1、2022届高考生物一轮复习 同步检测第十单元生物技术与工程 第34讲 微生物的培养与应用综合能力提升A卷一、单选题1.高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是( )A.将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C.将转基因植物叶片接种到无菌培养基上D.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上2.在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图，且甲乙的对应位置不变。有关叙述，错误的是（）A.配制培养基时需进行髙压蒸汽灭菌B.甲中a区域为划线的起始位置C.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落D.图示实验过程中接种环灼烧了5次
2、3.某学者欲研究被石油污染过的土壤中的细菌数并从中筛选出能分解石油的细菌。下列有关操作错误的是( )A. 利用平板划线法对细菌进行计数B. 利用以石油为唯一碳源的培养基筛选能分解石油的细菌C. 采用稀释涂布平板法分离菌种D. 称取土壤和稀释土壤溶液时应在火焰旁操作4.淀粉酶可通过微生物发酵生产获得，生产菌株在含有淀粉的固体培养基上可释放淀粉酶分解淀粉，在菌落周围形成透明圈。为了提高酶的产量，研究人员欲利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株。下列实验步骤中不正确的是( )A. 将生产菌株分为两组，实验组用一定剂量的诱变剂处理，对照组不做处理B. 制备含水、淀粉、氮源和无机盐等成分的固体培养
3、基，并进行灭菌处理C. 把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养D. 观察两组菌株的菌落周围是否出现透明圈，选出有透明圈的菌株即为所需菌株5.下表所示为某微生物培养基的配方。下列说法中不正确的是()成分MaNO3K2HPO4KCIMgSO47H2OFeSO4(CH2O)H2O青霉素含量3g1g0.5g0.5g0.01g30g1000mL0.1万单位A此培养基属于液体培养基，其中的碳源是(CH2O)B配制培养基时，溶化后倒平板前，必须要进行的是灭菌C接种时应在酒精灯火焰附近操作D能用该培养液对纤维素分解菌进行选择培养6.土壤有“微生物的天然培养基”之称。土壤中的微
4、生物数量最大、种类最多。下列关于检测“土壤中细菌总数”实验操作的叙述不正确的是( )A.将土壤稀释液涂布于各组平板上B.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板C.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数D.将实验组和对照组平板倒置，37恒温培养2448小时7.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列与该细菌有关的描述错误的是（ ）A. 该细菌能分解尿素是因为产生了脲酶 B. 该细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源C. 可用以尿素为唯一氮源的培养基分离该细菌 D. 该细菌的遗传物质是DNA，主要分布在细胞核8.无菌技术是在操作过程中
5、，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术，主要包括消毒和灭菌。下列相关叙述正确的是( )A.在100煮沸消毒56min，可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢B.巴氏消毒法在杀死牛奶中所有微生物的同时并不破坏牛奶的营养成分C.进行动物细胞的传代培养前，需用紫外线对超净工作台进行灭菌处理D.高压蒸汽灭菌是湿热灭菌法中效果最好的，可用于培养皿的灭菌处理9.油烟污染由多种有害物质组成，不易降解。某同学从长期受到金龙鱼油产生的油烟污染的土壤中分离出油烟降解菌，其筛选分离过程如下图所示，下列叙述错误的是( )A.图中的过程为梯度稀释B.在中加入金龙鱼油，其作用是为微生物提供碳源和能源C.要判断是否起到
6、选择作用，应设计牛肉膏蛋白胨培养基作对照D分离得到的降解菌可采用甘油管藏的方法长期保存10.用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验，是在某病原菌均匀分布的平板上，铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。图示为培养的结果，其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。下列分析错误的是( )A.培养基中营养物质类型除氮源外还有碳源、水和无机盐B.形成较大抑菌圈的原因可能是微生物对药物较敏感C.不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响D在图示固体培养基上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种病原菌11.维生素C（Vc）是人和许多动物必需的营养物质。Vc的工业化生产采用氧化葡萄糖酸杆菌和假单孢
7、杆菌两次微生物发酵的方法进行。下列叙述错误的是( )A.可用显微镜直接计数法检测单位体积培养液中的两种活菌数目B.可用稀释涂布平板法分离纯化氧化葡萄糖酸杆菌和假单孢杆菌C.需要对发酵设备和培养基进行严格的灭菌处理，以防止杂菌污染D可用诱变或基因工程方法培育高产的氧化葡萄糖酸杆菌和假单孢杆菌12.科研人员以豆瓣酱为材料筛选高产蛋白酶的霉菌。下列利用平板划线法筛选该菌株的做法正确的是( )A.在每次划线前后都灼烧接种环的目的是防止杂菌污染B.接种霉菌后的培养基必须立即采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌C.筛选用的固体选择培养基中必须加入一定量的蛋白质D.对筛选的菌株计数时选择菌落数为30300的平板进行计
8、数二、填空题13.小麦、水稻等作物增产是长期使用化肥、农药、植物生长调节剂等的结果，而使用氮肥增多，不仅导致作物品质下降，还会污染环境。把固氮微生物的固氮基因导入小麦、水稻等农作物细胞内，让其自行固氮可解决此问题。回答下列问题：（1）固氮菌有自生固氮菌（可自行固氮）和共生固氮菌（如和豆科植物形成根瘤后才能固氮的根瘤菌）。对土壤中的固氮微生物进行选择通常用的是_（填“有机氮”“无机氮”或“不加氮”）源培养基，培养基中培养的是_（填“自生固氮菌”或“共生固氮菌”）。（2）为筛选出自生固氮菌，需要在制备的培养基中添加的基本营养物质包括水、碳源和_，该培养基能筛选出目的菌株的原因是_。（3）为检验培养
9、基及培养皿灭菌是否合格，可采取的措施是_。（4）现将10mL的固氮菌培养液进行梯度稀释，通常是梯度稀释10倍，即取1mL接种到_mL的培养液中。分别取01mL稀释倍数为105的样液接种到5个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为39、41、42、43、45，则1mL悬液中活菌数量为_个，上述过程采用的接种方法是_。14.回答与分离以尿素为氮源的微生物有关的问题：（1）有些细菌含有_，它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源。这类细菌在生态系统中的作用是_（2）本实验需通过比较尿素固体培养基和LB固体培养基菌上的落数，了解土壤稀释液中能以尿素为氮源的微生物的比例，因此要用_（填方法）进行接种。配
10、置培养基时选择琼脂糖作为凝固剂的原因是_。尿素溶液的灭菌选择的方法是_。（3）已知氨与纳氏试剂反应生成淡红色络合物。为了定量测定所分离的微生物对尿素的降解能力，可选用液体培养基培养，并利用光电比色法测定培养液NH3的含量。步骤如下：第一步，预实验。将培养液过滤和脱色处理后，用纳氏试剂显色处理。用光程为1cm的比色杯在570nm处测定_。若该值低，应选择_（A.增大光程，光波长不变B.增大光程，光波长增加C.减小光程，光波长不变D.减小光程，光波长增加）处再次测定，直到数据适宜为止。第二步，标准曲线的制作。用蒸馏水配制_，与茚三酮试剂反应后，用比色计测定，并制作以氨浓度与光密度值的标准曲线。第三
11、步，样品处理。将培养液过滤后，进行脱色处理，用纳氏试剂显色处理。第四步，样品测定与计算。15.我国的白酒分为酱香型、清香型和浓香型等多种类型，不同的白酒所用的酒曲和发酵工艺有差别。某兴趣小组获得某酒厂的酒曲后制成悬液，分别取不同稀释度的酒曲悬液接种到PDA培养基（一种以马铃著为基本原料配制的培养基）上，经培养后观察每个平板的菌落特征，并统计不同微生物的菌落数。请据此回答下列问题：（1）以下是PDA培养基的配制过程：称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸半个小时，纱布过滤，再加10-20g葡萄糖和17-20g琼脂，充分溶解后趁热用纱布过滤，分装，灭菌20分钟。从物理性质上看，PD
12、A培养基属于_培养基，在该培养基中，马铃薯的作用是为微生物提供_（至少答对两个）。配制过程用到的灭菌方法是_。（2）把酒曲悬液接种到PDA培养基上的方法是_。整个接种操作过程应该在_附近进行。在接种了酒曲后，需要把培养皿倒置放在恒温箱中，倒置的目的是_。（3）经观察后发现酒曲中主要有两类微生物，即酵母菌和霉菌，这两种微生物在结构上与细菌的最大区别是_。这两种微生物的种间关系是_。参考答案1.答案：C解析：生产果酒和腐乳时对无菌的要求不是很高，接种不需要进行严格的无菌操作；土壤浸出液中含有多种杂菌，所以利用选择培养基筛选土壤浸出液中特定微生物时，不进行严格无菌操作也不会影响实验结果；植物组织培养
13、技术成功的关键是无菌技术，若接种时不进行严格无菌操作将可能导致实验失败，故C项符合题意。2.答案：B解析：3.答案：A解析：分离菌种常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板对微生物法，但对活菌进行计数常用稀释涂布平板法而不能用平板划线法，A错误;分析题干可知，实验目的是筛选出能分解石油的细菌，因此培养基的配方应以石油为唯一碳源，B正确;稀释涂布平板法既可以分离微生物也可以进行微生物计数，C正确;称取土壤和稀释土壤溶液时应在火焰旁，以防止杂菌的污染，D正确。4.答案：D解析：A.利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株的实验中，需要设置对照组，不做任何处理，而实验组用一定剂量的诱变剂处理，故
14、A正确；B.根据生产菌株能分解淀粉的特点，培养基需要加入水、淀粉、氮源和无机盐等成分。欲观察菌落周围形成透明圈，则培养基应该是固态的。为了防止杂菌污染，需要进行灭菌处理，故B正确；C.实验应该遵循单一变量原则和对照性原则，把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养，故C正确；D.观察两组菌株的菌落周围是否出现透明圈，选出有透明圈范围最大、最明显的菌株即为所需菌株，故D错误。故选：D。5.答案：D解析：6.答案：C解析：7.答案：D解析：细菌将尿素分解成CO2和NH3，是由于细菌体内合成脲酶的结果，且一尿素为氮源，故A、C正确；分解尿素的细菌是分解者，而不是生产者，
15、不能能利用CO2作为碳源合成有机物，B正确；细菌的遗传物质是DNA，但是无细胞核，故D错误。8.答案：A解析：9.答案：A解析：10.答案：D解析：11.答案：A解析：12.答案：C解析：划线前灼烧接种环的目的是防止杂菌污染，划线后灼烧接种环的目的是杀死上次划线结束后残留在接种环上的菌种，保证下一个区域的菌种只来自上一个区域划线的末端，最后一次灼烧接种环的目的是防止菌体污染环境，A错误；接种霉菌之前，培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，接种霉菌之后立即灭菌会杀死所接种的菌株，B错误；产蛋白酶的霉菌利用的底物是蛋白质，因此，筛选用的固体培养基中需加入一定量的蛋白质，C正确；对筛选的菌株计数时选择稀释
16、涂布平板法接种，一般选择菌落数在30300的平板进行计数，而题干采用的是平板划线法接种，不能对菌落进行计数，D错误。13.答案：（1）不加氮 自生固氮菌 （2）无机盐 只有自生固氮微生物才能在无氮培养基上形成菌落，其他微生物不能生长 （3）取含培养基的空白平板在适宜条件下培养，观察培养基上是否形成菌落 （4）9 42107 稀释涂布平板法 解析：14.答案：（1）脲酶 维持氮平衡（氮循环）（2）涂布分离法 琼脂糖中不含N元素，对筛选利用尿素的微生物无干扰 G6玻璃砂漏斗过滤（3）光密度值（OD值） A 一系列浓度的氨标准溶液解析：15.答案：（1）固体；碳源、氮源和生长因子（至少要答对两个）；高压蒸汽灭菌法（2）稀释涂布平板法；酒精灯火焰；防止冷凝水滴入培养基，从而污染培养基（3）酵母菌和霉菌有细胞核，而细菌没有；竞争解析：
