1、选修1课时14 血红蛋白的提取和分离班级:_姓名:_设计人_日期_课后练习基础过关 1利用凝胶色谱法，先洗脱出来的蛋白质是A.相对分子质量大的B.溶解度高的C.相对分子质量小的D.所带电荷多的2电泳过程中，分子迁移速度最快的是A.纤维状、大分子B.纤维状、小分子C.球状、大分子D.球状、小分子3选用红细胞作为分离蛋白质的实验材料，最大的好处是A.血红蛋白是有色蛋白B.红细胞无细胞核C.红细胞蛋白质含量高D.红细胞DNA含量高4下面相关的叙述中，不正确的是A.在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液PH的影响，维持pH基本不变B.缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成C.电泳是指带
2、电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D.透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内5蛋白质的提取和分离要经过的步骤是A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定6下列叙述中正确的是A.不同类型的凝胶吸水量相同B.不同类型的凝胶膨胀所需的时间不同C.若凝胶中含有空气、细菌等不影响分离度D.可以用高温、高压的方法来加速凝胶膨胀7下列有关蛋白质分离原理的叙述中，正确的是A.蛋白质中含有游离的氨基，是碱性电解质B.蛋白质中含有游离的羧基，是酸性电解质C.蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷
3、相同的电极方向移动D.蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动8用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质A.路程较长，移动速度较慢B.路程较长，移动速度较快C.路程较短，移动速度较慢D.路程较短，移动速度较快能力提升1凝胶色谱技术是一种快速而又简单的分离技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果，目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。据图回答下面的问题。(l)a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是_，原因是_。(2)自己制作凝胶色谱
4、柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由_替代。(3)装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是_。(4)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体_(填相同或不同)，洗脱时，对洗脱液的流速要求是_。2回答下面有关蛋白质的提取和分离实验的问题。(1)电泳利用了待分离样品中各种分子_以及_、_的不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。(2)若用猪、牛、羊或其他脊稚动物的血液来分离血红蛋白，需对样品如何处理？(3)请描述血红蛋白分离的完整过程。选修1课时14 血红蛋白的提取和分离详细答案【基础过关】1A【解析】凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质垂直向下
5、运动、路径短，可先洗脱出来。2D【解析】电泳就是利用了连续分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同而进行分离。一般来说，球形分子比纤维状分子易移动，小分子比大分子易移动。3A【解析】血红蛋白带有铁卟啉，因此可以作为一个很好的分离标记和定量指标，而且血红蛋白可以自组装形成四聚体，如果将待分离蛋白质与血红蛋白共表达，那么你分离该蛋白的的时候就可以利用血红蛋白自聚集的特性来分离该蛋白，并用铁卟啉的含量来表征待分离蛋白的量。4D【解析】透析袋一般是用硝酸纤维素(又叫玻璃纸)制成的。透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质，或用于更换
6、样品的缓冲液。5C【解析】蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。A中凝胶色谱操作及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳为实验操作过程中的技术。6B【解析】不同类型的凝胶其吸水量不同，如G25为每克凝胶在膨胀时吸水2.5g，G200为每克凝胶吸水20g。不同类型的凝肢膨胀所需时间不同，如使用软胶时，自然膨胀需24h至数天。凝胶中含有气泡会影响蛋白质的洗脱。加热可加速凝胶的膨胀，但不能采用高温高压的方法。7D【解析】电泳技术分离蛋白质的原理：蛋白质属于两性电解质，且在一定pH条件下带有电荷，在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动。8D【解析】在凝胶小球体内部有许多贯穿的通道，当
7、相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。【能力提升】1(1)a a相对分子质量较大，无法进人凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快(2)尼龙网和尼龙纱(3)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果(4)相同保持稳定【解析】该题考查了凝胶色谱分离蛋白质的原埋、凝胶色谱柱的制作、凝胶色谱柱的装填及样品加入与洗脱的注意事项， 正确解该题必须熟练掌握上述操作。2(1)带电性质的差异 分子本身的大小 形状(2)红细胞的洗涤；血红蛋白的释放;分离血红蛋白溶液；透析。 (3)血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液， 即样品的处理；再经过透析去除相对分子质量较小的杂质， 即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。【解析】本题主要考查血红蛋白的提取和分离的原理和步骤。电泳的原理是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状的不同等。
