1、专题综合测试(二)时间：90分钟满分：100分一、选择题(每小题2分，共40分)1关于培养基的配制说法不正确的是()A在配制培养乳酸杆菌的培养基时，需加入维生素B微生物的适应性强，配制培养基时可以不考虑pHC虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐D配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例答案B解析乳酸杆菌自身不能合成维生素，而维生素又是维持其生命活动不可缺少的，故需在培养基中添加，A正确；pH影响微生物的生长和代谢，配制培养基时pH一定要适宜，B错误；微生物也是由C、H、O、N、P、S等元素组成，这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物，可归纳为碳源、氮源
2、、生长因子、水、无机盐等，但配制时要注意各种养分的浓度和比例，C、D正确。2下列关于培养基的叙述中，正确的是()A微生物在液体培养基表面生长可以形成肉眼可见的菌落B培养霉菌与细菌时培养基的pH基本一致C一般培养基都需加入碳源、氮源、无机盐和水D蛋白胨只能为微生物提供碳源和维生素答案C解析微生物在固体培养基表面生长可以形成肉眼可见的菌落，A错误；培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，B错误；培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等成分，C正确；蛋白胨可为微生物提供氮源、碳源和维生素，D错误。3下列关于细菌的叙述，错误的是()A硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质
3、B某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物C生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质D含伊红美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌答案D解析硝化细菌可以利用氧化氨释放的能量来合成有机物，氨含有氮元素可以提供氮源，A正确；光合细菌可以利用光能进行光合作用，固定CO2合成有机物，B正确；某些微生物不能合成一些生长所必需的物质，必须从外界摄取这些营养物质，C正确；含伊红美蓝试剂的培养基可以用来鉴别牛奶中的大肠杆菌，如果菌落呈黑色，并带有金属光泽，说明牛奶中含有大肠杆菌，D错误。4下表表示在不同培养基中某细菌的生长繁殖情况(A、B、C、H、I、J、K、M为培养基的成分，“”表示生长，“
4、”表示不生长)，请分析下列哪种物质细菌不能合成()培养基成分A、B、CA、B、C、I、MA、B、C、H、KA、B、C M、JA、B、C、I、KA、B、C、H、JA、B、C、K、M生长状态AHBICKDM答案C解析比较不同培养基的添加物，凡添加了物质K的培养基，细菌都能生长，反之则不能生长，说明物质K是细菌不能合成的，C正确。5下列与微生物培养有关的说法，不正确的是()A高压蒸汽灭菌的原理是高温破坏了细胞内的蛋白质，影响其生命活动B培养基在50 时搁置斜面以及将平板倒置放入培养箱中培养都与消毒灭菌无关C在微生物培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件D每个菌落由大量的各种细
5、菌组成，菌落的特征可以作为菌种鉴定的重要依据答案D解析菌落内部为同种细菌，菌落的特征可以作为菌种鉴定的重要依据，D错误；高压蒸汽灭菌的原理是高温破坏微生物体内蛋白质的空间结构，从而影响其生命活动，达到灭菌的目的，A正确；培养基在50 时搁置斜面以及将平板倒置放入培养箱中培养均与消毒灭菌无关，B正确；微生物培养过程中，除营养条件要满足微生物需要外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件是否适宜，C正确。6下面关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述，正确的是()A只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素B筛选分解尿素的细菌时应以尿素作为培养基中的唯一营养物质C统计样品中的活菌数目时一般用平板划线法接种D
6、在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则表明筛选到了分解尿素的细菌答案A解析只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，A正确；筛选分解尿素的细菌的实验中，采用的是以尿素为唯一氮源的培养基，B错误；统计样品中的活菌数目时一般用稀释涂布平板法接种，C错误；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，则能初步鉴定该种细菌能够分解尿素，D错误。7下列有关微生物培养与应用的说法正确的是()A天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和
7、纯化大肠杆菌两个阶段D分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源答案C解析天然培养基是成分不明确的培养基，并不是不需加工配制的培养基，A错误；实验者的双手需进行消毒处理，B错误；分离分解尿素的细菌时，尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源，D错误。8下列在微生物的实验室培养过程中，关于平板划线操作的叙述正确的是()A已灭菌的接种环、培养皿在操作过程中不再灭菌B打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞好棉塞C将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D最后应将平板倒置，放入培养箱中培养答案D解析已灭菌的接种环在操作过程中仍要灭菌，A错误；打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌
8、，取出菌种后含菌种的试管需要通过火焰灭菌后再塞好棉塞，B错误；将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线后盖上皿盖，以防止空气中杂菌混入，C错误；为防止皿盖上的冷凝水落入培养皿造成污染，应将平板倒置，放入恒温培养箱中培养，D正确。9鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成的，这些物质是()A指示剂或化学药品B青霉素或琼脂C高浓度食盐D维生素或指示剂答案A解析在加入某种指示剂或化学药品后，某些微生物会与特定的化学物质发生特定的化学反应，而表现出特有的特征，我们可以根据这些特征去判断属于哪种微生物，A正确。10在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前，通常要进行
9、选择培养，其目的是()A分离纤维素分解菌B加快纤维素分解菌的生长速度C使纤维素分解菌均匀地分布在稀释液中D增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离得到所需要的微生物答案D解析选择培养基中富含纤维素粉，主要适合于能产生纤维素酶的纤维素分解菌的生长，所以选择培养的目的主要是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离得到所需要的微生物，D正确。11用培养液培养三种细菌，让它们在三支不同的试管中生长，下图显示了细菌的生长层，如果此时往三支试管中通入氧气，则细菌的繁殖速度将是表中的()选项号试管号试管号试管A加快减慢不变B减慢加快加快C加快减慢减慢D减慢加快减慢答案B解析号试管内的细菌在试管底
10、部为厌氧菌，号试管内的细菌均匀分布为兼性厌氧菌，号试管内的细菌在试管上部为好氧菌。向试管内通入氧气，能够促进兼性厌氧菌和好氧菌的代谢，抑制厌氧菌的繁殖，B正确。12分离土壤中分解尿素的细菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是()A制备浸出液的土壤取自土壤的表层B涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌C牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源D接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒答案C解析制备浸出液的土壤应该取距地表约38 cm的土壤层，取自土壤的表层与获得纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不是最大，A不符合题意；涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌可能会造成污染，与获得纯化的尿素分解菌
11、的单菌落有关但影响不是最大，B不符合题意；该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基，该操作对实验影响最大，C符合题意；接种操作者的双手未用酒精进行消毒，可能会造成污染，与获得纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不是最大，D不符合题意。13某同学进行纤维素分解菌的分离与鉴别，下列能说明实验操作规范的是()A未接种的培养基上长出了菌落B选择培养结束后，选择培养基澄清C在长出菌落的培养基上，覆盖CR溶液后，没有出现透明圈D在添加有CR溶液的培养基上，菌落周围出现透明圈答案D解析未接种的培养基上长出了菌落，说明培养基已被杂菌污染，A错误；选择培养后，由于培养基中微生物数量增多，故培养基
12、应变得浑浊，培养基澄清说明微生物数量太少，B错误；不管是在长出菌落的培养基上覆盖CR溶液，还是在添加有CR溶液的培养基上接种，如果有分解纤维素的微生物存在，产生纤维素酶的菌落周围都应出现透明圈，C错误，D正确。14菌落特征常作为鉴定微生物种类的依据。下列关于菌落的叙述，正确的是()A一个菌落就是单个微生物在液体培养基上迅速生长繁殖，并以此母细胞为中心形成的子细胞团B不同种类的微生物其菌落特征完全不一样C同一种类的微生物其菌落特征完全一样D不同种类的微生物所表现出来的菌落差异是个体细胞形态差异的反映答案D解析理解菌落的概念、特征应注意以下几点：菌落是单个细菌大量繁殖形成的子细胞群体；在固体培养基
13、上繁殖形成的；肉眼可见；不同种类的细菌形成的菌落特征不同。不同种类微生物的菌落特征各有特点，但彼此之间存在一定的相似性，同种微生物的菌落特征受培养时间、营养物质的含量与种类等影响也会有所差异。因此，A、B、C错误，D正确。15下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是()A微生物培养前，需对培养基进行消毒B测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源答案A解析微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒，A错误；测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法，即稀释涂布平板法，B正确；分离土壤中不同的微生
14、物，要采用不同的稀释度以便能从中选择出菌落数在30300间的平板进行计数，C正确；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源，D正确。16如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是()A步骤倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置B步骤将接种环在火焰上灼烧后迅速沾取菌液后进行平板划线C步骤通过连续划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落D步骤培养箱培养后可用来对X细菌进行计数答案C解析步骤倒平板操作时，倒好后适当冷却，然后将其倒过来放置，A错误；步骤将接种环在火焰上灼烧后在火焰旁冷却，然后再沾取菌液进行平板划线，B错误；步骤通过连续划线，使接种物逐渐稀释，培养后出
15、现单个菌落，C正确；步骤培养箱培养后可用来对X细菌进行分离纯化，得到单个菌落，图示接种方法为平板划线法，不能用于计数，D错误。17焦化厂活性污泥中富含难降解的有机物苯甲酰肼，是当前焦化行业环保治理的难点。某同学通过查阅资料发现可通过微生物降解方法处理焦化厂污染物。下列有关分析错误的是()A应该从农田土壤中筛选目的菌B配制以苯甲酰肼作为唯一碳源的选择培养基进行筛选C利用平板划线法可以对初步筛选出的目的菌进行纯化D逐步提高培养基中苯甲酰肼的浓度可以得到能高效降解污染物的优质菌株答案A解析焦化厂活性污泥中富含难降解的有机物苯甲酰肼，应从焦化厂活性污泥中筛选能降解苯甲酰肼的细菌，A错误。18若将某种细
16、菌置于含有营养物质的物体上，它会繁殖并形成细胞群。用什么适当的实验可以用来检验两种抗生素的杀菌效用()答案C解析要检验抗生素的杀菌作用需要设置对照实验。检验抗生素甲的杀菌作用，可设置不加抗生素甲培养基培养细菌为空白对照，加抗生素甲的作为实验组，适宜条件下培养；同理也可检验抗生素乙的杀菌效果，C正确。19若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起，采用下列哪组培养基可将它们分离()A加食盐的培养基和蛋白胨培养基B伊红美蓝培养基和无氮培养基C斜面培养基和液体培养基D加青霉素的培养基和液体培养基答案B解析大肠杆菌和圆褐固氮菌都不能在加食盐的培养基上生存，都能在蛋白胨培养基上生存，不能将它们分离，A错误；伊红美
17、蓝培养基能鉴定大肠杆菌，圆褐固氮菌是自生固氮微生物，可以在缺氮培养基上生存，B正确；筛选分离微生物通常使用固体培养基，而液体培养基一般应用于发酵，与两种细菌的分离没有关系，C错误；大肠杆菌和圆褐固氮菌都是原核生物，对青霉素敏感，所以都不能在含青霉素的培养基上生存，D错误。20下列关于微生物培养和利用的叙述，不正确的是()A利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数B接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少答案A解析利用稀释涂布平板法可以分离微生物，也可以对微生物
18、进行计数，A错误；接种时连续划线可以将菌体分散，最后得到单个菌体细胞，经过培养可以得到单个菌落，B正确；以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌，C正确；在泡菜的腌制过程中，开始时亚硝酸盐含量增加，一段时间后亚硝酸盐含量开始下降，D正确。二、非选择题(每小题12分，共60分)21请回答下列有关微生物的一些问题：(1)微生物的分布：微生物主要分布在富含_的土壤表层。(2)微生物实验中的消毒和灭菌：在微生物培养中，对培养基常用_法进行灭菌。对实验室可用_进行消毒。(3)微生物的接种：虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、_、碳源、氮源。生物接种的方法很多，最常用的是_和_。(
19、4)微生物的计数：根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出的菌落数目往往比实际的活菌数目_，原因是_。(5)微生物的鉴定：检测尿素分解菌的存在与否，需以_为唯一氮源，检测纤维素分解菌时需以_为唯一碳源。答案(1)有机质(2)高压蒸汽灭菌紫外线或化学药物(3)无机盐平板划线法稀释涂布平板法(4)低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(5)尿素纤维素解析(1)微生物主要分布在有机质丰富的土壤表层。(2)在微生物培养中，对培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(3)微生物接种最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、无机盐、碳源、氮源。(4)根
20、据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出的菌落数目往往比实际的活菌数目低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。(5)为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的选择培养基中加入酚红指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变为红色。检测纤维素分解菌时需以纤维素为唯一碳源。22有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题：(1)培养基中加入的化合物A是_，为微生物的生长提供_，这种培养基从
21、功能上进行分类，应属于_培养基。(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，还应向培养基中加入_。加入该物质后，培养基应属于_培养基。(3)若用平板划线法获得纯净的菌株，请回答：在接种时，为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？ _。在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？_。除此之外，还可用_法来获得纯净的菌株。答案(1)纤维素碳源选择(2)刚果红鉴别(3)第一步灼烧接种环是为了防止接种环上有其他微生物而污染培养基；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自于上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个细胞形成的菌落划线结束后仍要
22、灼烧接种环，以免菌种污染环境和感染操作者稀释涂布平板解析(1)若筛选到能利用纤维素的微生物，培养基中加入的化合物A为纤维素，制备只以纤维素为碳源的选择培养基。(2)在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。(3)第一步灼烧接种环是为了防止接种环上有其他微生物而污染培养基；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个细胞形成的菌落；划线结束后仍要灼烧接种环，以免菌种污染环境和感染操作者；除
23、此之外，还可利用稀释涂布平板法获得纯净的菌株。23回答与大肠杆菌有关的问题：(1)某同学将分离得到的菌落接种到含有_的培养基中，形成的菌落呈_色，则表明可能存在大肠杆菌。从功能角度分析此培养基属于_培养基。(2)稀释涂布平板法测得的活菌数目较实际值_(填“高”或“低”)，原因是_。(3)某同学对分离得到的大肠杆菌进行计数时，吸取稀释106倍的菌液各0.1 mL，分别涂布在三个平板上，一段时间后形成的菌落数依次是118、116、114个，最终求得原菌液中大肠杆菌浓度为_个/L。(4)为探究温度对培养液中大肠杆菌种群数量的影响，请简述实验思路：_。答案(1)伊红美蓝黑鉴别(2)低当两个或多个细胞连
24、在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(3)1.161012(4)将等量且适量的大肠杆菌接种到若干相同条件下的培养液中，随机分成若干组并编号，各组放到不同的温度环境中培养一段时间，保证其他变量相同且适宜，在显微镜下用血细胞计数板统计每组大肠杆菌数目并求平均值解析(1)在培养基中添加伊红美蓝，若形成的菌落呈黑色，则表明可能存在大肠杆菌。从功能角度分析此培养基为鉴别培养基。(2)当两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到的只是一个菌落，用稀释涂布平板法统计的菌落数比实际数值要偏低。(3)结合题干信息可知，原菌液中大肠杆菌的浓度为(118116114)30.11061031.161012(个/L)。(
25、4)要探究温度对培养液中大肠杆菌数量的影响，实验的自变量应为温度，将大肠杆菌接种后置于不同温度条件下进行培养，其他无关变量相同且适宜，在显微镜下用血细胞计数板进行计数。24氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。表1培养基的组成(1)配制号固体培养基时，除添加号液体培养基成分外，还应添加1%的_。(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是_。(3)从用途上来说，号培养基和号培养基分别属于_培养基和_培养基。在号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是_。(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1
26、的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为_。(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的号培养基中培养，得到生长曲线(如图2)。从图2可知，SP1菌在_培养条件下最早停止生长，其原因是_。答案(1)琼脂(2)先调pH，后灭菌(3)通用选择硝酸铵(4)芽孢(5)20 mg/L氯苯碳源最早耗尽解析(1)配制固体培养基时应在液体培养基的成分中再加入琼脂作为凝固剂。(2)在配制培养基时应先调节pH，后进行灭菌，防止灭菌后在调节pH的过程中污染培养基。(3)据表可知，培养基为牛肉膏蛋白胨培养基，包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子，适用于多种微生物的培养。培养基不加牛肉膏和蛋白胨，以氯苯为碳源，可以选择
27、出以氯苯为碳源的微生物，是选择培养基。(4)在营养缺乏、环境恶劣时，微生物可以形成休眠体芽孢，来度过不良环境。(5)据图2可知，SP1菌在20 mg/L氯苯培养条件下菌体数最早达到最大值，即最早停止生长，原因是在培养基中，氯苯是唯一碳源，由于20 mg/L氯苯培养条件下碳源最少，因此也最早被耗尽，使SP1菌停止生长。25塑料袋的自然分解需要20至1000年不等，由此造成的“白色污染”早已成为地球公害。加拿大一名叫丹尼尔伯德的高中生从土壤中找到了一类假单胞杆菌，能将聚乙烯塑料的降解过程缩短至3个月，而且分解产物只有水和二氧化碳，伯德也因此被誉为“塑料袋的克星”。以下是伯德寻找聚乙烯降解菌的大致过
28、程。请回答：(1)为避免杂菌污染培养物和环境，用于微生物培养的培养基接种前和完成实验后都要进行_；接种时要在_旁操作。(2)图中的“土壤样品”最可能取自_。“”表示对土壤悬浮液进行一系列的_，目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在号培养基表面形成单个_。(3)号培养基采用的接种方法为_。号培养基属于_培养基，其作用是使目的菌能“脱颖而出”，为证明号培养基的作用，常用方法是_。(4)使用号培养基的目的是使目的菌数目增多，培养基中必须包含水、无机盐、_等基本营养成分。从物理性质来看，号培养基中不能添加_。答案(1)(高压蒸汽)灭菌酒精灯火焰(2)垃圾场梯度稀释菌落(3)稀释涂布平板法选
29、择用相同菌种接种到牛肉膏蛋白胨培养基中，并在相同的适宜条件下培养，比较两培养基上的菌落数(4)碳源、氮源凝固剂(或琼脂)解析(1)为避免杂菌污染培养物和环境，需将培养基在接种前和完成实验后进行高压蒸汽灭菌。接种时，为避免周围空气中的杂菌污染，操作需在酒精灯火焰旁进行。(2)据题干信息，要寻找的目的菌是聚乙烯降解菌，聚乙烯塑料袋在垃圾场中较多，因此图中的土壤样品最可能来自垃圾场或其他塑料袋较多的地方。图中“”表示对土壤悬浮液进行一系列的梯度稀释，使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，接种到培养基上后能够形成单个的菌落。(3)号培养基上菌落比较分散，因此采用的接种方法是稀释涂布平板法。号培养基是用来筛选聚乙烯降解菌的，属于选择培养基。要证明选择培养基的作用，常用的方法是将同种菌种接种到牛肉膏蛋白胨培养基上进行比较。(4)号培养基是为了增加目的菌的数量，培养基中必须含水、无机盐、氮源和碳源等基本营养成分。增大目的菌的数量需用液体培养基，因此该培养基中不能添加凝固剂(或琼脂)。
