1、专题二课题3请同学们认真完成练案6一、选择题1分离土壤中纤维素分解菌用到的方法是(B)稀释倒平板法涂布平板法单细胞挑取法 选择培养分离ABCD解析分离土壤中纤维素分解菌，先进行选择培养，增大纤维素分解菌的浓度，梯度稀释、涂布平板、培养，单细胞挑取以获得纯培养。2下列有关微生物实验室培养的说法正确的是(B)A在对微生物培养前，需对微生物和培养基进行灭菌处理B分离能分解纤维素的细菌时要以纤维素作为培养基中唯一的碳源C用于培养不同微生物的培养基均应将pH调至中性或微碱性D稀释涂布平板法和平板划线法均可用于统计待测菌液中的活菌数目解析在对微生物培养前，需对培养基进行灭菌处理，不能对微生物进行灭菌处理，
2、A错误；分离能分解纤维素的细菌时要以纤维素作为培养基中唯一的碳源，B正确；配制培养不同微生物的培养基时都要将pH调至能够满足该种微生物的需要，如用于培养细菌的培养基应将pH调至中性或微碱性，而用于培养真菌的培养基应将pH调至酸性，C错误；稀释涂布平板法可用于统计待测菌液中的活菌数目，而平板划线法不可用于统计待测菌液中的活菌数目，D错误。3在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是(C)A分解尿素的细菌B硝化细菌C分解纤维素的细菌D乳酸菌解析分解纤维素的细菌能将纤维素分解，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。4在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的
3、是(A)A用液体培养基可获得大量菌体B纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长C用液体培养基可以充分利用培养基中营养物质D用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌解析液体培养基与固体培养基相比，其中的营养物质更易被微生物利用，从而获得大量菌体。5下列有关纤维素酶作用的验证实验的叙述，不正确的是(B)A可用报纸、复印纸来代替滤纸条B两支试管中所加缓冲液的量相等C在一定范围内，滤纸条的分解速度会随着纤维素酶含量的增加而加快D振荡会加快滤纸条的分解解析在验证纤维素酶作用的实验中，两支试管所加缓冲液的量分别为10 mL和11 mL，加入10 mL缓冲液的试管中还需加入1 mL的纤维素酶，而另一支试管则不加。6
4、下列关于纤维素酶的叙述，错误的是(A)A纤维素酶只有一种，只能将纤维素分解为葡萄糖B纤维素酶是一种复合酶，至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种C纤维素可被纤维素酶水解成葡萄糖，为微生物提供营养物质D分解纤维素的细菌、真菌和放线菌，都是通过产生纤维素酶来分解纤维素的解析纤维素酶是一种复合酶，至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种。7纤维素、纤维素酶和控制纤维素酶合成的基因，其基本组成单位依次是(B)A葡萄糖、葡萄糖、氨基酸B葡萄糖、氨基酸、脱氧核苷酸C氨基酸、脱氧核苷酸、脱氧核苷酸D淀粉、蛋白质、核酸解析纤维素是多糖，其基本组成单位是葡萄糖；纤维素酶是蛋白质，其基本组成单位是氨基酸；基因是DN
5、A片段，其基本组成单位是脱氧核苷酸。8分离土壤中纤维素分解菌用到的方法是(B)稀释倒平板法涂布平板法单细胞挑取法选择培养分离ABCD解析稀释倒平板法是先进行梯度稀释，然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50 左右的琼脂培养基泥合、摇匀后，倒入已灭菌的培养皿中，制成可能含菌的琼脂平板，恒温培养一定时间后即可出现菌落。涂布平板法是先将熔化的培养基倒入无菌培养皿中，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的某一稀释度的样品液涂布在整个平板表面，经培养后形成单个的菌落。9在纤维素分解菌的鉴定实验中，纤维素酶的测定方法一般是(B)A对纤维素进行定量测定B对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定C
6、对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定D对纤维素分解菌进行定量测定解析在纤维素分解菌的鉴定实验中，纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定，故B正确。10在分离分解纤维素的微生物的实验中，关于土壤取样的叙述中，不正确的是(A)A可选取深层的土壤作为样品B可选取树林中多年落叶形成的腐殖土作为样品C可选取树林中多年积累的枯枝败叶作为样品D可把滤纸埋在土壤中经过30天左右，再选取已腐烂的滤纸作为样品解析纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中，或者将富含纤维素的物质如滤纸埋在土壤中经过30天左右，再从已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌，B、C、D正确；绝大多数
7、细菌分布在距离地表38 cm的土壤层，故不可选取深层土壤作样品，否则细菌数目很少，A错误。11选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为(B)A伊红美蓝培养基、含青霉素培养基B含青霉素培养基、含氨的无机培养基C含氨的无机培养基、含青霉素培养基D含青霉素培养基、伊红美蓝培养基解析酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培养基进行选择培养，因为青霉素抑制细菌生长，但不抑制真菌生长。硝化细菌为自养型生物，能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量，把无机物转变
8、为有机物以维持自身生命活动，利用含氨的无机培养基可进行选择培养。12在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上之前一般先进行选择培养，其主要目的是(C)A完全除去其他微生物B没有意义，去掉这一步更好C增加纤维素分解菌的浓度D使纤维素分解菌充分长大解析纤维素分解菌如果在所采集的土样中含量少，稀释涂布到鉴别培养基上后形成的菌落数少，不利于挑选所需菌落，通过选择培养可以增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。二、非选择题13(2020山师大附中模拟)土壤中微生物种类繁多，功能强大，比如：最显著的作用是分解有机质；把植物的残枝败叶和施入土壤中的有机肥料分解，改善土壤的结构和供
9、给植物吸收。若利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化。以下示意图是从土壤中分离出分解尿素的微生物流程图。回答下列问题：(1)过程所使用的接种方法是_稀释涂布平板法_。用该接种方法对微生物进行计数时，通常选用菌落数在_30300_个的平板进行计数，统计的菌落数往往比活菌的实际数目_低_。(2)从用途上来说，1号培养基属于_选择_培养基，制备该培养基的步骤是：计算称量溶化_灭菌_倒平板。(3)该实验中酶活性鉴定需鉴定_脲_酶的活性，可以加入_酚红_指示剂，如果指示剂变为_红_色，说明该酶的检测为阳性。解析(1)在分离微生物时，是将土壤样液连续稀释，为采用稀释涂布平板法进行分离，为减小实验误
10、差，实际操作时通常选用菌落数在30300之间适于计数的平板。因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是1个菌落，因此统计的菌落数往往偏低。(2)此图是用于分离分解尿素的微生物的，因此1号培养基属于选择培养基，制备的步骤是计算称量溶化灭菌倒平板。(3)该实验的目的是从土壤中分离出分解尿素的微生物，该微生物能产生脲酶，将尿素分解生成氨和CO2，因此需鉴定脲酶的活性，生成的氨遇酚红指示剂后变红色。14(2019湖北调研)欲从腐乳中分离筛选出产蛋白酶活力高的毛霉菌株，设计了如下实验流程：回答下列问题：(1)毛霉属于_真_核生物。在腐乳制作中，主要利用毛霉等微生物产生的_蛋白酶和脂肪_酶将豆腐中
11、的蛋白质和脂肪分解为小分子物质。(2)步骤进行涂布前，需将孢子悬浮液进行梯度稀释，进行梯度稀释的目的是_增加悬浮液的稀释度，涂布培养能分离到单菌落_。若进行10倍稀释，一般吸取1 mL悬浮液注入_9_mL无菌水_中，混匀。(3)孟加拉红培养基常用于分离霉菌及酵母菌，在孟加拉红培养基中加入氯霉素可以抑制细菌的生长。从功能上看，孟加拉红培养基属于_选择_培养基。(4)毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈，在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙，其菌落直径分别为3.2 cm、2.8 cm、2.9 cm，其菌落与透明圈一起的直径分别为3.7 cm、3.5 cm、3.3 cm。应选择菌落_乙_作为
12、产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。解析(1)毛霉属于真核生物。在腐乳制作中，主要利用毛霉等微生物产生的蛋白酶和脂肪酶将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质。(2)将孢子悬浮液进行梯度稀释的目的是增加悬浮液的稀释度，涂布培养能分离到单菌落。若进行10倍稀释，一般吸取1 mL悬浮液注入9 mL无菌水中，混匀。(3)孟加拉红培养基常用于分离霉菌及酵母菌，据此可知：从功能上看，孟加拉红培养基属于选择培养基。(4)毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈，透明圈与菌落直径的比值反映了毛霉菌株产蛋白酶活力的能力，因此应挑选透明圈与菌落直径比值最大的菌体。依题意可知：筛选到的三个单菌落甲、乙、丙的透明圈与菌落直径的
13、比值最大的为乙，所以应选择菌落乙作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。15某学习兴趣小组进行了卷烟纸消失实验，实验设计及结果如下。土样AB1B2是否灭菌是否否实验前每组卷烟纸的质量333实验后每组卷烟纸的质量300注：土样取自长期经营的菜园并放置在编号为A、B1、B2的培养皿中；每组中的卷烟纸均匀地放在培养皿的不同区域；置于室温条件下，定时喷水，保持样品湿润。(1)B1、B2中卷烟纸消失的原因是_卷烟纸的主要成分是纤维素，而土壤中含有能分解纤维素的微生物_。(2)为获得土样中的相关微生物，并提高分离成功的概率，应在培养皿中_卷烟纸消失_部位进行表层多点取样，取样工具在取样前要进行_灭菌_处理。(3)
14、如果得到的相关微生物较少，我们可以将其转移到含有_大量纤维素_的培养基中进行_扩大_培养。培养时我们可以利用_刚果红_染色法，根据是否产生_透明圈_来进行鉴别。解析(1)土样取自长期经营的菜园，富含纤维素分解菌，纤维素分解菌分泌的纤维素酶可将纤维素分解。因此B1、B2中卷烟纸消失的原因是：卷烟纸的主要成分是纤维素，而土壤中含有能分解纤维素的微生物。(2)B1、B2的培养皿中，卷烟纸消失的部位存在纤维素分解菌。为获得土样中的相关微生物，并提高分离成功的概率，应在培养皿中卷烟纸消失的部位进行表层多点取样。为了避免杂菌污染，取样工具在取样前要进行灭菌处理。(3)如果得到的相关微生物较少，可以将其转移到含有大量纤维素的培养基中进行扩大培养。刚果红可与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应。当纤维素被纤维素酶水解后，刚果红纤维素复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。可见，培养时可以利用刚果红染色法，根据是否产生透明圈来进行鉴别。
