1、1限制性核酸内切酶EcoR对DNA的识别序列是5GAATTC3，当用它处理环状DNA分子时，可形成()。A两端相同的线性DNA，有黏性末端B两端相同的线性DNA，无黏性末端C两端不同的线性DNA，一端有黏性末端，一端无黏性末端D两种末端无法判断解析不同限制性核酸内切酶切割位点是不相同的，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即黏性末端和平末端。如果是限制酶EcoR，则在它识别序列的中心轴线两侧进行切割，产生黏性末端；如果是限制酶Sma，则在它识别序列的中心轴线处切割，产生的是平末端。答案A2右图为表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是 ()。A氨苄青霉素
2、抗性基因B启动子C限制酶DDNA连接酶解析启动子是该表达载体所必需的，功能是启动插入基因的转录过程。氨苄青霉素抗性基因可以作为标记基因，但不是必须用它作标记基因。限制酶和DNA连接酶都不是表达载体所需要的。答案B3(2012北京黄冈冲刺卷)如图是利用基因工程技术培育转基因植物，生产可食用疫苗的部分过程示意图，其中Pst 、Sma 、EcoR、Apa为四种限制性内切酶。下列说法错误的是()。A图示过程是基因工程的核心步骤B表达载体构建时需要用到限制酶Sma C抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来D除图示组成外，表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构解析图示过程为基因表达载体的
3、构建过程，是基因工程中的核心步骤。构建过程中需要将目的基因完整切割下来，此时要用到限制酶Pst 、EcoR 。抗卡那霉素基因是标记基因，目的是便于鉴定和筛选含有目的基因的细胞。基因表达载体包括启动子、目的基因、终止子和标记基因等。答案B4下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamH、Hind 、Sma 直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答下面的问题。(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用_限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含_的培养基上进行。(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺
4、细胞中特异性表达的调控序列是_(填字母代号)。A启动子 BtetRC复制原点 DampR(3)过程可采用的操作方法是_(填字母代号)。A农杆菌转化 B大肠杆菌转化C显微注射 D细胞融合(4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_(填字母代号)技术。A核酸分子杂交 B基因序列分析C抗原抗体杂交 DPCR解析(1)由图示可知：需用Hind和BamH限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因，因酶切后tetR四环素抗性基因结构被破坏而ampR结构完好，故用含氨苄青霉素的选择培养基可筛选含有重组载体的大肠杆菌。(2)启动子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶识别和结合的位点，可调控基因的特异性表达。(3)过程表示把重组载体导入受体细胞的过程，当受体细胞为动物细胞时，常采用显微注射法。(4)人乳铁蛋白基因是否成功表达，关键看是否有其表达产物即人乳铁蛋白，可用抗原抗体杂交法检测该蛋白是否存在。答案(1)Hind和BamH氨苄青霉素(2)A(3)C(4)C课堂小结
