1、课时跟踪检测(三十四)微生物的培养、分离与计数一、选择题1下列关于灭菌和消毒的说法不正确的是()A灭菌是指杀灭物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子B消毒和灭菌的条件、结果、方法是相同的C接种环用灼烧法灭菌D常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等2能够测定样品活菌数的方法是()A稀释涂布平板法B直接计数法C质量法 D比浊法3下列关于分离纤维素分解菌的实验操作有误的是()A经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B选择培养这一步可省略，但得到的纤维素分解菌会较少C可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量D对照组可用等量的纤维素分解菌培养液涂布到不含
2、纤维素的培养基上4(2014广元质检)分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()选项尿素琼脂糖葡萄糖硝酸盐ABCD注：“”表示加入，“”表示不加。5下列关于微生物培养基的叙述，错误的是()A制备固体培养基，可以在液体培养基中加入凝固剂琼脂B微生物在固体培养基表面生长形成的菌落，可以用肉眼观察到C所有培养基都含有相同的水、碳源、氮源和无机盐等四类物质D培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素6使用液体选择培养基培养纤维素分解菌的目的是()用液体选择培养基可获得大量纤维素分解菌用液体培养基便于稀释涂布平板纤维素分解菌只能在液体培养基中生长用液体培养基可鉴别纤维素分解菌A BC D7研究者从冰川土
3、样中分离获得了具有较高脂肪酶活性的青霉菌菌株，为了在此基础上获得脂肪酶活性更高的菌株，最可行的做法是()A用紫外线照射青霉菌菌株，再进行筛选B将青霉菌菌株与能高效水解蛋白质的菌株混合培养，再进行筛选C将能高效水解蛋白质的菌株的基因导入青霉菌菌株，再进行筛选D设置培养基中各种营养成分的浓度梯度，对青霉菌菌株分别培养，再进行筛选8大多数微生物的扩大培养，利用的都是牛肉膏蛋白胨固体培养基。下表所示牛肉膏蛋白胨培养基的成分及含量。相关叙述错误的是()成分牛肉膏蛋白胨氯化钠琼脂蒸馏水含量5 g10 g5 g20 g1 000 mL(定容体积)A该培养基为微生物提供维生素的有牛肉膏、蛋白胨B该培养基为微生
4、物提供氮源的有牛肉膏、蛋白胨C该培养基为微生物提供碳源的有牛肉膏、蛋白胨D该培养基能为微生物提供无机盐的只有NaCl二、非选择题9(2014南充模考)下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方：KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O葡萄糖尿素琼脂蒸馏水1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 g定容至1 000 mL请根据以上配方，回答下列问题：(1)该培养基含有微生物所需要的_类营养物质。其中最主要的碳源是_，氮源是_。(2)该培养基按物理性质划分是_培养基；按培养基的作用划分是_培养基。(3)该培养基具有选择作用的原因是_。(4)在该培养基中，可通过检测pH的变化来
5、判断尿素是否被分解，依据的原理是_。所用方法是在培养基中加入_指示剂，如果尿素被分解，则培养基变成_色。10(2014陕西五校一模)下面的甲图表示酵母菌、硝化细菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况，乙图表示这三种菌的增殖速度与氧气浓度之间的关系，请据图回答：(1)乙图中a、b、c三条曲线依次表示甲图_号试管中微生物在不同氧气浓度中的增殖速度。(2)研究发现，青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用。如果培养基中混杂了这三类微生物，请设计实验，利用改变培养基成分等培养条件，将酵母菌和硝化细菌分离出来。主要步骤：a分别配制不含_的培养基(A)和加入_的培养基(B)，分别灭菌。b分别接
6、种混合液放在适宜条件下培养。c观察结果。结果：在A培养基上生存的是_，在B培养基上生存的是_。(3)微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是_。(4)若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_。11根据有关微生物的知识，分析回答问题：(1)当水体过于纯净时，硝化细菌会形成休眠体，这种休眠体被称为_。(2)对于混有硝化细菌、蓝细菌和大肠杆菌的悬浮液，可利用选择培养基进行微生物筛选。筛选硝化细菌的培养基成分包括_(供选：葡萄糖、纤维素、牛肉膏、(NH4)2SO4、KNO3、无机盐、琼脂、伊红美蓝染料、H2O)，制备培养基时，灭菌与调pH的先后顺序是_。(3)如利用上述培养基筛选
7、大肠杆菌菌落，则应另外添加的成分是_，菌落特征为_。(4)将采自养殖池中的水样1 mL稀释100倍，然后吸取稀释后的水样1 mL，接种于上述硝化细菌选择培养基上培养，接种所使用的工具是_。一段时间后观察菌落并计数，实验重复三次结果如图所示。该养殖池每毫升水含有硝化细菌_个。12(2013四川高考)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。(1)图甲中，过程需要的酶有_。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以_作为唯一碳源。、过程需重复几次，目的是_。(2)某同学尝试过程的操作，其中一个平板经培养后
8、的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_；推测该同学接种时可能的操作失误是_。(3)以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种_菌的发酵罐需要先排气，其原因是_。(4)用凝胶色谱法分离淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较_。答 案1选B灭菌是指杀灭物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，消毒只能杀死部分微生物，不能杀死芽孢和孢子。2选A直接计数法是利用特定的计数板，在显微镜下计算一定容积量样品中微生物的数量，不能区分死菌与活菌；质量法是用于微生物生长测定的一种方法，有湿重法和干重法，也可以通过测蛋白质和DNA含量反映细胞的物质质量；比浊法是在一定
9、范围内，悬液中细胞浓度与浑浊度成正比，即与光密度成正比，菌越多，光密度越大；活菌在适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落，此法又称活菌计数法，可采用稀释涂布平板法接种。3选A经选择培养后，需经稀释后才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。4选C分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要有碳源，且尿素作为唯一的氮源，不能添加硝酸盐。5选C微生物在固体培养基上生长，可以形成肉眼可见的菌落；培养不同的微生物，所需配方存在差异；培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素。6选A使用液体选择培养基培养纤维素分解菌，一方面可以获得大量纤维素分解菌，另一方面便于稀释涂布平板。纤维素分解菌也可以在固体培养基上生
10、长；鉴别纤维素分解菌使用的是固体培养基。7选A基因突变是不定向的，紫外线处理后再进行筛选有可能获得脂肪酶活性更高的菌株。8选D牛肉膏为微生物提供碳源、氮源、维生素以及磷酸盐等，其中磷酸盐属于无机盐。9(1)4葡萄糖尿素(2)固体选择(3)该培养基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖(4)在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高酚红红10(1)3、2、1(2)有机碳源青霉素硝化细菌酵母菌(3)防止杂菌污染(无菌技术)(4)稀释涂布平板法11(1)芽孢(2)(NH4)2SO4、无机盐、琼脂、H2O先调pH再灭菌(3)葡萄糖、伊红美蓝染料呈现黑色(4)涂布器80012(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶淀粉进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌(2)稀释涂布平板法涂布不均匀(3)工程酵母工程酵母菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，导致酒精发酵产生CO2的速率更快(4)小
