1、第31讲酶的应用浙江学考选考考纲确认考点知识内容加试二、酶的应用3.果汁中的果胶和果胶酶4淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测掌握程度参考考试标准中的：二、(二)3实验与探究能力考点| 酶与酶的固定化1果汁中的果胶和果胶酶(1)果胶果胶的化学组成：半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯。果胶的作用：植物细胞壁的主要成分；可将植物细胞粘合在一起。果胶的鉴别方法：果胶不溶于乙醇。(2)果胶酶来源：黑曲霉、苹果青霉等微生物可用于生产果胶酶。作用：果胶酶和果胶甲酯酶可水解果胶，与制取果汁有关。应用：用于果汁加工，提高果汁的出汁率和澄清度。(3)探究制作果汁的最佳条件2淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测(1)固定化酶
2、的概念和制作方法固定化酶是指将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。固定化的方法：吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。(2)淀粉酶的固定化淀粉酶作用的最适条件：最适pH为5.57.5；最适温度为5075_。方法：利用吸附法，将淀粉酶固定在石英砂上。淀粉的水解作用：(3)淀粉酶固定化实验的过程将固定化淀粉酶装入注射器中以0.3 mL/min的流速滴加淀粉溶液过柱流出5 mL淀粉溶液后接收0.5 mL流出液滴加KII2溶液，观察颜色，稀释1倍后再观察颜色以10倍柱体积的蒸馏水洗涤固定化柱，放置在4 冰箱中，几天后重复实验。1探究影响果胶酶活性因素实验的
3、相关分析(1)实验原则：遵循单一变量原则、对照原则，严格控制变量，尽量减少无关变量的影响。(2)实验原理：果胶酶活性受温度、pH或酶抑制剂的影响，在最适温度或pH时，其活性最高，果肉的出汁率、果汁的澄清度都与果胶酶的活性大小呈正相关。(3)三个实验的变量分析实验名称(目的)自变量因变量注意事项探究温度对果胶酶活性的影响温度果汁量(澄清度)底物和酶在混合时的温度是相同的；温度梯度越小，实验结果越精确；苹果泥和果胶酶的用量在各个试管中应相同；pH应为最适pH探究pH对果胶酶活性的影响pH果汁量(澄清度)温度应为最适温度；pH梯度可用NaOH和盐酸调节；用玻璃棒搅拌使反应充分进行探究果胶酶的用量果胶
4、酶的用量果汁量(澄清度)制备苹果匀浆后迅速加热，使苹果匀浆中果胶酶变性；温度、pH应为最适温度和最适pH且保持不变2.常见固定化方法及其优缺点方法优点缺点吸附法适用的酶范围广，酶活性高酶与载体的结合力较弱，酶容易脱落共价偶联法、交联法结合稳定，适用范围广制备条件不够温和，酶活性较低包埋法酶活性高，稳定性也较高适用范围窄1(20164月浙江选考)请回答与“果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题：(1)果胶是细胞壁的重要组成成分，其化学本质是_(A.蛋白质B.脂质C.核酸D.多糖)，它在细胞壁形成过程中的主要作用是将相邻的细胞_在一起。(2)制取果汁时，先用果胶酶将果胶分解成_和半乳糖醛酸甲酯等物质
5、，再用_酶处理，可得到比较澄清的果汁。用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时，果汁的出汁率、澄清度与酶的_高低成正相关。(3)由于果胶不溶于乙醇，故可用乙醇对果胶粗提取物(经酶处理后的混合物)进行_处理，从而得到干制品。【解析】(1)果胶是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成的，其化学本质属于多糖。果胶有将植物细胞粘合在一起的作用。(2)果胶酶能将果胶分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯等物质。要使果汁更澄清，应同时使用果胶酶和果胶甲酯酶。用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时，果汁的出汁率、澄清度与酶的活性高低呈正相关。(3)由于果胶不溶于乙醇，故可用乙醇对果胶粗提取物(经酶处理后的混合物)进行沉淀处理，从
6、而得到干制品。【答案】(1)D粘合(2)半乳糖醛酸果胶甲酯活性(3)脱水(沉淀)2固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。如图显示的是部分研究结果(注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量)。甲乙(1)酶的固定化技术的应用最主要的目的是_。(2)从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，甲图所示结果可以得出的结论是_。(3)乙图曲线表明浓度为_的海藻酸钠包埋效果最好。【解析】(1)酶的固定化技术的应用最主要的目的是解决酶的回收和再利用的困难。(2)由图可知，固定化酯酶与游离酯酶相比，在相同温度下固定化酯酶的酶活力更高，对温度变化适应性更强，应用范围较广。(3)乙图曲线表明浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好。【答案】(1)解决酶的回收和再利用的困难(2)固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强，且应用范围较广(3)3%
