1、微专题1 基因工程1.基因工程利用某目的基因（图甲）和P1噬菌体载体（图乙）构建重组DNA。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是Bgl、EcoR I和Sau3AI。下列分析错误的是（） A.构建重组DNA时，可用Bgl和Sau3AI切割目的基因和Pl噬菌体载体 B构建重组DNA时，可用EcoR I和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌体载体 C.图乙中的P1 噬菌体载体只用EcoR I切割后，含有2个游离的磷酸基团 D用EcoR I切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA2. PU和GATA为两种蛋白质，是细胞内可以识别基因的特定序列，继而激活相关基因的表达，由此
2、推测，PU和GATA的结构更接近下列蛋白质中的（） A.限制酶 B蛋白酶 C.淀粉酶 D. DNA连接酶3目的基因与运载体结合所需的条件是（） 同一种限制酶具有标记基因的质粒RNA聚合酶目的基因DNA连接酶四种脱氧核苷酸 ATP A B C. D.4下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（） A目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物 B.限制性核酸内切酶、DNA连接酶及载体是基因工程中常用的工具酶 C.若检测培育的抗虫棉花是否成功，可用相应的病菌侵染棉花植株 D载体上的抗性基因有利于检测目的基因是否插入到受体细胞的染色体上5限制性内切酶的特点是（） A.只能识别GAATTC序列 B.识别特
3、定的核苷酸序列和具有特定的酶切位点 C.识别黏性末端 D切割质粒DNA的标记基因6.下列关于质粒的叙述，正确的是（） A质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B.质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状DNA分子 C.质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制 D细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的7.基因工程技术也称DNA重组技术，其实施必须具备的4个必要条件是（） A.工具酶、目的基因、载体、受体细胞 B重组DNA,RNA聚合酶、限制性内切酶、DNA连接酶 C.模板DNA,信使RNA、质粒、受体细胞 D.目的基因、限制性内切酶、载体、受体细胞8.下图为某种质粒表达载体简
4、图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI,BamHI的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因。tetR为四环素抗性基因,P为启动子,T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI,BamHI在内的多种酶的酶切位点。据图回答：（1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有 、 、 三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行 (2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接
5、产物是 ；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是 ，其合成的产物是 (4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是 微专题1 基因工程1解析：选D。据图可知，目的基因两侧和载体上都有三种限制酶的切割位点，但Bgl和Sau3A I可以同时使用，故A正确；由于目的基因两侧和载体上都有三种限制酶的切割位点,EcoR I可以与Bgl 或 Sau3A I同时使用，故B正确；若图乙中的P1 噬菌体载体只用EcoRI 切割，可形成1个切口，含有2个游离的磷酸基团，故C正确；此
6、时，可能形成目的基因-目的基因、目的基因-载体、载体-载体至少3种重组DNA，故D错误。2.解析：选A。由于PU和GATA可以识别基因的特定序列，从这方面来分析，其结构应该接近限制酶，因为限制酶也能识别基因中特定的脱氧核苷酸序列，故A正确。3解析：选D。目的基因与运载体结合需要用同一种限制酶切割形成相同的黏性末端，然后用DNA连接酶将两者连接，形成重组质粒；常用的运载体是质粒，质粒必须符合一定的条件：有复制原点、有多个限制酶切割位点、有抗生素抗性基因或荧光标记基因等；目的基因与运载体的结合需要消耗能量，直接来源是ATP。综上所述，故D正确。4.解析：选A。基因工程中目的基因和受体细胞均可来自动
7、、植物或微生物，故A正确；常用的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶，载体是基因工程的工具，不是工具酶，故B错误；若检测抗虫棉是否成功，可以让害虫进食棉花的叶片，观察害虫是否死亡，不是用病菌侵染，故C错误；载体上的抗性基因主要是有利于筛选含重组DNA的细胞，不能确定是否在染色体上，故D错误。5解析：选B。限制性内切酶有很多种类，有的能识别序列GAATTC,有的能识别其他序列，A错。但都能识别特定的序列，B对。有的能识别黏性末端，有的识别平末端，C错。实验中，一般不选择切割标记基因的酶，D错。6.解析：选B。质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA
8、分子，不属于细胞器，故A错误，B正确；质粒是安全的，对受体细胞无害，并能在宿主细胞中稳定存在并复制，故C、D错误。7.解析：选A。基因工程是按照人们的意愿，把一种生物的个别基因（目的基因）复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞（受体细胞）里，定向地改造生物的遗传性状。基因操作的工具酶是限制性内切酶和DNA连接酶，基因进入受体细胞的运输工具是载体，故A正确。8.解析：用同一种限制酶分别切质粒和含有目的基因的DNA。会切出相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接后，会出现目的基因一载体连接物，载体一载体连接物、目的基因一目的基因连接物三种连接物，再通过筛选才能够获得目的基因一载体连接物。用E
9、coRI酶切时，切点在tetR四环素抗性基因中，破坏了质粒中的四环素抗性基因，载体一载体连接物能够使tetR 四环素抗性基因恢复完整，基因能够表达，含有载体一载体连接物宿主细胞细胞接种到含四环素的培养基中，能够正常生长。ampR 为青霉素抗性基因，存在于质粒中，在构建重组质粒时，并没有被破坏，所以含有目的基因一载体连接物和载体一载体连接物的宿主细胞接种到青霉素的培养基中，能正常生长。P启动子是基因结构中RNA聚合酶的识别和结合位点，其作用是催化以DNA的一条链为模板，转录形成RNA的过程。用EcoRI和BamHI对目的基因和质粒表达载体进行酶切，切出的末端不同，从而防止任意连接。 答案：（1）目的基因一载体连接物 载体一载体连接物 目的基因一目的基因连接物分离纯化（其他合理答案也给分） （2）雷区体一载体连接物 目的基因一载体连接物、载体一载体连接物 (3)启动子 mRNA (4)EcoRI和BamHI
