1、基础课时案42生物技术在其他方面的应用2016备考最新考纲1血红蛋白的提取与分离。2.从生物组织中提取某些特定成分。3.实验:DNA的粗提取与鉴定。一、DNA的粗提取与鉴定1基本原理2操作过程材料的选取:选用DNA含量相对较高的生物组织破碎细胞(以鸡血为例):鸡血细胞,加蒸馏水,用玻璃棒搅拌,用纱布过滤,收集滤液去除杂质:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质DNA析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为95%的酒精溶液DNA的鉴定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂,沸水中加热5 min,溶液变成蓝色易错警示!(1)本实验
2、不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料,原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。(2)实验中两次使用蒸馏水,第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA,第二次的目的是稀释NaCl溶液,使DNA从溶液中析出。(3)二苯胺试剂要现配现用,否则二苯胺会变成浅蓝色,影响鉴定效果。深度思考下图为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操作,请仔细观察并分析操作的目的分别是什么?_提示是使鸡血细胞吸水涨破释放出核物质;是析出DNA,去除溶于酒精的杂质;是使DNA溶解在2 mol/L NaCl溶液中;是稀释NaCl溶液使其浓度接近0.14 molL1,去除溶于低浓度NaCI溶液的杂质。二、PCR技术的基本操作和应用1PC
3、R原理DNA热变性原理,即:2PCR反应过程(1)变性:当温度上升到90_以上时,双链DNA解旋为单链。(2)复性:温度下降到55_左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。(3)延伸:温度上升到72 左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。三、血红蛋白的提取和分离1方法及原理方法原理凝胶色谱法根据相对分子质量的大小分离蛋白质电泳法各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同2.血红蛋白的提取和分离过程深度思考1相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为中的哪一种?提示,分子质量较大者先洗脱出来,分
4、子质量较小者后洗脱出来。2如图所示装置可用于血红蛋白提取、分离的哪种过程?其原理是什么?烧杯内a溶液是蒸馏水吗?提示该装置为透析装置,由于透析袋是用硝酸纤维素制成的小分子可自由进出,而大分子保留在袋内,故可用于除去小分子杂质,烧杯中的a溶液应为20 mmolL1的磷酸缓冲液,不可使用蒸馏水。四、植物有效成分的提取1植物芳香油的提取(1)提取玫瑰精油实验方法:水蒸气蒸馏法。实验流程(2)提取橘皮精油的实验方法:一般用压榨法。实验流程石灰水浸泡漂洗压榨过滤 橘皮油再次过滤静置2胡萝卜素的提取(1)胡萝卜素的性质:不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。(2)实验设计方法:萃取法,石油醚最适宜作萃取剂。实验流程胡萝卜粉碎干燥萃取 胡萝卜素浓缩过滤(3)鉴定方法:纸层析法。