1、传统发酵技术与微生物培养技术1下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊红美蓝青霉素琼脂蒸馏水含量10g10g2g0.4g0.065g1万单位适量1000mLA能在此培养基上生长的大肠杆菌，抗青霉素的基因一定在拟核上B此培养基只起鉴别作用C此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准D此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中【答案】D【解析】能在此培养基上生长的大肠杆菌，抗青霉素的抗性基因一般位于大肠杆菌的质粒上，A错误；依用途划分，加入青霉素说明该培养基为选择培养基，而加入伊红美蓝能够鉴别大肠杆菌，B错误；此培养基只能用来检测自来水中大
2、肠杆菌含量是否符合饮用水标准，C错误；大肠杆菌常作为基因工程的工程菌，此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中，D正确。2组氨酸缺陷型沙门氏菌是由野生菌种突变形成的，自身不能合成组氨酸。将其接种在缺乏组氨酸的平板培养基上进行培养，有极少量菌落形成。2-氨基芴是一种致突变剂，将沾有2-氨基芴的滤纸片放到上述平板培养基中，再接种组氨酸缺陷型沙门氏菌进行培养，会有较多菌落出现。以下叙述不正确的是A在接种前，2-氨基芴和滤纸片须进行灭菌处理B基因突变的可逆性与是否存在致突变剂无关C若用划线法接种可以根据菌落数计算活菌数量D此方法可以用于检测环境中的化学致突变剂【答案】C【解析】在微
3、生物培养过程中，培养基、实验材料、实验用具都要进行灭菌处理，A正确；由题意可知，2-氨基芴可使沙门氏菌中野生型增多，说明该化学诱变剂处理缺陷型细菌可使其变为野生型，但由题意不能说明野生型突变为了缺陷型，且根据致突变剂可提高基因突变的频率，但不能决定突变的方向，可判断基因突变的可逆性与是否存在致突变剂无关，B正确；计算活菌的数目常用稀释涂布法，而不是用平板划线法，C错误；根据菌落的变化情况，可推测环境中的化学致突变剂，D正确。3根据以下实验操作或结果示意图，有关分析正确的是A图1中的玻璃棒在搅拌过程中需沿一个方向轻缓进行B图2中将干燥的滤纸条剪去两角，并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线C图
4、3倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置D欲获得雌性个体，胚胎移植前常选用图4中内细胞团作性别鉴定【答案】B【解析】图1中的玻璃棒在搅拌过程中需沿一个方向快速搅拌，目的是加速细胞的破裂，这有利于DNA的充分释放，A错误；为使色素滤液在滤纸条上涂得细、直，以及同种色素扩散的整齐，图2中需将干燥的滤纸条剪去两角，并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线，B正确；图3倒平板操作时，倒完平板后立即盖上培养皿，待冷却后将平板倒过来放置，C错误；欲获得雌性个体，胚胎移植前常选用图4中滋养层作性别鉴定，D错误。4“通州老窖”是以优质高粱、麸曲、产脂酵母为原材料酿制出的一种白酒。以下相关叙述正确的是（）A水
5、质、菌种和发酵时间会影响酒的品质B所用的菌种属于生态系统中的消费者C可用划线法测定发酵液中的菌种浓度D酿制过程必须进行严格的灭菌操作【答案】A【解析】影响酒的品质的因素很多，如水质、菌种和发酵时间等，A正确；酿酒所用的菌种属于生态系统中的分解者，B错误；可用稀释涂布平板法测定发酵液中的菌种浓度，C错误；酿制过程不能进行灭菌，防止把酵母菌杀死而影响酒的产量，D错误。5以下高中生物学实验中，表述正确的是A实验1、2、3、4中的颜色都是经过染色出现的B实验1不需要对照，图示结果表明细胞正在失水C实验2中刚果红培养基可用于筛选尿素分解菌D可从同种植物的不同部位取材进行实验1和3【答案】D【解析】实验1
6、是利用紫色洋葱鳞片叶的外表皮进行的质壁分离与复原实验，其颜色是液泡中含有的紫色的花青素所致；实验2是分解纤维素的微生物的分离实验，菌落周围出现透明圈的原因是：刚果红可与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维素水解后产生的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应，当纤维素被纤维素酶水解后，刚果红-纤维素复合物就无法形成，在刚果红培养基平板上就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈；实验3为观察根尖分生组织细胞有丝分裂的实验，需要用碱性染料对染色体进行染色；实验4是绿叶中色素的提取和分离实验，滤纸条上呈现的颜色是分离后的光合色素本身的颜色。综上分析，实验1、4中的颜色不是经过染色出现的，A错误；实验1中用显微镜的先后
7、三次观察形成了自身对照，图示的细胞处于质壁分离状态，可能正处于质壁分离的过程中，也可能已经达到渗透平衡，或是正处于质壁分离复原的过程中，若正处于质壁分离的过程中，则外界溶液的浓度大于细胞液的浓度，细胞正在失水，若正处于质壁分离复原的过程中，则外界溶液的浓度小于细胞液的浓度，细胞正在吸水，若已经达到渗透平衡，则外界溶液的浓度等于细胞液的浓度，B错误；实验2中刚果红培养基可用于筛选纤维素分解菌，C错误；只要是成熟的植物细胞均能发生质壁分离与复原，只要是有分裂能力的植物的体细胞都能进行有丝分裂，因此可从同种植物的不同部位取材进行实验1和3，如前者可取自成熟的叶肉细胞，后者可取自根尖细胞，D正确。6餐
8、厨废水含有丰富的糖类、蛋白质等有机物，研究者将三种细菌单独或混合接种于餐厨废水培养液中，通过测定菌悬液细胞密度（结果如下表）研究三者的关系，以期为利用餐厨废水制备复合菌肥的研究提供依据。下列说法错误的是A上述细菌作为分解者将餐厨废水中的有机物分解B对照组的培养液为没有经过灭菌处理的餐厨废水C可用稀释涂布平板法，计算不同条件下的活菌数D由结果可知，解磷巨大芽孢杆菌的竞争能力较强【答案】B【解析】上述细菌能够将餐厨废水中的有机物分解，属于分解者，A正确；表中信息显示：对照组三种细菌的细胞密度均为零，说明对照组的培养液为经过灭菌处理的餐厨废水，B错误；纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布
9、平板法，二者都能使细菌纯化，但平板划线法不易分离出单个菌落，不能计数，涂布平板法能使单菌落分离，便于计数，所以可用稀释涂布平板法，计算不同条件下的活菌数，C正确；表中信息显示：无论是将三种细菌单独接种于餐厨废水培养液中，还是混合接种于餐厨废水培养液中，解磷巨大芽孢杆菌的细胞密度均最大，说明解磷巨大芽孢杆菌的竞争能力较强，D正确。7脉孢霉的许多不同的营养缺陷型能在加有精氨酸的基本培养基上生长，其中一些还可以在加有其他物质的基本培养基上生长，实验结果如下表所示 (“”表示生长、“”表示不生长) ：进一步实验证明，在基本培养基中加入精氨琥珀酸后，Arg-10能生长而Arg-1不能生长。根据上述实验结
10、果，能够推理出的结论是A精氨酸的合成途径是谷氨半醛鸟氨酸瓜氨酸精氨酸B在Arg-3突变株培养基中，可能有瓜氨酸积累CArg-1能够合成精氨琥珀酸，而Arg-10不能D精氨琥珀酸可以取代基本培养基中的瓜氨酸【答案】A【解析】依题意并分析表中信息可知：Arg-3与Arg-12突变株在添加瓜氨酸的基础上才能在加有精氨酸的基本培养基上生长，说明二者体内缺乏合成瓜氨酸的途径，但存在“瓜氨酸精氨酸”的合成途径，同理可推知：Arg-5与Arg-6突变株体内缺乏合成鸟氨酸的途径，但存在“鸟氨酸瓜氨酸精氨酸”的合成途径，Arg-8与Arg-9突变株体内缺乏合成谷氨半醛的途径，但存在“谷氨半醛鸟氨酸瓜氨酸精氨酸”
11、的合成途径，可见，精氨酸的合成途径是谷氨半醛鸟氨酸瓜氨酸精氨酸，A正确；Arg-3突变株体内缺乏合成瓜氨酸的途径，在加有精氨酸的基本培养基中再添加谷氨半醛、鸟氨酸时均不能生长，因此会停留在鸟氨酸这一步，其培养基中不会有瓜氨酸积累，B错误；在含有精氨酸的基本培养基中加入精氨琥珀酸后，Arg-10能生长而Arg-1不能生长，说明Arg-10有利用精氨琥珀酸的途径而Arg-1没有，但不能说明Arg-1能够合成精氨琥珀酸，C错误；由于加入精氨琥珀酸后，Arg-10与Arg-1出现了生长的差异性，说明精氨琥珀酸是这一系统代谢途径的一环，但精氨琥珀酸并不能取代瓜氨酸，D错误。8酵母菌是常用的生物实验材料，
12、相关叙述正确的是()A探究培养液中酵母菌种群数量随时间的变化，应设空白对照B检测酵母菌培养过程中是否产生CO2可判断其呼吸方式C在果酒制作时，酵母菌来源于自然环境或人工培养D牛肉膏蛋白胨培养基适宜用于酵母细胞的分离纯化【答案】C【解析】探究培养液中酵母菌种群数量随时间的变化，不需要设空白对照，本身实验前后可以形成对照，A错误；检测酵母菌培养过程中是否产生CO2不可判断其呼吸方式，因为有氧呼吸和无氧呼吸都会产生二氧化碳，B错误；在果酒制作时，酵母菌来源于自然环境或人工培养，C正确；牛肉膏蛋白胨培养基适宜用于细菌的分离纯化，酵母菌是真菌，应用马铃薯培养基培养或者麦芽汁琼脂培养基，D错误；故选C。9
13、大熊猫主食竹子，但自身不能产生分解纤维素的酶，主要依靠肠道菌群消化纤维素。下列说法不正确的是A用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选产纤维素酶的菌株B从加入刚果红的鉴别培养基中可筛选出纤维素酶活性高的菌株C大熊猫肠道内多种纤维素分解菌之间是寄生关系D大熊猫与其肠道内微生物间相互选择，共同进化【答案】C【解析】用以纤维素为唯一碳源的培养基上只有可以分解纤维素的菌株才能生存，可以筛选产纤维素酶的菌株，A正确；加入刚果红的鉴别培养基中，分解纤维素的能力越强，透明圈越大，故可筛选出纤维素酶活性高的菌株，B正确；大熊猫肠道内多种纤维素分解菌之间是竞争关系，C错误；大熊猫与其肠道内微生物间相互选择，共同进化，D
14、正确。故选C。10下列关于高中生物实验叙述中,正确的是A斐林试剂直接滴加在苹果的切面上即可完成还原性糖的鉴定实验B利用溴麝香草酚蓝溶液的颜色变化可确定酵母菌的呼吸方式C低温诱导染色体加倍的实验通常用卡诺氏液解离洋葱根尖细胞D利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数往往低于活菌数【答案】D【解析】还原糖鉴定的实验中，需要将苹果制成组织样液，再加入斐林试剂经过水浴加热，会出现砖红色反应，A错误；二氧化碳遇溴麝香草酚蓝溶液会由蓝变绿再变黄，利用溴麝香草酚蓝溶液只能鉴定有无二氧化碳产生，酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸均可产生二氧化碳，不能根据是否产生二氧化碳来确定呼吸方式，B错误；低温诱导染色体数目
15、加倍的实验中，卡诺氏液的作用是固定细胞，C错误；利用稀释涂布平板法计数时，由于两个或多个细胞连在一起会被统计成一个菌落，故统计结果会比实际偏低，D正确。11研究小组利用微生物实验操作技术来探究某池塘中大肠杆菌数量，下列叙述正确的是()ABCD【答案】C【解析】进行涂布平板操作时，取少量菌液（不超过0.1ml）滴加到培养基表面，再用灭菌后的涂布器推匀，A错误；涂布完成后，在培养皿底做好标记，并将培养皿倒置，B错误；计数时一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，选项中各菌落数符合要求，求平均值即可，C正确；设置空白对照组的目的是判断有无杂菌污染，题目中空白对照组有5个菌落，说明在培养过程中有杂
16、菌污染，应重新开展实验，D错误。12下列有关使用高压蒸汽灭菌锅的操作，错误的是()A加水时，水面应与三角搁架平齐B加盖时，将排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内C加热时，待冷空气完全排尽后关上排气阀D切断电源后，打开排气阀使压力表降到零后开盖【答案】D【解析】在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，加水时的水面应与三角搁架平齐，A正确；加盖时，应该将排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内，B正确；加热时，应该等冷空气完全排尽后再关上排气阀，C正确；切断电源后，应该等压力表降到零后再打开排气阀并开盖，D错误。13下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是A分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样
17、经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液B测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同C测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法D接种土壤微生物稀释液时，平板划线法可以采取连续划线的方法使微生物均匀分布【答案】B【解析】分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，其中的微生物全部死亡，不能得到尿素分解菌，A错误；土壤中各类微生物的数量不同，为了获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，可见，测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围也不同，B正确；测定土壤样品中的活菌数目，常用菌落计数法，一般不常用显微镜直接计
18、数法，C错误；接种土壤微生物稀释液时，可借助平板划线法，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，但并不是使微生物均匀分布，D错误。14无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中正确的是A紫外线照射前，适量喷洒石碳酸等消毒液，可以加强消毒效果B高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖C为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D在微生物接种的实验中，用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒【答案】A【解析】用紫外线照射30min，可以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒石碳酸等消毒液，可以加强消毒效果，A正确；
19、高压灭菌加热结束时，待压力表指针回到零后，才能开启锅盖，不能打开放气阀使压力表指针回到零，B错误；为了防止污染，接种环经火焰灭菌、冷却后才可以快速挑取菌落，C错误；在微生物接种的实验中，一般用75%酒精对实验者的双手进行消毒，用紫外线照射30min对超净工作台进行灭菌，D错误。15下列关于刚果红染色法的说法中，正确的是A先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，不需用氯化钠溶液洗去浮色B倒平板时就加入刚果红，可在培养皿中先加入lmlCR溶液后加入100ml培养基C培养基中出现透明圈的原因是因为纤维素被分解为葡萄糖导致的D倒平板时就加入刚果红，长期培养刚果红有可能被其他微生物分解形成透明圈【答案】
20、D【解析】常用的刚果红染色法有两种：一是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，此种方法需用氯化钠溶液洗去浮色，二是在倒平板时就加入刚果红，此种方法则不需要用氯化钠溶液洗去浮色，A错误；倒平板时就加入刚果红，可在培养皿中先加入10mg/mLCR溶液，灭菌后，按照每200mL培养基加入1ml的比例加入CR溶液，B 错误；在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，C 错误；倒平板时就加入刚果红，由于有些微生物能降解色素，长期培养刚果红有可能被其他微生物分解而形
21、成透明圈，D正确。 16总状毛霉和米根霉是常见的霉菌。研究人员将总状毛霉和米根霉的孢子悬液分别接种到两组豆腐切块上，完成前期发酵后，分别测定两组霉菌产生的蛋白酶的活力，结果如下图。据图分析，下列有关叙述正确的是A总状毛霉与米根霉都能利用蛋白酶将分解产生的肽和氨基酸分泌到细胞外B总状毛霉与米根霉接种量与蛋白酶活力呈正相关C相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉使豆腐块中的蛋白质减少更多D接种量为5CFU/mL时发酵制作的腐乳品质最好【答案】C【解析】总状毛霉与米根霉都能将蛋白酶分泌到细胞外，进而将豆腐块中的蛋白质分解产生肽和氨基酸，A错误；据图分析，随着接种量的增加，总状毛霉与米根霉产生的蛋白
22、酶的活性都是先增加后减弱，并不是一直呈现正相关，B错误；相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉的蛋白酶活性更高，因此使豆腐块中的蛋白质减少更多，C正确；图示只能证明接种量为5CFU/mL时，蛋白酶的活性最好，但是不能说明发酵制作的腐乳品质最好，D错误。17高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选出了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示。下列说法错误的是（ ）A过程的目的是稀释B过程所使用的接种方法是稀释涂布平板法CI号、号培养基都属于固体培养基，先灭菌后调节pHD从号培养基挑出透明圈大的菌落，接种到号培养基上【答案】C【解析】图中过程是稀释嗜热菌培养液的过程，
23、A正确；接种嗜热菌即过程所使用的接种方法是稀释涂布平板法，B正确；分析图示信息可知，号、号培养基都属于固体培养基，培养基配制和灭菌过程中，应注意先调节pH后灭菌，C错误；部分嗜热菌在培养基上生长时可产生淀粉酶，分解培养基中的淀粉后会在菌落周围形成透明圈，透明圈越大，说明产生的淀粉酶越多，因此应挑选透明圈大的菌落接种在号培养基上继续培养，D正确。18下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列有关叙述正确的是（ ） A步骤操作时，倒好平板后应立即将其倒置，防止水蒸气落在培养基上造成污染B步骤接种环和试管口应先在火焰上灼烧，接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液C步骤沿多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培
24、养后可根据出现的单个菌落计数D步骤是将培养皿放在恒温培养箱中培养，一段时间后所得到的都是X细菌的菌落【答案】B【解析】倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，A错误；步骤接种环火焰上灼烧后，待冷却后才可以沾取菌液后平板划线，B正确；步骤多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落，但不能用于计数，C错误；步骤将培养皿放在恒温培养箱培养后可用来对X细菌进行分离得到纯种，D错误。19养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸，这两种物质可被硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离与计数”实验中()A需要配制添加一定浓度铵盐的牛肉膏蛋白胨培养基，以筛选硝化细菌B应对采集底泥使用的
25、工具进行灭菌，全部接种过程均需在火焰旁进行C可以采用平板划线法进行接种，还需与未接种的空白培养基同时培养D应将培养基置于30 恒温下培养12 h后，统计培养基中全部菌落数【答案】B【解析】要分离硝化细菌，应该用以铵盐为唯一氮源的培养基，培养基中不能加入牛肉膏蛋白胨，A错误；获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌污染，因此，应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在火焰旁进行，B正确；对微生物进行计数时应该采用的接种方法是稀释涂布平板法，C错误；应将培养基置于37恒温下培养12 h后，统计菌落数在30300之间的培养基进行计数，D错误。20下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示
26、意图，有关叙述错误的是A在配制步骤、的培养基时，应先调pH值后髙压蒸汽灭菌B步骤纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落C步骤采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D步骤挑取中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力【答案】C【解析】配制培养基时，应先调pH值后髙压蒸汽灭菌，A正确；步骤纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌通过涂布平板法分散，获得单细胞菌落，B正确；步骤筛选分解尿素的细菌，培养基中应以尿素为唯一氮源，C错误；步骤挑取中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力，D正确。21下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是AKH2P04、Na2HP04、Mg
27、S047H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水BKH2P04、Na2HPO4、MgS047H20、葡萄糖、琼脂、水CKH2P04、Na2HPO4、MgS047H20、尿素、琼脂、水CKH2P04、Na2HPO4、MgS047H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水【答案】A【解析】在以尿素为唯一氮源的培养基中，只有能合成脲酶的细菌才能分解尿素，才能在该培养基中生长，而且欲将分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方中应加有凝固剂琼脂，以配制成固体培养基。综上分析，A项正确，B、C、D三项均错误。22下列评价果酒和果醋制作是否成功的方法中不合理的是A通过观察相关微生物的数量变化进行鉴定B通过向果酒发酵液中加入酸性重铬
28、酸钾试剂进行鉴定C通过检测果醋发酵前后发酵液的pH值变化进行鉴定D通过检测果酒发酵前后发酵液的温度变化进行鉴定【答案】D【解析】果酒和果醋的制作，利用的菌种分别是酵母菌和醋酸菌，若发酵成功，则发酵液中酵母菌和醋酸菌的数量会发生变化，因此可通过观察相关微生物的数量变化进行鉴定，A正确；果酒发酵是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，而在酸性条件下重铬酸钾溶液与酒精反应呈现灰绿色，所以通过向果酒发酵液中加入酸性重铬酸钾试剂进行鉴定的方法是可行的，B正确；醋酸菌将糖分转化成的醋酸会使发酵液的pH下降，因此可通过检测果醋发酵前后发酵液的pH值变化进行鉴定，C正确；果酒制作时一般将温度控制在1825，所
29、以不能通过检测果酒发酵前后发酵液的温度变化进行鉴定，D错误。23下图甲为果酒和果醋制作装置，图乙表示制作过程中的物质变化，有关叙述正确的是A制作果酒时应关闭阀b，适时打开阀a几秒钟B制作果醋时需打开阀a通气，打开阀b排气C过程都只能发生在缺氧的条件下D过程所需的最适温度基本相同【答案】A【解析】图示装置中，阀a控制排气，阀b控制进气，制作果酒时应关闭阀b以创造缺氧环境，适时打开阀a几秒钟以排出产生CO2，A正确；制作果醋时，打开阀a是为了排气，打开阀b是为了通气，B错误；酵母菌属于兼性厌氧型生物，有氧时进行有氧呼吸，无氧时进行无氧呼吸产生酒精，过程只能发生在缺氧条件下，过程有氧和无氧都能发生，
30、C错误；过程是酵母菌的呼吸作用，所需的最适温度基本相同（1825），过程是醋酸菌酿醋过程，所需的最适温度在3035，D错误。24甲、乙、丙、丁四个兴趣小组分别按如下流程进行科学探究活动，据此分析正确的是甲:挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒乙:植物组织形成愈伤组织长出丛芽生根试管苗丙:让豆腐长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制获得腐乳丁:取材切片染色制片观察脂肪颗粒A甲组所用发酵瓶用体积分数为70%的酒精消毒或用洗洁精洗涤B乙组欲让试管苗生根，应适当提高细胞分裂素/生长素的比值C丙组在制作中时常向腐乳连表面喷水，以利于毛霉菌丝的生长D丁组染色后需要用无水乙醇洗去浮色以便于观察【答案】A【解析】发酵瓶要
31、清洗干净，用体积分数为70%的酒精消毒，或用洗洁精洗涤，A正确；乙组同学欲按此原理培育试管苗，要让愈伤组织分化出根，应适当降低培养基中细胞分裂素/生长素的比值，B错误；丙组在制作中时常向腐乳坯表面喷水，会导致豆腐含水量过高，不利于毛霉菌丝的生长，C错误；丁组染色后需要用50%的乙醇洗去浮色以便于观察，D错误。25将少量的酵母菌提取液加入到足量的葡萄汁中进行果酒制作，16 条件下密封保温-段时间之后，检测到反应体系含有少量的酒精。如对上述实验的某个因子进行改动，实验的 结果也会发生相应的变化。下列有关叙述错误的是（）A增加葡萄汁量，初期产生酒精的速率不变B增加酵母提取液量，初期产生酒精的速率上升
32、C间隔通入氧气，若消耗等量有机物，产生的酒精量减少D温度提高到23 ，初期酒精浓度不变【答案】D【解析】原实验中葡萄汁足量，增加葡萄汁量，初期产生酒精的速率不会改变，A正确；增加酵母提取液量，初期氧气消耗较多，酵母菌较早进入无氧呼吸过程，产生酒精的速率会上升，B正确；间隔通入氧气，会抑制无氧呼吸过程，产生的酒精量会减少，C正确；温度提高到23，酶活性增强，酵母菌代谢加快，初期酒精浓度会上升，D错误。26下列实验操作不能达到预期目的的是A制作泡菜时每隔12小时打开泡菜坛盖通气B利用聚乙二醇使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合C用碱性染料将染色体着色后观察植物细胞的有丝分裂D用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗
33、诱导形成多倍体【答案】A【解析】制作泡菜时利用的乳酸菌进行无氧呼吸，要保持泡菜坛内无氧状态，不能通气，A错误；在制备单克隆抗体时，聚乙二醇是常用的细胞促融剂，可以使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，B正确；染色体因容易被碱性染料染色而得名，因此可以用碱性染料将染色体着色后观察植物细胞的有丝分裂，C正确；用秋水仙素或低温处理萌发的种子或幼苗，可以抑制纺锤体的形成，使染色体数目加倍从而形成多倍体，D正确。27下列有关果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是（）A在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气B在果酒、果醋和腐乳制作全过程中，都需要严格灭菌C利用酵母菌酿酒时，密封时间越长，产生的酒精量就越多D果酒发酵
34、、果醋发酵过程中温度分别控制在30、20【答案】A【解析】参与果醋制作的醋酸菌是需氧菌，因此在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，从而有利于醋酸菌的代谢，A正确；家庭制作果酒、果醋和腐乳时不需要严格灭菌处理，B错误；利用酵母菌酿酒时，在一定范围内，发酵时间越长，产生的酒精量越多，但时间过长后，由于营养物质的消耗等原因，酒精产量减少，C错误；果酒发酵过程中温度控制在20，果醋发酵过程中温度控制在30，D错误。故选：A。28二锅头作为京酒的代表，已有八百多年的历史。以下关于酿造二锅头的叙述中，正确的是A酵母菌能发酵产生酒精含量为52%的产品B可用划线法测定发酵接种所用菌液的浓度C酿酒时的环境温度
35、不会影响酿酒进程D选用菌种的种类和比例会影响酒的品质【答案】D【解析】发酵时当酒精含量超过16% 时，酵母菌就会死亡，A错误；测定发酵接种所用菌液的浓度应用稀释涂布平板法，B错误；酵母菌酒精发酵的适宜温度是1825，环境温度会影响酿酒进程，C错误；发酵时选用菌种的种类和比例会影响酒的品质，D正确。29下列有关传统发酵技术的叙述，正确的是()A果酒、果醋和腐乳制作中，利用的都是微生物胞内酶B制作果醋的醋酸菌，属于严格厌氧的微生物C青霉、毛霉、曲霉等均参与了腐乳的发酵D制作果酒、果醋和腐乳所需时间基本相同【答案】C【解析】果酒、果醋是微生物的代谢产物, 需要的酶为胞内酶，腐乳制作是利用毛霉产生的蛋
36、白酶、脂肪酶分解蛋白质、脂肪，蛋白酶、脂肪酶是胞外酶，A错误。制作果醋需要醋酸菌，它是一种好氧的微生物，B错误。青霉、毛霉、曲霉等真核生物均参与了腐乳的发酵，C正确。制作果酒的时间一般为1012d，制作果醋的时间一般为78d，而制作腐乳的时间更短，D错误。30利用卷心菜发酵制作泡菜过程中，乳酸菌酵母菌细胞数量和pH的变化如图所示。下列叙述不正确的是A酵母菌和乳酸菌均有核膜包被的细胞核B发酵初期乳酸菌建立了明显的菌种优势C前6天pH下降主要由乳酸菌代谢引起D发酵中期酵母菌通过无氧呼吸进行增殖【答案】A【解析】乳酸菌是原核生物，细胞内没有核膜包围的细胞核，A错误；根据曲线图中乳酸菌和酵母菌的数量变
37、化曲线对比分析可知，发酵初期乳酸菌远多于酵母菌，所以乳酸菌成为了明显的优势菌种，B正确；结合曲线图分析，前6天，由于乳酸菌远多于酵母菌，其产生的乳酸会降低培养液的pH，所以C正确；由于整个发酵过程都是在无氧环境条件下进行的，在发酵中期（22-26天），酵母菌明显增多，酵母菌增多只能是通过无氧呼吸增殖，D正确。31下列有关微生物发酵技术的叙述，错误的是A传统的发酵过程受技术条件限制，通常不进行无菌操作B成品腐乳表面的皮膜是由毛霉等真菌的菌丝形成的，对人体无害C制备果酒、果醋和腐乳时，都是以建立种群优势作为发酵的基本条件D果醋的制备可以建立在果酒发酵的基础上，也可以直接利用葡萄汁发酵【答案】A【解
38、析】传统的发酵过程受技术条件限制，通常也要进行无菌操作，A错误；成品腐乳表面的皮膜是由毛霉等真菌的生长，产生的菌丝进入豆腐块的深层而形成，对人体无害，B正确；制备果酒、果醋和腐乳时，建立的优势种群依次是酵母菌、醋酸菌、毛霉，以此作为发酵的基本条件，C正确；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将果汁中的糖分分解成醋酸，当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌可以先将酒精变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，可见，果醋的制备可以建立在果酒发酵的基础上，也可以直接利用葡萄汁发酵，D正确。32下列与腐乳、果酒和果醋制作相关的叙述中，正确的是（ ）A夏季不宜进行腐乳制作B果酒发酵过程中发酵液密度保持稳定不变C果醋发酵包括无氧发酵和
39、有氧发酵D三种发酵的主要菌种均以RNA为主要的遗传物质【答案】A【解析】腐乳发酵所需的适宜温度是15-18，因夏季温度一般会高于15-18，因此不易在夏季进行腐乳制作，A正确；果酒发酵过程中发酵液浓度因糖分等有机物的不断分解，以及CO2的产生，浓度会逐渐下降，B错误；果醋发酵是严格的有氧发酵，C错误；三种发酵菌种均以DNA为遗传物质，D错误。33豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并定期取样观测发酵效果。以下推测不合理的是A该实验的自变量是菌种，温度属于无关变量B大
40、豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味C若容器内上层大豆发酵效果优于底层，则发酵菌为厌氧菌D煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质【答案】C【解析】根据题干信息分析，该实验的自变量是菌种的种类（甲乙两种菌种），而温度属于无关变量，A正确；大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味，B正确；若容器内上层大豆发酵效果优于底层，说明发酵菌为需氧型，C错误；煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质，D正确。34下列有关腐乳制作的叙述中,正确的是（ ）毛霉产生的蛋白酶只能将豆腐中的蛋白质分解为氨基酸用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形豆腐上生长的白毛是毛霉的
41、白色菌丝决定腐乳特殊口味的是卤汤加盐可以析出豆腐的水分,使豆腐块变硬卤汤中酒的含最应控制在30%左右,酒精含量过低，不足以抑制微生物ABCD【答案】B【解析】制作腐乳时，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，产生的脂肪酶能将脂肪分解成甘油和脂肪酸，错误；用含水量过高的豆腐制腐乳，不易成形；所以需要加盐析出豆腐中的水分，正确；豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝，严格地说是直立菌丝，豆腐中还有匍匐菌丝，正确；卤汤直接关系到腐乳的色、香、味，正确；卤汤中含酒量应该控制在12%左右，错误，故选B。35图示装置可用于生物技术实践的相关实验。下列有关叙述正确的是（） A制作果酒
42、、果醋或腐乳时，所需控制的温度都是相同的B两种装置都可以先用于果酒的制作，后用于果醋的制作C用装置甲制作腐乳时，自下而上随着豆腐块加高逐渐减少用盐量D装置乙中b为排气口，c为充气口，可防止空气中微生物的污染【答案】B【解析】制作果酒时温度应控制在18-25左右，制作果醋时温度为30-35，制作腐乳的温度大概是1518。A错误；两种装置都可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作，先密封后通入空气，B正确；利用装置甲制作腐乳时，应随着豆腐块层数的加高而增加盐量，瓶口铺得厚一些，防止杂菌污染，C错误；装置乙的排气口通过一个长而弯曲的胶管，排出果酒制备时产生的二氧化碳，而且能防止空气中微生物的污染， D正
43、确。36用酵母菌使葡萄汁产生葡萄酒，当酒精含量达到12%16%时，发酵就停止了。有关叙述不正确的是A酒精对酵母菌有毒害作用B产生酒精的同时也有CO2生成C产物积累使pH值发生改变D氧气过少导致其无法呼吸【答案】D【解析】酒精含量过高会对细胞有损害作用，故A错误。酵母菌在产生酒精的时候也同时会产生二氧化碳，故B正确。因为酵母菌无氧呼吸会产生二氧化碳溶于溶液中使PH变小，故C正确。氧气缺少酵母菌会进行无氧呼吸，故D错误。37下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是（ ）A果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同B制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒C变酸果酒的表
44、面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件【答案】A【解析】果酒的发酵菌种是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧型；果醋的发酵菌种是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，两者的代谢类型不同。故选A38在“探究果酒制作过程中影响酵母菌种群数量变化因素”时，获得下图所示的实验结果(图中O、M、N、P代表相应发酵时间)。下列相关分析正确的是 AM点前酵母菌不进行细胞呼吸B终止发酵时间应选择在P点时C酒精浓度的增加会抑制酵母菌繁殖DN点时酵母菌种群增长率最大【答案】C【解析】M点前酵母菌进行的是有氧呼吸，在有氧呼吸过程中大量繁殖，A错误；图中可以看出，N点时酒精浓度基本
45、不再上升，因此终止发酵时间应选择在N点时，B错误；种群数量的变化与酒精浓度、营养物质的减少等多种因素有关，而且酒精对细胞有毒害作用，C正确；N点时种群数量已达到最大值，增长率不再变化，酵母菌种群增长率在K/2值时最大，D错误。39泡菜发酵的微生物主要是乳酸菌，而在发酵初期，水槽内经常有气泡产生，这些气泡产生的原因及成分分别是（ ）A乳酸菌是兼性厌氧型微生物，初期进行有氧呼吸产生CO2；气体为CO2B因腌制过程中的盐进入蔬菜使蔬菜体积缩小，气体被排出；气体为空气C发酵初期活动强烈的是酵母菌，其利用氧产生的气体为CO2D乳酸菌在发酵过程中产生了热量使坛内温度升高，空气受热膨胀排出；气体为空气【答案
46、】C【解析】乳酸菌是厌氧型微生物，进行无氧呼吸产生乳酸，A错误；腌制过程中的盐进入蔬菜使蔬菜细胞失水而体积缩小，B错误；泡菜发酵初期有气泡产生，是需氧菌如酵母菌进行有氧呼吸产生了CO2，C正确；乳酸菌在发酵过程中产生了热量使坛内温度升高，但发酵初期有气泡产生，是酵母菌进行有氧呼吸产生了CO2，D错误二、非选择题1金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下面是某研究小组测定自来水中金黄色葡萄球菌浓度的实验操作。请回答下列问题：（1）金黄色葡萄球菌的培养基为7.5%NaCl牛肉膏蛋白胨培养基，此培养基能为金黄色葡萄球菌的生长提供_。
47、培养基中加入7.5%NaCl利于金黄色葡萄球菌的筛选，原因是_。（2）上述培养基的灭菌方法是_。在制作血平板时需等平板_后，方可加入血液，以防止_。（3）现将10ml菌液进行梯度稀释，依次稀释成101104的四个稀释样液，再取四个稀释样液各0.1ml分别接种到4组血平板上（每组3个，每个接种0lml），所用方法是_。在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现_。若在103组的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为35、36和37，则每升自来水中的活菌数约为_。【答案】碳源、氮源及水和无机盐 不影响金黄色葡萄球菌生长的同时抑制其它菌的生长 高压蒸气灭菌法 冷却 高温破坏血细胞 稀释涂布平板法
48、透明圈（溶血圈） 3.6108 【解析】（1）7.5%NaCl牛肉膏蛋白胨培养基能为金黄色葡萄球菌的生长提供碳源、氮源及水和无机盐；培养基中加入7.5%NaCl不影响金黄色葡萄球菌生长的同时抑制其它菌的生长，因此利于金黄色葡萄球菌的筛选。（2）微生物的培养常用高压蒸气灭菌法进行灭菌；在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止高温破坏血细胞。（3）微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，现将10ml菌液进行梯度稀释，依次稀释成101104的四个稀释样液，再取四个稀释样液各0.1ml分别接种到4组血平板上（每组3个，每个接种0lml），则所用方法是稀释涂布平板法。金黄色葡萄球菌在
49、血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色，因此在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现透明圈（溶血圈）。若在103组的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为35、36和37，则每升自来水中的活菌数约为（35+36+37）31030.11000=3.6108个。2泡菜是人们广泛喜爱的一种菜肴，但在制作过程中，会产生一定量的亚硝酸盐，亚硝酸盐与胺类结合成亚硝胺后具有致癌作用。请回答下列与泡菜制作有关的问题：（1）制作泡菜时，为了缩短制作时间，有人会加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是_。（2）泡菜风味的形成关键在于_的加入。泡菜制作方法不当，很容易造成泡菜变质
50、，甚至发霉变味，可能的原因有_。（写出两条）（3）膳食中的亚硝酸盐一般_（填“会”与“不会”）危害人体健康，其含量测定时，需将显色反应后的样品与已知浓度的_进行目测比较，估算出亚硝酸盐含量。（4）若从泡菜液中分离纯化乳酸菌，所用固体培养基因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而使培养基在分离纯化过程中会形成_。若要长期保存乳酸菌，菌液中常需要加入一定量的_，且要放置在_的冷冻箱中。【答案】陈泡菜液含乳酸菌，为泡菜发酵提供菌种 调味料（香辛料） 泡菜坛密封不严、工具不卫生、食盐用量过低、温度过高、腌制时间过短 不会 标准显色液 透明圈 甘油 -20 【解析】（1）制作泡
51、菜时，为了缩短制作时间，有人会加入少量陈泡菜液，是因为陈泡菜液中含乳酸菌，为泡菜发酵提供菌种。（2）泡菜风味的形成关键在于调味料（香辛料）的加入。泡菜制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至发霉变味，可能的原因有泡菜坛密封不严、工具不卫生、食盐用量过低、温度过高、腌制时间过短等等。（3）膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康，其含量测定时，需将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，估算出亚硝酸盐含量。（4）若从泡菜液中分离纯化乳酸菌，所用固体培养基因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而使培养基在分离纯化过程中会形成透明圈；若要长期保存乳酸菌，菌液中常需要加
52、入一定量的甘油，且要放置在-20的冷冻箱中，这种保存方法是甘油管藏法。3为了调查被酿酒厂污染的河流的水质状况，某研究小组进行了如下研究：（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。配制固体平板培养基的基本步骤是_。A计算、称量、倒平板、融化、灭菌B计算、称量、融化、倒平板、灭菌C计算、称量、融化、灭菌、倒平板D计算、称量、灭菌、融化、倒平板在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为_。（2）
53、该小组采用平板划线法分离水样中能分解淀粉的细菌，所用的选择培养基只能以淀粉作为唯一碳源，其原因是_。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是_。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是_（写出一点即可）。（3）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高_。（写出一点即可）。【答案】C 检测培养基平板灭菌是否合格 3.8107 只有能利用
54、淀粉的微生物能正常生长繁殖 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始划线 培养液中溶解氧的含量；使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率 【解析】（1）配制固体平板培养基的基本步骤是：计算、称量、融化、调pH、灭菌、倒平板。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样可以检测培养基平板灭菌是否合格。将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为（39+38+37）/31001/0.11000=3.8107。（2）该小
55、组采用平板划线法分离水样中能分解淀粉的细菌，所用的选择培养基只能以淀粉作为唯一碳源，原因是只有能利用淀粉的微生物能正常生长繁殖。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始划线。（3）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，原因是：振荡培养能提高
56、培养液中溶解氧的含量；使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。4回答与泡菜制作有关的问题 （1）为了获得用于泡菜腌制的优良乳酸菌，通常将泡菜汁稀释后涂布在MRS乳酸菌专用培养基上进行_分离，然后将其扩大培养，并进行特性鉴定。在进行特性鉴定时，必需进行耐酸实验、耐高温实验和_实验等，从而选出优势菌株。如图是四个菌株在白菜汁培养基中的生长曲线，比较适合泡菜腌制的菌株是_。（2）在泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类、亚硝酸盐等。腌制初期大量繁殖的微生物是_，醇类主要是由它进行_产生的，随后泡菜中PH开始下降，其它微生物生长受到抑制。（3）为测定腌制的泡菜中亚硝酸盐含量，取腌制的泡菜和少量泡菜汤
57、，在匀浆机中打成匀浆，过滤洗涤得到样品溶液，先除去蛋白质、脂质等，然后与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，再与_偶联，形成紫红色产物，然后用光程1cm的比色杯测定光密度值。如果制作标准曲线时的比色杯光程大于样液的比色杯光程，测得的样液中亚硝酸盐含量_（偏大、偏小、无影响）。【答案】单菌落 耐盐 D 假丝酵母菌 厌氧呼吸 N-1-萘基乙二胺 偏小 【解析】（1）为了获得用于泡菜腌制的优良乳酸菌，可将泡菜汁稀释后涂布在MRS乳酸菌专用培养基上进行单菌落分离，然后将其扩大培养，并进行特性鉴定。在进行特性鉴定时，必需进行耐酸实验、耐高温实验和耐盐实验等，从而选出优势菌株。由曲线图可知D前期数量较多，后期下降
58、较快，所以适合泡菜腌制。（2）在泡菜腌制初期大量繁殖的微生物是假丝酵母菌，醇类主要是由酵母菌进行厌氧呼吸产生的，随着泡菜坛中乳酸菌的繁殖，泡菜中PH开始下降，其它微生物生长受到抑制。 （3）为测定腌制的泡菜中亚硝酸盐含量，取腌制的泡菜和少量泡菜汤，在匀浆机中打成匀浆，过滤洗涤得到样品溶液，先除去蛋白质、脂质等，然后与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，再与N-1-萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物，然后用光程1cm的比色杯测定光密度值。如果制作标准曲线时的比色杯光程大于样液的比色杯光程，测得的样液中亚硝酸盐含量偏小。5苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的苹果原醋，再兑以苹果汁等原料而成的饮品。既有淡淡的醋味，又
59、有果汁的香甜，喝起来非常爽口。苹果醋能保健养生、改善疲劳、美容养颜，是目前大众非常喜爱的饮品。如图是苹果醋的制作简图，请据图回答：（1）过程中使用到的微生物是_若要检测是否产生了苹果酒可用_试剂进行检测。（2）过程和过程中起作用的微生物都是_，但该微生物在过程和中分解的碳源不同，过程和中的碳源分别是_和糖类。（3）生产果醋时，发酵所需微生物可从食醋中分离纯化获得，具体方法是：第一步：配制培养基。该培养基必须含有微生物生长所需要的基本营养成分。第二步：对培养基用_法进行灭菌。第三步：接种。微生物常用的接种方法有：平板划线法和_。第四步：培养。温度控制在_，培养时_（需要或不需要）提供氧气。第五步
60、：挑选符合要求的菌落。【答案】酵母菌 （酸性）重铬酸钾 醋酸菌 酒精 高压蒸汽灭菌 稀释涂布平板法 3035 需要 【解析】（1）参与果酒制作的微生物是酵母菌；酒精可用酸性重铬酸钾溶液检测，酒精遇重铬酸钾会由橙色变成灰绿色。（2）过程和过程中起作用的微生物都是醋酸菌，过程是醋酸菌利用乙醇为碳源，在氧气充足的条件下，将乙醇转变成醋酸；过程的碳源是糖类，醋酸菌在氧气充足的条件下将糖类转变成醋酸。（3）对培养基进行灭菌常采用高压蒸汽灭菌；接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法。醋酸菌是好氧菌，生长繁殖的适宜的温度范围是3035，培养时需要提供氧气。6生物技术与我们的生活息息相关。请回答下列生物技术
61、相关问题：（1）无菌技术目的是获得纯净的培养物，关键是_，微生物筛选原则是_。（2）在果醋制作过程中时，醋酸菌在_时，可将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸。（3）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品，多种微生物参与了该发醇过程，其中起主要作用的微生物是毛霉，其产生的_可将豆腐中的蛋白质和脂肪水解，发酵完成后需加盐腌制，接近瓶口表面的盐要铺厚一些，原因是_。（4）制作泡菜时蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐。在_条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。（5）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取的原因是_。【答案】防止外来杂菌的入侵 人
62、为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长 氧气、糖源充足 蛋白酶和脂肪酶 析出豆腐中的水分，抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质 盐酸酸化 重氮化 化学性质稳定、难溶于水、易溶于有机溶剂 【解析】（1）无菌技术目的是获得纯净的培养物，关键是防止外来杂菌的入侵，微生物筛选原则是人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。（2）在果醋制作过程中时，醋酸菌在氧气、糖源充足时，可将糖分解成酷酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸。（3）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品，多种微生物参与了该发醇过程，其中起主要作用的微生物是毛霉，其产生的蛋白酶和脂肪酶可将
63、豆腐中的蛋白质和脂肪水解，发酵完成后需加盐腌制，接近瓶口表面的盐要铺厚一些，加盐可以析出豆腐中的水分，抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。（4）制作泡菜时蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐。亚硝酸盐在盐酸酸化条件下与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰色染料。（5）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，原因是玫瑰精油化学性质稳定、难溶于水、易溶于有机溶剂。7酵母菌是对青霉素不敏感的异养型生物，种类繁多，有的能给人们生活带来很多益处，有的能使人患病。回答问题：(1)制作果酒过程中，发酵瓶先通气，后密封，目的是_。在工业发酵时。培养酵母菌的培养基中需要添加青霉素，目的是_
64、 (2)酵母菌生长需要适宜的pH，因此在培养基配制过程中需要添加_以维持pH相对稳定，原因是_。(3)采用平板划线法分离样液中的酵母菌时，接种环需通过_的方法灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做是为了_。若经一段时间培养，发现有的线上长满了菌落，有的线上无菌落，造成这种现象的原因可能是_(答出一条即可)。(4)念珠菌病主要是由白假丝酵母菌引起的，该菌会通过人体的感染部位进入血液。糖尿病患者的感染部位尤其需要保持干燥和清洁，避免滋生白假丝酵母菌，其依据是_。【答案】让酵母菌先进行有氧呼吸大量繁殖，然后进行酒精发酵 抑制细菌等杂菌的生长 pH缓冲剂 酵母菌培养过程中积累了
65、大量代谢产物，导致pH下降 灼烧 使聚集的菌体逐步减少，以便获得单个酵母菌形成的菌落 划线操作时接种环灼烧后未冷却；未从上一次划线末端开始划线 酵母菌适宜在潮湿且含糖较多的环境中生长 【解析】（1）制作果酒过程中，利用的菌种是酵母菌，属于兼性厌氧菌，在发酵过程中，发酵瓶先通气，让酵母菌进行有氧呼吸进行大量繁殖，然后密封，制造无氧的环境，让酵母菌进行无氧呼吸产生酒精。在工业发酵时，培养酵母菌的培养基中要添加丰富的（有机）碳源和（有机）氮源等物质和青霉素，其中青霉素的作用是抑制细菌和放线菌的生长，将酵母菌从微生物群体中分离出来。（2）因为酵母菌营养物质的分解利用和代谢产物的形成、积累会导致培养基中
66、pH下降，可能使酵母菌生长速度减慢和代谢产物的量减少，所以在培养基配制过程中要添加pH缓冲剂从而为酵母菌生长提供适宜的pH。（3）采用平板划线法分离样液中的酵母菌时，接种环需通过灼烧灭菌法进行灭菌；平板划线操作的目的是为了通过多次划线延伸，使菌种数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。因此在划线操作中从第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做使聚集的菌体逐步减少，以便获得单个酵母菌形成的菌落。划线操作过程中，每次灼烧接种环后必须冷却后再进行划线，如果划线操作时接种环灼烧后未冷却或未从上一次划线末端开始划线，会导致有的线上长满了菌落，有的线上无菌落的现象。（4）根据题意分析可知，酵母菌适
67、宜在温暖潮湿且含糖较多的环境中生长，血糖浓度太高有利于酵母菌的生长。8近年来，纪录片舌尖上的中国引发全民关注美食的热潮，其中讲述了利用不同微生物发酵来制作的美味食品。江苏镇江陈醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。(1)在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为_。(2)在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。先通气的目的是_，有利于密闭时获得更多的酒精产物。(3)在果醋制作时，醋酸菌在_和糖源都充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸，请写出该过程的化学反应式：_。(4)在醋酸发酵阶段，镇江陈醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工
68、艺如下。发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势必如右图所示。据图分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是_，由此推测，影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是_(至少写两种)。乳酸含量高是镇江陈醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中_层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化，加剧了不同种乳酸菌之间的_，淘汰了部分乳酸菌种类。【答案】)酶在最适温度条件下催化能力最强 让酵母菌进行有氧呼吸，有利于酵母的繁殖 氧气 C2H5OHO2CH3COOHH2O能量 先快速增长后趋于稳定 氧气、营养物质、pH 颠倒
69、前的B层和颠倒后的A(或不翻动，或下) 种间竞争(或竞争) 【解析】（1）由于酶的活性受温度影响，在最适温度条件下酶的催化能力最强，因此在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度。（2）酵母菌属于兼性厌氧型微生物，即在有氧呼吸的条件下能够大量繁殖，在无氧呼吸的条件下产生酒精，因此在酒精发酵阶段，发酵罐先通气，后密闭，通气的目的是提高酵母菌的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。（3）当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，反应式为：C2H5OHO2CH3COOHH2O能量。（4）醋酸菌属于需氧型细菌，只有在氧气充足的时候能够大量繁
70、殖并能产生醋酸，据曲线图分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌密度先快速增长后趋于稳定，变化的主要环境因素是氧气、营养物质、PH。乳酸发酵是乳酸菌进行的无氧呼吸，因此发酵过程中，发酵缸中颠倒前的B层和颠倒后的A（或不翻动、或下）层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸；成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化，加剧了不同种类乳酸菌的种间竞争（或竞争），淘汰了部分乳酸菌种类。9自从法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用以来，人们认识到微生物在发酵食品的加工中起着极其重要的作用，如今形形色色的发酵食品在食品业中占有重要的地位。回答下列与微生物发酵、培养相关的问题：(
71、1)果酒制作过程中严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件包括_（多选）A温度控制 B溶氧控制 CpH控制 D酶的控制(2)苹果酒在_（填微生物）的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋。乳酸菌与酿制果醋的菌种在代谢方式上的主要区别是_。(3)制作泡菜的过程中，有机物的干重将_；泡菜坛内有机物的种类将_。(4)有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是_。(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍不能正常生长，还需要在培养基中添加_。应用稀释涂布平板法分离乳酸菌时，涂布平板的
72、所有操作都应在火焰附近进行，但操作过程中一定要注意防火，不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，其原因是_。【答案】ABC 醋酸菌 乳酸菌是厌氧型细菌，醋酸菌是好氧型细菌 减少 增加 青霉素杀死了乳酸菌 维生素 避免（或防止）引燃烧杯中的酒精 【解析】 (1) 果酒的制作，选用的菌种为酵母菌。酵母菌发酵需要控制的条件有：温度，因20左右最适合酵母菌繁殖，所以一般将温度控制在1825；溶氧的控制，即要先通气后密封，其目的是让酵母菌早期进行有氧呼吸，快速繁殖，以增加酵母菌的数量，当氧气消耗完后进行无氧呼吸产生酒精；pH的控制，在缺氧、呈酸性的发酵液中酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数生物的生长发育则受
73、到抑制；利用酵母菌自身的酶进行发酵，不需要对酶进行控制。综上分析，A、B、C均正确，D错误。(2) 酿制果醋的菌种是醋酸菌。苹果酒在醋酸菌的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋。乳酸菌是厌氧型细菌，醋酸菌是好氧型细菌，这是二者在代谢方式上的主要区别。(3) 制作泡菜的实验原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。可见，制作泡菜的过程中，有机物的干重将减少，泡菜坛内有机物的种类将增加。(4) 由于青霉素能够杀死制作泡菜的菌种乳酸菌，所以向泡菜坛中加入青霉素会导致发酵失败。(5) 培养乳酸菌时，在为其提供充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，还需要在培养基中添加维生素，才能满足乳酸菌对营养的需求。在
74、应用稀释涂布平板法分离乳酸菌时，为了避免（或防止）引燃烧杯中的酒精，在涂布平板的操作过程中，不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中。10现代酸酯工艺主要采用醋酸菌进行液态深层发醇。如能筛选出耐乙醇耐高温的产醋酸菌株，会大大降低生产成本。请回答下列问题：（1）利用醋酸菌进行液态深层发酵时，随着发酵的进行，醋酸菌主要通过_（填“有氧呼吸”、“无氧呼吸）释放的热能逐渐积累，导致培养温度超过_，从而影响酶的_而导致醋酸菌生长、代谢缓慢，甚至死亡。（2）从工业醋醅中分离出5株耐乙醇、耐高温的产醋酸菌株，为了研究5株菌株的发酵效果需要进行菌株生产性能的测定实验。该实验主测定温度、乙醇浓度对菌种的生长量和_
75、的影响，以确定适合用于工业生产的菌种。这是一种传统的自然筛选菌种的方法，还可以用哪些方法加速菌种的选育进程？_（答出一种即可）。（3）在进行菌株生产性能的测定实验时，某同学用稀释涂布平板法测定菌种的生长量，将某种稀释度下的菌液涂布了三个平板，统计的菌落数分别是121、139、160，空白对照的一个平板上菌落数是10，该同学用130（即140-10）作为平均值。该同学的做法_（填“正确”、“不正确”）理由和建议是_。【答案】有氧呼吸 35（或最佳温度） 活性 产酸量 诱变育种 正确 所设置的重复组的结果大体相当且设置对照组 【解析】（1）醋酸菌是严格好氧菌，主要通过有氧呼吸释放的热能逐渐积累，导
76、致培养温度超过35，从而影响酶的活性而导致醋酸菌生长、代谢缓慢，甚至死亡。（2）已知为了研究5株菌株的发酵效果需要进行菌株生产性能的测定实验，该实验主测定温度、乙醇浓度对菌种的生长量和产酸量，以确定适合用于工业生产的菌种；诱变育种与自然突变相比能提高了突变频率，能在较短的时间内获得较多的优良变异类型，从而加快育种进程。 （3）稀释涂布平板法统计30-300个菌落计数，在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，故在本实验中，所设置的重复组的结果大体相当且设置对照组，故同学的做法正确。11甲、乙、丙三位同学根据微生物发酵的原理设计果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作过程
77、，并体验制作果酒、果醋、腐乳及泡菜的实践操作，回答下列问题：同学甲制作果酒、果醋:(1)同学甲冲洗柿子时并没有反复搓洗，而是简单地冲洗了几次，他的目的是_。果酒生产中若要重复使用酶，可通过_技术解决。在此基础上进行果醋发酵，需要提供的条件是_。(2)同学乙在加盐腌制时，其正确的操作是_。卤汤中加入酒和香辛料的作用是_。(3)同学丙在制作泡菜盐水时，盐与水的质量比是_；在发酵过程中测定亚硝酸盐含量时，在酸性条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成_色化合物。发酵结束后同学丙取食泡菜发现泡菜无酸味且有霉味，试分析造成该现象的原因可能是_。【答案】洗去浮尘，
78、防止附着在柿子皮上的野生酵母菌流失 固定化酶 充足的氧气，温度保持 在3035 逐层加盐，接近瓶口的地方要铺厚一些 防腐杀菌，使腐乳具有独特的香味 1:4 玫瑰红 泡菜坛子密封不严、盐和水的比例不适当、取样工具不卫生等引起杂菌滋生，泡菜变质 【解析】（1）同学甲冲洗柿子时并没有反复搓洗，而是简单地冲洗了几次，这样做既可以洗去浮尘，还可以防止附着在柿子皮上的野生酵母菌流失；固定化酶可以反复使用；醋酸菌是好氧菌，因此在果酒的基础上进行果醋发酵要通入足够的氧气，并将温度提高到在3035。（2）同学乙在制作腐乳的过程中加盐腌制时，要逐层加盐，且接近瓶口的地方要铺厚一些；卤汤中加入的酒和香辛料可以防腐杀
79、菌，并使腐乳具有独特的香味。（3）在制作泡菜盐水时，盐与水的质量比是1:4；测定泡菜中亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色复合物；泡菜无酸味且有霉味，可能是因为泡菜坛子密封不严、盐和水的比例不适当、取样工具不卫生等引起杂菌滋生，泡菜变质。12图为果酒与果醋发酵装置示意图，请据图回答：(1)酿造葡萄酒时，在葡萄榨汁前，葡萄要先进行_再除去枝梗，可以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。(2)用_对上述装置进行消毒后，再装入葡萄汁，将发酵装置放在18-23环境中，每天拧开气阀b多次，排出发酵过程产生大
80、量的_。装置中d处设计成弯曲形状的目的是_。(3)10天之后，利用酸性条件下的_对出料口c取样的物质进行检验，若出现_现象，说明产生了酒精。(4)产生酒精后，若在发酵液中加入醋酸菌，然后将装置放在_环境中，适时打开_向发酵液中充气。两次发酵过程中先不充气，一段时间后再充气的原因是_。(5)果汁生产使用_可以分解_及胞间层，可以提高果汁的出汁率且果汁变得更澄清。【答案】冲洗 70 左右的酒精 CO2 防止排气时空气中微生物的污染 重铬酸钾 灰绿色 3035OC 气阀a 醋酸菌是好氧细菌，酒精转变为醋酸需要氧气才能进行 果胶酶和纤维素酶 果胶与植物细胞壁 【解析】（1）酿造葡萄酒时，在葡萄榨汁前，
81、葡萄要先进行进行冲洗，然后再除去枝梗，可以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。（2）榨汁机要清洗干净，并晾干，发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒，再装入葡萄汁，将发酵装置放在18-23环境中，发酵过程中由于酵母菌无氧呼吸会产生二氧化碳，因此每天拧开气阀b多次，排出发酵过程产生的大量二氧化碳。装置中d处设计成弯曲形状利用了巴斯德的鹅颈瓶的原理，即为了防止排气时空气中微生物的污染。（3）酵母菌发酵的产物中会产生酒精，利用橙色的重铬酸钾可以检测酒精的存在，酒精遇到橙色的重铬酸钾会变为灰绿色，从而鉴定酒精的存在。（4）温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20左右最适合酵母菌繁殖，因此
82、需要将温度控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为3035，因此要将温度控制在3035。醋酸菌是好氧菌，在将酒精变为醋酸时需要氧的参与，因此要适时向发酵装置中充气，需要打开a阀通入空气。（5）如果提高果汁的出汁率且果汁变得更澄清，需要分解细胞壁和胞间层结构，而细胞壁和胞间层的主要成分是纤维素和果胶，因此需要加入纤维素酶和果胶酶。13中国酿酒最初起源于夏初或夏朝以前的时期，距今已经有四千余年的历史了。中国的黄酒，属于酿造酒，在世界三大酿造酒（黄酒、葡萄酒和啤酒）中占有重要的一席。请回答下列关于酿酒的相关问题。（1）酿酒主要的微生物是酵母菌，从代谢类型分析，属于_型。它与醋酸菌在细
83、胞结构上最主要的区别是_。（2）黄酒是利用谷物作原料，用麦曲做糖化发酵剂制成的酿造酒。已知麦曲内含有丰富的酶，请写出“糖化”的原理：_。（3）黄酒属于酿造酒，酒精度数一般为15度左右，酒精度数无法继续提高的原因可能是_。（4）酿酒所忌讳的就是酒变酸，酒的酸败是由于_。（5）为获得高纯度的黄酒，需要对所用酵母菌进行分离和纯化。微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和_。虽然这些技术的操作方法各不相同，但是核心都是要防止_。保藏的方法主要有临时保藏在固体斜面培养基上，长期保存的菌种可采用_的方法。【答案】异养兼性厌氧 有以核膜为界限的细胞核 淀粉在淀粉酶作用下分解产生麦芽糖，进而分解产生葡萄糖
84、 酒精浓度升高导致酵母菌活性下降 酒精在醋酸菌作用下生成醋酸 稀释涂布平板法 杂菌污染 甘油管藏 【解析】（1）酿酒主要的微生物是酵母菌，是真核生物，属于异养兼性厌氧型；而醋酸菌是原核生物，所以二者在细胞结构上最主要的区别是有无成形的细胞核。（2）谷物的主要成分是淀粉，麦曲内含有丰富的淀粉酶，淀粉在淀粉酶作用下分解产生麦芽糖，进而分解产生葡萄糖。（3）酒精浓度升高可能会导致酵母菌活性下降，所以酒精度数一般为15度左右，再高酵母菌就会死亡。（4）酒变酸是由于酒精在醋酸菌作用下生成了醋酸。（5）微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，两种方法的核心都是要防止杂菌污染；保藏的方法主要有临时
85、保藏在固体斜面培养基上，需要长期保存的菌种可采用甘油管藏的方法。14鸭梨醋饮属绿色健康饮品，既保存了鸭梨中的多种氨基酸、维生素、矿物质、有机酸等营养成分法对其逬行固定.而固址化霉又兼具果醋醒酒护肝、助消化、降低血脂、软化血管等养生保健功能，深受广大消者青昧。如图为鸭梨醋饮的制作流程图，请根据图回答下列问题。（1）若得到的鸭梨汁非常浑浊.解决的方法是_（2）为了提高过程所用微生物的利用率，最好用_法固定，而固定酶一般不采用此法，理由是_（3）过程所用的徽生物是_。（4）为获得高纯度的果酒，需要对过程所用的微生物进行分离和纯化.其过程为：第一步:配制培养基。该培养基必须含有微生物生长所需要的_、生
86、长因子、水和无机盐等基本营养成分,原料称重溶解后，需进行_.然后进行灭菌操作。第二步:接种。微生物常用的接种方法是_.第三步:培养。温度控制在_ 第四步:挑选符合要求的菌落。【答案】用果胶酶处理 包埋 酶分子较小，容易从包埋材料中漏出 醋酸菌 碳源、氮源 调节pH 平板划线法和稀释涂布平板法 18-25 【解析】（1）植物细胞的细胞壁成分是纤维素和果胶，所以应用果胶酶处理果汁，提高鸭梨的出汁率并使果汁变得澄清；（2）过程表示果酒的制作，果酒一般利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法；而酶分子较小，容易从包埋材料中漏出，一般采用物理吸附法或化
87、学结合法；（3）过程表示果醋的制作，果醋制作利用的菌种为醋酸菌；（4）第一步：配制培养基，该培养基必须含有微生物生长所需要的碳源、氮源、生长因子、水和无机盐等基本营养成分，原料称重溶解后，需进行调节pH，然后进行灭菌操作，常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法；第二步：接种，微生物常用的接种方法有平板划线法、稀释涂布平板法；第三步：培养；果酒制作利用的是酵母菌，酵母菌适宜生存的温度为1825。15中国杏树的栽培已有两千年以上的历史，但对杏果的利用一直停留在鲜食果肉或杏仁上。研究人员不断创新开发，成功酿制出杏果酒，其色泽淡黄、果香浓郁、营养丰富；检测发现果酒中总黄酮达20%，是目前天然可食植物制品黄酮含
88、量最高的饮品，具有抗癌防衰老的作用。请回答下列问题：（1）在酿制出杏果酒的开始时一般要先通气，其目的是_。在酸性条件下，可用_检测酒精的存在。若要进一步检测所得杏果酒中活体酵母菌的密度，一般采用_法，但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目低。（2）酿制杏果酒时，不需要对杏果进行严格的消毒处理，这是因为_。（3）制作成功的杏果酒若暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现醋酸味，尤其是气温高的夏天更易如此，分析其原因是_。醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖源_（填“充足”或“缺少”)。（4）黄酮易溶于有机溶剂乙醇，常采用_法提取果肉中的黄酮。【答案】让酵母菌在有氧条件下大量繁殖 重铬酸钾溶液 稀释涂
89、布平板法 缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应该环境而受抑制 空气中含有醋酸菌，醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为3035 缺少 萃取法 【解析】（1）果酒制作的菌种是酵母菌，是兼性厌氧型微生物，在酿酒时先通气让其进行有氧呼吸，大量繁殖，再隔绝空气进行无氧呼吸产生酒精；产生的酒精在酸性条件下可以与重铬酸钾反应，产生灰绿色；对酵母菌进行计数，可以用稀释涂布平板法。（2）由于缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应该环境而受抑制，因此酿制杏果酒时，不需要对杏果进行严格的消毒处理。（3）制作成功的杏果酒若暴露在空气中酒味会逐渐消失
90、而出现醋酸味，尤其是气温高的夏天更易如此，是因为空气中含有醋酸菌，醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为3035。醋酸菌在缺少糖源时，能将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。（4）黄酮易溶于有机溶剂乙醇，因此常采用萃取法提取果肉中的黄酮。16某种食醋的工业酿造流程为：原料处理-酒精发酵-醋酸发酵-提取-澄清-产品。回答下列问题：(1)酒醅（正在发酵和已发酵好的固体原料）在发酵过程中温度会升高，其原因是_。酒精发酵后，在酒醅中混入一些麸皮、谷糠来增加疏松程度，其作用是_。(2)可用固定化酵母细胞进行酒精发酵。干酵母固定前需先使其_；固定细胞时还需用海藻酸钠作为_，选择海藻酸钠的原因之一是它_（填“溶于”或
91、“不溶于”）水。选择固定化酵母细胞而不是固定化相关酶进行酒精发酵的主要原因是_(3)可用果胶酶处理食醋使其澄清。为了解固定化果胶酶的特性，进行了系列相关实验，结果见如图和如图。据图分析，固定化果胶酶的优点是_。【答案】酵母菌细胞呼吸释放热量 增加对醋酸菌的氧气供应，有利于醋酸菌将酒精变为醋酸 活化 载体 不溶于 酒精发酵过程需多种酶参与，固定化细胞固定的一系列酶，可达到连续生产的目的 多次重复利用后仍能保持较高的活性；对pH的稳定性增加 【解析】 (1)酵母细胞进行无氧呼吸会产生酒精，并释放热量，酒醅（正在发酵和已发酵好的固体原料）在发酵过程中温度会升高，其原因是酵母菌细胞呼吸释放热量。酒精发
92、酵后，由于醋酸菌为好氧微生物，在酒醅中混入一些麸皮、谷糠来增加疏松程度，其作用是增加对醋酸菌的氧气供应，有利于醋酸菌将酒精变为醋酸。(2)据分析可知，可用固定化酵母细胞进行酒精发酵。干酵母固定前需先使其活化；固定细胞时还需用海藻酸钠作为载体，选择海藻酸钠的原因之一是它不溶于水。选择固定化酵母细胞而不是固定化相关酶进行酒精发酵的主要原因是：固定化酶不利于催化一系列的酶促反应，酒精发酵过程需多种酶参与，固定化细胞固定的一系列酶，可达到连续生产的目的。(3)据图1可知，固定化果胶酶重复使用次数多，但活性降低不明显；据图2可知，固定化果胶酶和游离化果胶酶相比较，固定化果胶酶对pH的稳定性增加，因此，可
93、用果胶酶处理食醋使其澄清。为了解固定化果胶酶的特性，进行了系列相关实验，结果见如图1和如图2。据图分析，固定化果胶酶的优点是：多次重复利用后仍能保持较高的活性；对pH的稳定性增加。17中央电视台舌尖上的中国栏目介绍了我国各地的美食，其中利用发酵技术制作的各类特色食品，如果醋、腐乳、泡菜等，很好地展现了广大人民群众的智慧。请回答下列问题：(1)延安洛川的苹果不仅好吃，延安洛川产的苹果醋饮也非常好喝。工业上酿制苹果醋通常有两条途径，一条途径是向搞碎的苹果汁中直接接种_(填微生物名称)，经过一次发酵制成，在发酵过程中需要经常向发酵液中通入_；另一条途径需经过先后两次发酵获得，即_。(2)“王致和”腐
94、乳是我国的著名品牌，通过发酵，豆腐中营养物质的种类_(填“增多”或“减少”)。制作腐乳时加盐腌制后需要加入卤汤、若卤汤中的酒精含量过高，则会导致腐乳_。(3)泡菜具有独特的风味，提起酸菜，自然会让人联想“翠花，上酸菜”，那可是东北一大美食。在我国的泡品种中，东北酸菜和四川泡菜非常有名，其实，在陕西北部，人称“陕北”的酸菜，那也是绝对美。它们的制作过程也基本类似，都是利用_(填微生物名称)发酵。向坛中注入盐水前、煮沸所用盐水的目的是_。在泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量的变化情况是_。【答案】醋酸菌 无菌空气 先接种酵母菌获得果酒,再在果酒中接种醋酸菌进一步获得果醋 增多 成熟时间延长 乳酸菌 杀灭
95、细菌(或灭菌) 先增加后减少 【解析】（1）制作果醋时，可以直接在苹果汁中加入醋酸菌进行有氧发酵，产生醋酸；还可以先利用酵母菌进行酒精发酵，再通入空气，升高温度，接种醋酸菌发酵产生果醋。（2）腐乳制作的过程中，大分子物质会被分解成小分子物质，故营养物质的种类会增多。制作腐乳的流程：让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制。卤汤中含有的酒精可以抑制微生物的生长，同时使腐乳具有独特的香味。如果酒精含量过高，腐乳成熟的时间会延长。（3）酸菜和泡菜均利用乳酸菌进行的发酵，对所用盐水进行煮沸消毒，杀灭细菌。制作泡菜的过程中，亚硝酸盐的含量会增加，一般在腌制10d后，亚硝酸盐的含量会开始下降。18回答下
96、列问题：（1）酶活性是指酶催化一定化学反应的能力，酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化某一反应的_来表示。与一般酶制剂相比，固定化酶的突出优点是既能与反应物_，又能与产物_，还能被反复利用。（2）探索温度对淀粉酶活性的影响实验，需要进行如下步骤：取3支试管，各注人2ml淀粉溶液并分别编号A、B、C再取3支试管，各注人1m1淀粉酶溶液并分别编号a、b、c向3支试管各滴1滴碘液将A、a试管放在60的热水中，B、b放在沸水中，C、c放在冰水中，各维持温度5min分别将A与a、B与b、C与c混合后，再依次放在60的热水、沸水和冰水中维持温度5min观察实验现象最合理的操作顺序是（_）A BC D（
97、3）酒精发酵过程相关的酶存在于酵母菌细胞的_中。（4）纤维素分解菌因能产纤维素酶而广泛存在，纤维素酶是一种复合酶，在三种酶的_作用下，纤维素被分解成葡萄糖。在以纤维素为唯一碳源的培养基上培养一段时间后，培养基表面形成多个单菌落，但不同菌株分解能力有差异，为选出高效分解的菌株，请利用所学知识，写出具体思路：_。【答案】反应速度 接触 分离 B 细胞质基质 协同 用纤维素含量相同并加入刚果红的鉴别培养基分别培养各菌株，培养相同时间后比较透明圈的大小。透明圈越大，说明分解能力越强 【解析】（1）酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力，可用在一定条件下其所催化某一化学反应的速度表示。与一般酶制剂相比，固
98、定化酶不仅能与反应物充分接触，还能与产物分离，并且可以反复利用。（2）该实验的自变量是温度的不同；由于酶具有高效性，因此在进行实验时，应先使酶溶液和底物溶液分别达到实验温度后再混合，以免对实验结果产生干扰。将相同温度下的酶溶液和底物溶液混合后，维持各自的实验温度一定时间，以保证酶有足够的时间催化化学反应。最后向试管中滴加碘液，通过检测淀粉的剩余量的多少来判断酶的活性。综上分析，最合理的实验顺序是，应选B。（3）酒精发酵过程是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌无氧呼吸的场所是细胞质基质，因此酒精发酵过程相关的酶存在于酵母菌细胞的细胞质基质中。（4）纤维素酶是一种复合酶，它至少含有三种组分，即C1
99、酶、Cx酶、葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。因此在三种酶的协同作用下，纤维素被分解成葡萄糖。刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。为选出高效分解纤维素的菌株，可以用纤维素含量相同并加入刚果红的鉴别培养基分别培养各菌株，培养相同时间后比较透明圈的大小。透明圈越大，说明分解能力越强。19大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，含有2000种以上的蛋白质；大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。回答下列问题：(1)利用凝胶色谱法分离提取到的部分大肠杆
100、菌蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmol/L的_到适当高度进行洗脱，结果甲蛋白质先洗脱出来，乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是_。(2)通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目：一定体积的自来水样过滤后，将滤膜放在伊红-美蓝培养基（主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红-美蓝水溶液）上培养，大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝反应，使菌落呈黑色。根据培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量。伊红-美蓝培养基属于_ (填“选择”或“鉴别”)培养基，蛋白胨的作用有_ (答出两点即可）。培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测固体培养基是否被污染，检测方法是
101、_。用滤膜法进行测定时，滤膜的孔径应 _ (填“大于”或“小于”）大肠杆菌。滤膜法是根据培养基上菌落的数目来推测样品中的活菌数，其原理是_。【答案】磷酸缓冲液 甲蛋白质 鉴别 提供碳源、氮源、维生素 将未接种的培养基在适宜的条件下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落出现 小于 (当样品中细菌浓度低时,)培养基表面生长的一个菌落来源于样品中的一个活菌 【解析】（1）凝胶色谱法所用洗脱液是磷酸缓冲液。甲蛋白质先洗脱出来，乙蛋白质后洗脱出来，说明甲的相对分子质量较大。（2）大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝发生特定的颜色反应，使菌落呈黑色，因此可以鉴别大肠杆菌，可知伊红-美蓝培养基属于鉴别培养基。蛋白
102、胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成，富含有机氮化合物，也含有一些维生素和糖类，因此添加在培养基中主要作为氮源，也可提供碳源和维生素。检测培养基是否被污染，需在接种前将空白培养基即未接种的培养基放在适宜的条件下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落出现，若有菌落出现，则说明培养基被污染或灭菌不彻底，不能用于接种实验。滤膜法测定活菌数目的原理是：当样品中细菌浓度低时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品中的一个活菌，滤膜的孔径应小于大肠杆菌。20某小组同学研究饭后剩余米汤中细菌数量随时间的变化，他们每过半小时取样一次，采用平板培养法进行计数。请回答下列问题：（1）根据研究目的应采用_法接种
103、，接种前需先对样本进行_操作。（2）为了保证所有种类的细菌均能生长，所用培养基应包括的营养要素有_。（3）随后该组同学对筛选出的所有细菌进行再培养研究，他们往培养基中加入一定量的青霉素这种培养基可叫做_培养基，从而可分离出_的细菌。（4）酿酒利用的微生物主要是_，该生物在_条件下分解糖类产生酒精。酿醋利用的微生物主要是_。【答案】稀释涂布平板 梯度稀释 氮源、碳源、水、无机盐和特殊的营养物质 选择 耐青霉素 酵母菌 无氧 醋酸杆菌 【解析】（1）根据题意可知，该实验需要对样品进行梯度稀释后用稀释涂布平板法接种，培养后进行计数。（2）微生物培养基中的营养成分主要有氮源、碳源、水、无机盐和特殊的营养物质。 （3）细菌对青霉素敏感，在微生物培养基中加入青霉素可以作为选择培养基分离出耐青霉素的细菌。 （4）酿酒利用的微生物是酵母菌，在无氧条件下，酵母菌无氧呼吸可以将葡萄糖分解为酒精和二氧化碳。醋酸发酵用的微生物是醋酸杆菌。
