1、姓名 班级 组别 等级 1.1DNA重组技术的基本工具学法指导:设置问题情境，引导学生在思索中学习新知识。学习目标：1、简述基因工程的原理及基本操作程序2、尝试设计某一转基因生物的研制过程学习重点：基因工程基本操作程序的四个步骤学习难点：（1）从基因文库中获取目的基因（2）利用PCR技术扩增目的基因自学过程：基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤： 、 、 、 。学点一、目的基因的获取：1目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的 。也可以是一些具有 的因子。2获取目的基因的方法(1)从基因文库中获取目的基因基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 ，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生
2、物的不同基因，称为基因文库。种类基因组文库：含有一种生物的 基因。部分基因文库：含有一种生物的 基因，如cDNA文库。目的基因的获取依据：根据基因的有关信息：基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物mRNA、基因的翻译产物蛋白质等特性获取目的基因。高二生物导学案 编者：李丽平 编号：2 日期：2015-3-11(2)利用PCR技术扩增目的基因。PCR含义：是一项在生物体外 特定DNA片段的核酸合成技术。PCR原理：DNA 。条件：有一段已知目的基因的 序列，以便根据这一序列合成 。过程：目的基因DNA受热形成 ，与 结合，然后在_ _的作用下进行延伸形成DNA。方式：每次循环后目的基因的量
3、增加一倍，即成 扩增=2n(n为扩增循环的次数)。(3)人工合成法：如果 ， 已知，可以通过 用化学方法人工合成。学点二、基因表达载体的构建基因工程的核心1表达载体的组成： + + + 等。2启动子：位于基因的 ，它是 和结合的部位，驱动基因转录产生mRNA，最终获得所需的 。3终止子：也是一段有特殊结构的 ，位于基因的 ，终止 。4标记基因：鉴别受体细胞是否含有目的基因，从而将 筛选出来。常用的标记基因是 。5表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中 ，并且 给下一代；同时使目的基因能够_ _和 作用。6不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别。学点三、
4、将目的基因导入受体细胞(一)转化的概念：目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内 和 过程。(二) 常用的转化方法：1将目的基因导入植物细胞(1)农杆菌转化法农杆菌特点：易感染 植物和裸子植物，对_ _植物没有感染力；Ti质粒的 可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。转化过程：目的基因插人 农杆菌导入植物细胞目的基因整合到植物细胞染色体上目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(2)基因枪法基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。(3)花粉管通道法花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法（我的的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的）。植物花粉在
5、柱头上萌发后，花粉管要穿过花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后，滴加DNA（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。2将目的基因导入动物细胞(1)方法：显微注射技术。(2)操作程序：目的基因表达载体 取卵(受精卵) 显微注射注射了目的基因的受精卵移植到_ _性动物的_ _内发育新性状动物。3将目的基因导入微生物细胞(1)原核生物特点： 、多为 、 相对较少等。(2)大肠杆菌最常用的转化方法是： 处理细胞 细胞表达载体与感受态细胞混合 _ _ 细胞吸收DNA分子。学点四、目的基因的检测与鉴定1检测首先要检测 ，方法是采用 。其次还要检测 ，方法是采用 。最后检测 ，方法是从转基因生物中提取 ，用相应的 进行 。2鉴定：进行 的鉴定。如 。1、正确表示基因工程顺序操作的四个步骤的是 ( )A获取目的基因将目的基因导入受体细胞基因表达载体的构建目的基因的检测与鉴定B目的基因的检测与鉴定获取目的基因基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞C获取目的基因基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定D基因表达载体的构建获取目的基因将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定
