1、 基础全练1下列有关PCR原理的叙述，错误的是()A利用了DNA分子的热变性原理BDNA的合成方向总是从子链的3端向5端延伸CPCR过程需要用到DNA模板、2种引物、4种脱氧核苷酸和酶DTaq DNA聚合酶的特性是耐高温解析：PCR利用的是DNA分子的热变性原理，在80100 的温度范围内，DNA双螺旋结构解体，双链分开，当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又重新结合成双链，A正确；DNA的合成方向总是从子链的5端向3端延伸，B错误；PCR过程需要用到DNA模板、分别与两条模板链相结合的2种引物、4种脱氧核苷酸和耐高温的TaqDNA聚合酶，C、D正确。答案：B2在PCR过程中，双链DNA解
2、聚为单链、引物与单链结合以及形成新的子链所需要的大致温度依次是()A72 、50 、90 B90 、50 、72 C50 、72 、90 D50 、90 、72 解析：双链DNA的解旋，需要高温(一般需要90 左右)来破坏氢键。温度下降到50 左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，此过程为复性。温度上升到72 左右时，在DNA聚合酶的作用下，以四种脱氧核苷酸为原料合成新的DNA链，此过程为延伸。答案：B3如图表示PCR扩增的产物，请分析它是第几次循环的产物()A第一次 B第二次C第三次 D第四次解析：在PCR反应中，以引物为标记，第一次循环时，以加入的DNA为模板，两条DNA链可
3、分别由引物和引物与模板链结合并在DNA聚合酶的作用下延伸，所以形成的每个子DNA中只有一种引物；从第二次循环开始，上次产生的DNA分子又可作为模板参与反应，所以会形成DNA分子两端均含有引物的情况。因此题图中所出现的情况是第一次循环的产物。答案：A4如图表示DNA的变性和复性，下列相关说法正确的是()A由左向右的过程表示热(80100 )变性的过程B由右向左的过程为DNA双链迅速制冷复性C变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同D图中DNA片段共有4个游离的磷酸基团、4个3端解析：变性后的DNA在缓慢降温后才会复性；变性与在生物体内解旋过程的条件不同、实质相同；任一DNA片段都有两个游离的磷
4、酸基团(5端)和两个3端。答案：A5在PCR扩增的实验中，加入一种提取物(一种模板DNA片段)，但实验得到的产物中却有两种DNA。其原因可能是()A扩增时间过短BTaq DNA聚合酶发生变异C基因污染D温度过高解析：发生题中所述状况的原因是基因污染。答案：C6关于PCR技术的应用，错误的一项是()A古生物学、刑侦破案、DNA序列测定B诊断遗传疾病、基因克隆、古生物学CDNA序列测定、基因克隆、刑侦破案D诊断遗传疾病、合成核苷酸、DNA序列测定解析：PCR技术是体外扩增DNA的技术，用来在体外合成大量DNA，供各种研究或诊断需要。本技术以脱氧核苷酸作为原料，但这个过程无法合成核苷酸。答案：D7下
5、列有关PCR的描述，不正确的是()APCR技术的原理是DNA复制B用PCR技术扩增DNA是一个酶促反应，需要用到耐高温的解旋酶和DNA聚合酶C一个DNA片段经PCR扩增n次，可形成2n个DNA片段DPCR利用DNA的热变性来控制DNA的解聚与结合解析：PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它以极少量的DNA为模板，以四种脱氧核苷酸为原料，在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3端连接脱氧核苷酸，短时间内迅速复制上百万份的DNA。PCR利用DNA在不同温度下变性或复性的特性来解旋并结合引物，不需要解旋酶。答案：B8PCR反应的最大特点是具有较强的扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，
6、下列关于防止污染的办法不正确的是()A将样品的处理、PCR反应液的配制、PCR反应及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行B用移液器吸样时要慢，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换C所有的PCR试剂都应用大瓶分装，以减少重复加样次数，避免污染DPCR反应液应与样品及PCR产物分开保存，不应放于同一冰盒或同一冰箱中解析：PCR所用的缓冲液和酶等应分装成小份，并在20 储存。使用前，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化，故C错误。答案：C9PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，与细胞内的DNA复制相比，PCR可以快速扩增所需的DNA片段，请分
7、析回答下列有关问题：(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中的解旋原理是_。(2)此过程需要一种Taq DNA聚合酶。该酶是从_中分离的。(3)与普通DNA聚合酶相比，TaqDNA聚合酶具有的特性是_。(4)与体内DNA复制相比较，PCR反应要在_中才能进行，并且要严格控制_条件。(5)PCR中加入的引物有_种，加入引物的作用是_。解析：(1)PCR技术中用高温使DNA分子中的氢键打开，从而解旋，其原理是DNA的热变性原理。(2)Taq DNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中提取的。(3)与普通DNA聚合酶相比，TaqDNA聚合酶在90 以上的环境中不变性，具有耐高温的特
8、性。(4)PCR反应需要适宜的温度和pH，因此PCR反应要在一定的缓冲溶液中进行，并需严格控制好温度条件。(5)PCR需要两种引物，引物的识别位点决定了PCR扩增的DNA片段。PCR中加入的引物是小段单链DNA或RNA，作用是引导DNA复制，可以使游离的脱氧核苷酸与之结合形成磷酸二酯键，成为DNA复制的起点。答案：(1)DNA的热变性原理(2)水生耐热细菌Taq(3)耐高温(4)一定的缓冲溶液温度(5)2作为DNA复制的起点10PCR是一种DNA体外扩增技术。1988年，PCR仪问世，并被广泛应用于基因扩增和DNA序列测定，如图是PCR技术示意图，请回答：(1)标准的PCR过程一般分为_、_、
9、_三大步骤。(2)引物是此过程中必须加入的物质，从化学本质上说，可引物是一小段_。(3)将双链DNA_，使之变性，从而导致_。(4)引物延伸需要提供_作为原料。解析：标准的PCR过程一般分为变性、复性和延伸三大步。引物是此过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一段DNA或RNA，它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。在PCR过程中，当温度上升到90 以上时，双链DNA解旋为单链，当系统温度上升到72 左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下合成新的DNA链。答案：(1)变性复性延伸(2)单链DNA或RNA(3)加热到95 双链DNA分离成两条单链(4)四种脱氧核苷酸素养提升
10、11PCR一般要经过三十多次循环，从第二次循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，下列相关叙述正确的是()A由引物延伸而成的DNA单链作模板时，仍与引物结合进行DNA子链的延伸B由引物延伸而成的DNA单链作模板时，无须与引物结合，直接在酶的作用下从头合成子链C若只有1个DNA片段作为模板，经过5次循环，会含有这样的DNA片段32个D若只有1个DNA片段作为模板，经过2次循环，含引物的DNA单链占DNA总链数的1/4解析：当由引物延伸而成的DNA单链作模板时，此单链引物固定端为5端，因此与它互补的子链应从另一端开始合成，即与引物结合延伸DNA子链，A、B错误；若只有1个DNA片段作为模板，
11、经过5次循环，DNA复制了5次，可以得到的DNA分子数是2532(个)，C正确；若只有1个DNA片段作为模板，经过2次循环，会形成4个DNA片段，8条单链，其中含有原始模板链(不含引物)2条，另外6条单链中含有引物的有3条单链，含有引物的有3条单链，即含有引物的DNA单链占DNA总链数的3/8，D错误。答案：C12如图表示PCR扩增某个目的基因的基本过程，有关叙述正确的是()APCR技术的主要原理是DNA复制，解旋酶和DNA聚合酶分别在图中、两步中起作用B据图分析PCR操作过程中使用的DNA聚合酶至少要能忍受72 的高温CPCR技术使用的前提是能够利用目的基因的部分序列合成至少1种引物D因为引
12、物不能重复使用，所以在第n轮扩增过程中至少消耗2n个引物解析：PCR技术的主要原理是DNA复制，PCR过程中通过高温变性而得到解旋的目的，不需要解旋酶，A错误；据图分析PCR操作过程中使用的DNA聚合酶至少要能忍受94 的高温，B错误；PCR技术的原理是DNA的复制，而DNA复制方式为半保留复制，因此使用的前提是能够利用目的基因的部分序列合成至少1种引物，C正确；因为引物不能重复使用，所以在第n轮扩增过程中至少消耗(2n2)(2n12)2n1个引物，D错误。答案：C13用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱其中1号为DNA标准样液(Marker)，10号为蒸馏水，P
13、CR时加入的模板DNA如图所示。据此作出的分析，不合理的是()APCR产物的分子大小在250500 bp之间B3号样品为不含目的基因的载体DNAC9号样品对应植株不是所需的转基因植株D10号确定反应体系等对结果没有干扰解析：PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段。49号是转基因植株，理论上应包含目的基因，结合2号野生型和10号蒸馏水组的结果，推测包含目的基因的片段大小应为250500 bp，A正确。3号PCR结果包含250500 bp片段，应包含目的基因，B错误。9号PCR结果不包含250500 bp片段，所以不是所需转基因植株，C正确。10号放入蒸馏水，可排除反应体系等对
14、结果的干扰，D正确。答案：B14在PCR扩增DNA的实验中，预计一个DNA分子经过30次循环后，应该得到230个DNA分子，但是结果只有约210个DNA分子，那么出现该现象的原因不可能是()ATaq DNA聚合酶的活力不够或活性受到抑制B系统设置欠妥C循环次数不够D引物不能与模板链结合解析：如果Taq DNA聚合酶活力不够或活性受到抑制，则其催化效率会降低，得到的产物会比预期的少，A项正确。如果PCR系统设置欠妥，则达不到预期的结果，B项正确。如果循环次数过少，则产物的量比预期的少，C项正确。如果引物设计不合理，可能就不能与模板DNA结合，造成无法进行扩增，D项错误。答案：D15RTPCR是将
15、mRNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式反应相结合的技术，具体过程如图所示，请回答：(1)过程需要加入缓冲液、原料、_、_和引物A等。(2)过程首先要将反应体系的温度升高到95 ，其目的是_，该反应体系中所用的Taq DNA聚合酶至少应能耐受_ 高温。(3)决定RTPCR扩增片段的是引物，要对图中单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要_个引物B。(4)利用RTPCR技术可对某些微量RNA病毒进行检测，并可提高检测的灵敏度，原因是_。(5)RTPCR过程中主要通过对_的控制，影响酶的活性，从而使得化学反应高效有序地进行。解析：(1)过程是逆转录过程，操作时需要加入缓冲液、原料、模板(
16、RNA提取物)、酶(逆转录酶)和引物A等。(2)过程将反应体系的温度升高到95 的目的是让逆转录酶变性失活，同时使mRNAcDNA杂合双链解开。接下来所用的Taq DNA聚合酶至少应能耐受95 高温。(3)决定RTPCR扩增片段的是引物A和引物B上的核苷酸序列，要对图中单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要2n1个引物B。(4)利用RTPCR技术可对某些微量RNA病毒进行检测，并可提高检测的灵敏度，原因是增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量(或浓度)，便于检测。(5)RTPCR过程中主要通过对温度的控制，影响酶的活性，从而使得化学反应高效有序地进行。答案：(1)RNA提取物逆转录酶(2)让逆转录酶变性失活、使mRNAcDNA杂合双链解开95(3)2n1(4)增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量(或浓度)，便于检测(5)温度
