(2)菌种纯化培
9、养时,常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。(3)当固体培养基上长出单菌落后,可通过比较菌落周围分解圈的大小,来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说,分解圈越大说明该菌珠的降解能力越强,反之则越弱。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关(4)实验室培养微生物的过程中,常用灼烧灭菌法对接种环、接种针、试管口、瓶口等进行灭菌;用高压蒸汽灭菌法对培养基、试管等进行灭菌;用干热灭菌法对玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等进行灭菌。实验操作应在酒精灯火焰旁进行,因为酒精灯火焰旁可形成一个无菌环境,可防止微生物的污染。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关【
10、答案】(1)原油 选择(2)平板划线法 稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关微生物的实验培养(2010高考重庆卷)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。例2栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关(2)细菌鉴定:实验流程如图所示栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关对配制的液体培养基等需采取_方法灭菌
11、;实验所用液体培养基的碳源为_(填“无机碳”或“有机碳”)。挑选可疑菌落制片后,用_观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关接种可疑菌后,35 培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是_。对照组试管中应加入_,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体,与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有_。【解析】(2)微生物的培养基配
12、制后常用高压蒸汽法灭菌;由于炭疽杆菌是异养型微生物,培养基中应加有机碳作碳源。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关炭疽杆菌呈竹节状排列,需借助显微镜观察。接种培养后,液体培养基由澄清变浑浊,应是炭疽杆菌大量繁殖的结果;实验组与对照组的设置应遵循单一变量原则和等量原则,实验组加入生理盐水配制的澄清噬菌体液,对照组应加入等量的生理盐水;栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关若疑似患者被炭疽杆菌感染,则培养6小时后,实验组中的炭疽杆菌由于噬菌体侵染而大量裂解死亡,浑浊度会明显低于对照组。接种疫苗后,机体通过体液免疫产生抗体,与此相关的细胞有吞噬细胞、T细胞和效应B细胞。栏目导引 选修1 生物技术实践高频考点深度剖析知能演练强化闯关【答案】(2)高压蒸汽(98 kPa蒸汽)有机碳 显微镜 细菌大量繁殖 等量生理盐水 低 吞噬细胞、效应B细胞