1、高考总复习 RJ版生物 高考总复习 RJ版生物 高考总复习 RJ版生物 1微生物的利用：(1)微生物的分离和培养。(2)某种微生物数量的测定。(3)培养基对微生物的选择作用。(4)利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。2酶的应用：(1)酶在食品制造和洗涤等方面的应用。(2)制备和应用固定化酶。对应学生用书188页高考总复习 RJ版生物 3生物技术在食品加工及其他方面的应用：(1)从生物材料中提取某些特定的成分。(2)运用发酵加工食品的基本方法。(3)植物的组织培养。(4)蛋白质的提取和分离。(5)PCR技术的基本操作和应用。4.酶的应用与生产生活联系密切，需要掌握相关实
2、验设计的原理。5.果酒、果醋、腐乳的制作常作为背景材料，与微生物的培养应用等知识一起考查，需要我们注意相关知识间的联系，把握生产实践中常用微生物的营养与代谢关系、发酵条件的控制、相应的实验操作要领等。高考总复习 RJ版生物 对应学生用书188页一、微生物的培养高考总复习 RJ版生物 高考总复习 RJ版生物 高考总复习 RJ版生物 高考总复习 RJ版生物 二、微生物的应用高考总复习 RJ版生物 高考总复习 RJ版生物 自主核对：一、营养物质 生长繁殖 碳源 氮源 特殊营养物质 氧气 温和 有害的微生物 巴氏消毒法 所有的微生物 灼烧 干热 高压蒸汽 接种环、涂布器 平板划线 稀释涂布平板 酒精灯
3、火焰 固体斜面 菌落 4 不长 污染 甘油管藏 20二、选择培养基 尿素 显微镜直接计数 M 被测试的条件 非测试因素 纤维素 CMCNa 微生物 倒平板 发酵产纤维素酶 葡萄糖高考总复习 RJ版生物 1清毒和灭菌有何区别？2选择培养基和鉴别培养基有何区别？高考总复习 RJ版生物 考点1 微生物的实验室培养1培养基的种类(1)按物理性质分类对应学生用书189页培养基种类特点用途液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂(如琼脂)微生物分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏高考总复习 RJ版生物(2)按功能分类种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据某些微生物对某些物质的抗性而
4、设计从众多微生物中分离所需的微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基培养基中加入某种试剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别不同种类的微生物伊红美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌高考总复习 RJ版生物 2.培养基的配制原则和营养构成(2)培养基的营养构成各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。高考总复习 RJ版生物 不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。3配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项(1)步骤：计算称量溶化灭菌倒平板(2)注意事项倒平板的温度一般50左右适宜，温度过高会
5、烫手，过低培养基又会凝固。平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。高考总复习 RJ版生物 4纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。(2)方法：平板划线法、稀释涂布平板法。(3)平板划线操作的注意事项第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。划线时最后一区域不要与第一区域相连。划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。高考总复习 RJ版生物 重要考点提示1自养微生物和异养微生物的营养
6、比较营养类型碳源氮源生长因子自养型微生物CO2、NaHCO3等含碳无机物NH3、铵盐、硝酸盐等一般不需要异养型微生物糖类、脂肪酸等铵盐、硝酸盐、蛋白质等有些微生物需要高考总复习 RJ版生物 2.划分依据：自养微生物与异养微生物类型划分的主要依据是能否以无机碳作为生长的主要或惟一碳源，而与氮源无关。自养微生物以CO2或碳酸盐为惟一碳源进行代谢生长；异养微生物必须以有机物作为碳源进行代谢生长。3自养微生物的能源利用光能，如蓝藻等。依靠物质氧化过程中释放的能量，如硝化细菌，能利用NH3氧化过程中释放的化学能，NH3既作为氮源，又作为能源。高考总复习 RJ版生物 重要考点提示4异养微生物的能源主要来源
7、于有机物的氧化分解，碳源不仅为异养微生物提供构成细胞的物质，而且提供完成整个生命活动所需的能量。5微生物的类型营养类型主要(或惟一)碳源能源代表菌光能自养型CO2光能蓝藻光能异养型有机物光能红螺菌化能自养型CO2NH3硝化细菌化能异养型有机物有机物大肠杆菌高考总复习 RJ版生物 例1 培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是()化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线消毒 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法A BC D答案 A高考总复习 RJ版生物 例2 有关稀释涂布平板法的叙述中，错误的是()A首先将菌液进行一系列的梯度稀释B然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体
8、培养基的表面C适宜条件下培养D结果都可在培养基表面形成单个的菌落答案 D高考总复习 RJ版生物 例3(2010青岛质检)微生物与人类关系密切。虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的。请回答下列问题。(1)培养微生物的培养基配方中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。从土壤中分离分解尿素的细菌时，培养基中加的惟一氮源为_，这种培养基称为_培养基。(2)在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，为什么要将平板倒置？_。高考总复习 RJ版生物(3)微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和_法。在用平板划线法接种时，为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环_。在
9、划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？_。高考总复习 RJ版生物 解析 从土壤中分离出分解尿素的细菌，需用选择性培养基，惟一的氮源是尿素。接种过程中，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法两种方法。每次划线前都要灼烧接种环的目的是杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落。操作的第一步和最后一步需灼烧接种环的目的分别是防止接种环上有其他微生物而污染培养基、以免菌种对环境造成污染和感染操作者。高考总复习 RJ版生物 答案(1)尿素 选择(2)皿盖上会凝有水珠，防止水珠落入培养皿造成污染，还可使培养基表面的水分更好地挥发(
10、3)稀释涂布平板 第一步灼烧接种环是防止接种环上有其他微生物而污染培养基。每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落 划线结束后仍要灼烧接种环，以免菌种对环境造成污染和感染操作者高考总复习 RJ版生物 考点2 微生物的分离与计数1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验原理(1)筛选菌株：提供有利于目的菌株生长的条件(如营养、温度、pH等)，同时抑制其他微生物的生长，常用选择培养基筛选。(2)统计菌落数目方法：稀释涂布平板法统计活菌数(显微镜直接计数法不能排除死菌)。高考总复习 RJ版生物 计数规则选择
11、菌落数在30300的平板计数若某两个或多个稀释浓度下获得的菌 落数均符合条件时，再看两者菌落数 的比值，若小于2，则取两者的平均 值；若大于2，则取小者计算方法：每克样品中的菌落数(CV)M。C：某一稀释浓度下平板上生长的平均菌落数；V：涂布平板所用稀释液的体积；M：稀释倍数。高考总复习 RJ版生物(3)设置对照：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。实验流程土壤取样：从距地表约38 cm的土壤层取样样品稀释测细菌数：选用104、105、106倍稀释测放线菌数：选用103、104、105倍稀释测真菌数：选用102、103、104倍稀释培养与观察细菌：3037；12 d放
12、线菌：2528；57 d霉菌：2528；34 d高考总复习 RJ版生物 2.分解纤维素的微生物的分离实验原理透明圈高考总复习 RJ版生物 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。实验流程土壤取样：富含纤维素的环境选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量梯度稀释高考总复习 RJ版生物 涂布平板：将样品涂布于鉴别含刚果红CR的纤维素分解菌的培养基(固体)挑选产生透明圈的菌落：产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈高考总复习 RJ版生物 重要考点提示两种常用刚果红(CR)染色法的比较方法一方法二过程培养基长出菌落覆盖CR(1 mg/mL)1015 min倒出CR加入NaCl溶液(1 mol
13、/L)15 min倒掉NaCl溶液产生透明圈配制CR(10 mg/mL)溶液灭菌按照1mL CR溶液/200 mL培养基比例混匀倒平板培养透明圈优点显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作简便，不存在菌落的混杂问题缺点操作繁琐，加入刚果红会使菌落之间发生混杂由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含淀粉类物质，可能使产生淀粉酶的微生物也形成透明圈，即假阳性反应有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显透明圈，与纤维素分解菌不易区分高考总复习 RJ版生物 例4(2009安徽高考)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是()A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养
14、基，经高温、高压灭菌后倒平板D 取 104、105、106 倍 的 土 壤 稀 释 液 和 无 菌 水 各0.1mL，分别涂布于各组平板上C将实验组和对照组平板倒置，37恒温培养2448小时D确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数高考总复习 RJ版生物 解析 配制培养基时要用蒸馏水，而不能用自来水，防止杂菌污染；培养微生物时要选择适宜的温度37，持续时间2448小时；土壤中微生物的量相对稳定，由于实验原因，很容易引起数量的剧烈变化，所以要选择30300左右进行计数。答案 D高考总复习 RJ版生物 例5(2010聊城模拟)下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验，完
15、成下列问题：(1)实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层土制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基，盛9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。(2)方法步骤：倒平板：分别将无菌培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，操作过程应在火焰旁。高考总复习 RJ版生物 制备土壤稀释液：取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1mL，转至9 mL的无菌水
16、的大试管中，依次稀释到107稀释度。涂布：按照由107103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布_个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布1个平板。培养：放入恒温箱内，在2830下培养34天。细菌的计数：当菌落数目稳定时，选取菌落数在_的平板进行计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌落数是_。(稀释度是105)(3)预测结果：相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨培养基平板上的菌落数应多于无氮培养基上的数目。请说明原因。高考总复习 RJ版生物 解析 分离自生固氮微生物，应用无氮培养基，因为氮是生物必需的元素，只有具有固氮能力的自生固氮微生物才能在无氮培养基上生长。而
17、营养全面的牛肉膏蛋白胨培养基则允许多种微生物生长。答案(2)3 30300 5107(3)无氮培养基上能生存繁殖的仅是土壤中的固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存。高考总复习 RJ版生物 例题 关于灭菌和消毒的理解，不正确的是()A灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B消毒和灭菌实质上是相同的C接种环用烧灼法灭菌D常用的灭菌方法有加热法、紫外线法、化学药品法错因分析 将消毒和灭菌混为一谈对应学生用书191页高考总复习 RJ版生物 解析 酒精消毒时，体积分数为70%的酒精杀菌效果最好。原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过
18、低，杀菌力减弱。答案 D条件结果常用的方法消毒 较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药剂消毒法灭菌 强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌高考总复习 RJ版生物【典例1】(2009宁夏高考)(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行_(消毒、灭菌)；操作者的双手需
19、进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_。对应学生用书191页高考总复习 RJ版生物(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。高考总复习 RJ版生物【解析】微生物的培养需要一定的营养条件，还需要一定的
20、环境条件，如适宜的温度、适宜的pH、适宜的渗透压等。细菌体积小、结构简单、容易培养、生长周期较短、繁殖迅速。微生物培养中，为防止杂菌污染，常对培养基和培养器皿进行灭菌，对操作者的双手进行清洗和消毒。灭菌是指把物体上所有的微生物(包括细菌芽孢在内)全部杀死的方法，通常用物理方法来达到灭菌的目的，消毒是指杀死病原微生物，但不一定能杀死细菌芽孢的方法，通常用化学的方法来达到消毒的作用。紫外线辐射能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。高考总复习 RJ版生物 稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数时，要使估计值接近实际值，应严格要求操作，多次重复实验，保证样品的稀释比例。对获得的菌种进行鉴定常根据微生物的
21、菌落的特点来判断。培养大肠杆菌时，接种前需要检测培养基是否被污染，需要将培养基放在适宜的条件下培养，然后观察培养是否有微生物的出现。【答案】(1)温度 酸碱度 易培养 生活周期短(2)灭菌 消毒 损伤DNA的结构(3)比例合适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌高考总复习 RJ版生物【典例2】(2010全国高考)下列是与微生物培养有关的问题，请回答：(1)某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡 萄 糖、尿 素、琼 脂 和 蒸 馏 水，其 中 凝 固 剂 是_，碳源是_，氮源是_。已知只有能
22、合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于_培养基。按照化学成分分类，该培养基属于_培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于_。高考总复习 RJ版生物(2)将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，可得到细菌的_曲线。该曲线中以 菌 体 数 目 的 对 数 作 为 纵 坐 标 的 原 因 是_。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在_期取材；在生产中，常搜集培养至_期的细菌用于次级代谢产物的提取。高考总复习 RJ版生物【解析】(1)琼脂是固体培养基的凝固剂。为微生物提供的营养物质中，
23、含有碳元素的是葡萄糖，含有氮元素的是尿素。该培养基中只有能合成脲酶的细菌才能生长，故为选择培养基。该培养基中含有葡萄糖，因而适合进行异养型微生物的培养。(2)细菌一般以二分裂方式增殖。在适宜条件下，细菌数目呈指数形式增加。细菌的生长速率随着时间的推移发生有规律的变化，如果以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标作图，可以得到反映细菌生长规律的曲线。在细菌生长的对数期可获得形态和生理特征一致的菌体，细菌在稳定期会产生大量的次级代谢产物。高考总复习 RJ版生物【答案】(1)琼脂 葡萄糖 尿素 选择 合成 异养型(2)群体生长 培养的细菌以指数形式增殖，取对数便于反映细菌群体的生长规律 对数 稳定感谢您的关注！
