1、第2讲克隆技术及生物技术的伦理问题1在培育克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到()A细胞培养技术B细胞核移植C胚胎移植技术 D基因工程技术解析克隆技术需利用核移植以产生重组细胞，重组细胞经细胞培养形成早期胚胎后，需移植到母体子宫发育成个体。答案D2植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是()A纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理酶的专一性B植物组织培养和动物细胞培养细胞的全能性C原生质体融合和动物细胞融合生物膜的流动性D紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养细胞分裂解析植物组织培养的原理是细胞的全能性，而动物细胞培养的原理是细胞的增殖。答案B3下列关于植物体细胞杂交的叙述，错误的是(
2、)A不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程B原生质体仍具有再生细胞壁，连续分裂并长成完整植株的能力C参与杂种细胞的细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和核糖体D植物体细胞杂交技术可克服不同种植物之间的不亲和障碍解析参与杂种细胞的细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和高尔基体。答案C4某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的()植物细胞工程动物细胞工程技术手段植物组织培养，植物体细胞杂交动物细胞培养和融合，单克隆抗体的制备特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理，制成细胞悬液融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法典型应用人工种子、杂种植株
3、单克隆抗体的制备培养液区别生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化动物血清不可缺少A.1B2 C3 D4 解析动物细胞工程的技术手段是动物细胞培养、动物细胞融合、动物体细胞核移植，单克隆抗体是细胞融合的特殊应用。植物细胞壁的去除应使用纤维素酶和果胶酶。答案B5将无根的非洲菊幼苗转入无植物激素的培养基中，在适宜的温度和光照等条件下培养一段时间后，应出现的现象是()解析由题意知，培养基中无植物激素，故无法进行正常的植物组织培养过程。而非洲菊可通过扦插方式用茎进行繁殖，故此过程可相当于植物扦插过程，最终可形成一完整植株。答案B6下列有关现代生物科技的叙述中，错误的是()A植物体细胞杂交技术克服了不
4、同生物远缘杂交不亲和的障碍B动物细胞融合技术开辟了制备单克隆抗体的新途径C利用基因工程技术可以使哺乳动物生产人类所需的药品D胚胎移植技术的优势是可以充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力解析胚胎移植技术的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。答案D7如图为种间植物细胞融合再生植物示意图，请据图回答问题。(1)步骤是使植物细胞形成_阶段，其关键技术是_。(2)步骤一般要用_。(3)为_过程之后，两者最终融合为一体成为一个新的杂种细胞。(4)在形成再生植株的过程中，与组织培养相似的步骤是_。(5)培养的杂种植株在形态上表现为_，其根本原因是_。(6)亲本A细胞与亲本B细胞两两融合后的细胞有_种，具体为
5、_。解析植物细胞首先要用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，然后用聚乙二醇诱导剂诱导融合，形成杂种细胞。A细胞和B细胞融合后形成AA、BB和AB三种融合细胞。答案(1)原生质体使用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁(2)聚乙二醇(PEG)等诱导剂诱导融合(3)原生质体融合(4)(5)杂种特性具有双亲的全部遗传物质(6)3AA、BB、AB8下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。(1)_技术是单克隆抗体技术的基础。(2)根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于 _ 培养基。(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是_。(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用_。(5)选出
6、的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞_的特点，又具备淋巴细胞_的特点。(6)淋巴细胞是由动物_中的_细胞分化而来的。(7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_。 解析(1)单克隆抗体制备是动物细胞融合的重要应用之一，其技术基础是动物细胞的培养。(2)由图示中文字“骨髓瘤细胞(不能在HAT培养基上生长)”和“混合并进行细胞融合，转到HAT培养基上培养”可知：使用的HAT培养基是选择培养基。(3)单克隆抗体来源于单个效应B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞，与血清中常规抗体比较，其具有灵敏度高、专一性强等特点。(4)动物细胞融合最常用诱导方法是利用灭活的病毒诱导。(5)骨髓瘤细胞与单个效应B
7、细胞融合形成的杂交瘤细胞具备了骨髓瘤细胞体外能无限增殖和效应B细胞能产生特异性抗体的特点。(6)淋巴细胞来源于动物骨髓中的造血干细胞的分裂、分化。(7)葡萄糖、氨基酸被动物细胞吸收的主要方式是主动运输。答案(1)动物细胞培养(2)选择(3)特异性强、灵敏度高(4)灭活的病毒(5)在体外大量增殖分泌特异性抗体(6)骨髓造血干(7)主动运输(主动吸收) 9下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题。(1)X、Y、Z细胞的名称分别是_、_、_。(2)过程类似于植物组织培养技术中的_过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较_。过程的实质是_。(3)过程中需用到的生物
8、诱导剂是_。(4)处需要筛选，其目的是_。(5)若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，能测到放射性32P的细胞器是_、_。解析(1)由于单抗是由杂交瘤细胞产生的，根据示意图可知，Z是杂交瘤细胞，X细胞是由诱导干细胞形成的，因此为骨髓瘤细胞，Y细胞是由病毒刺激产生的效应B细胞。(2)过程是将高度分化的纤维母细胞诱导形成诱导干细胞，类似于植物组织培养技术中的脱分化过程，与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较高。过程的实质是基因的选择性表达。(3)过程中的诱导方法有物理法、化学法和生物法，需用到的生物诱导剂是灭活的病毒。答案(1)骨髓瘤细胞抗原刺激过的(效应)B细胞杂交瘤细胞(2)脱分化
9、高基因的选择性表达(3)灭活的病毒(4)筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞(5)核糖体线粒体10某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题。(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_。(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是_。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_。(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_。药物试验需要
10、大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用_处理。(4)为了防止基因培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_。(5)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入_，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的_或_合成水平的差异，确定Y的药效。解析(1)甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。肿瘤细胞为无限增殖的细胞，细胞周期短。在相同条件下，培养相同的时间，甲细胞的数量多于乙细
11、胞。(2)动物细胞培养液中必须加入动物血清，血清中含有血清蛋白、生长因子、促进细胞贴壁的因子、激素等合成培养基中缺乏的物质。细胞培养应在含5%CO2的恒温培养中进行，CO2的作用是调节培养液pH。(3)甲为肿瘤细胞，能无限增殖，传代的次数要比乙细胞多，乙细胞(正常肝细胞)在培养瓶中贴壁生长，当铺满瓶壁时，生长停止。为得到更多的肝细胞，需要定期地用胰蛋白酶使细胞脱离瓶壁，进行传代培养。(4)培养液中加入抗生素来抑制和杀灭细菌，抗生素对动物细胞没有影响。(5)设计一组加入抗癌药物的实验组，一组不加药物的对照组，通过检测药物影响X基因的表达过程，即转录形成mRNA、翻译形成蛋白质的量来检验药效。答案
12、(1)多(2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质维持培养液pH(3)停止多胰蛋白酶(4)抗生素(5)YmRNA蛋白质11我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质(S蛋白，对应的基因为S基因)，请回答下列问题。(1)在这项技术中，S基因属于_。(2)用_处理S基因和运载体，并用_使之结合，这里的DNA片段两两结合的产物有_种，除了S基因，构建好的表达载体还应具有_等结构。(3)将表达载体导入到哺乳动物细胞，筛选得到工程细胞。使用合成培养基培养工程细胞时，通常需要加入 _等天然成分。工程细胞在生长过程中有_现象，需要定期使用_酶处理，以便于分瓶继续培养
13、，在培养过程中，定期收集培养液，分离纯化即可得到所需产品。(4)由于哺乳动物细胞娇嫩挑剔，培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”，从饲养的转基因动物分泌的乳汁中提取所需产品。在这种技术中，构建表达载体时需要将S基因与_等调控组件重组在一起，并将表达载体通过_的方式，导入到哺乳动物的_(填细胞名称)。(5)人的肠道具有独立的黏膜免疫系统，这使得口服疫苗成为可能，但有效的口服疫苗必须要在到达肠道的过程中躲避胃酸和蛋白酶的降解，否则就会失效。如果要生产口服的乙肝疫苗，理想的受体是植物细胞，理由是_。可食的转基因的植物疫苗的优点有(至少答出两点)：_。解析(1)S基因为目的基因。
14、(2)用同一种限制酶切割S基因和运载体会使其产生相同的黏性末端，用DNA连接酶连接时会出现目的基因运载体、目的基因目的基因、运载体运载体3种两两连接产物；基因表达载体应含有目的基因、标记基因、启动子和终止子等结构。(3)动物细胞培养液中需加入动物血清，动物细胞培养时，会出现贴壁生长和接触抑制现象，需要用胰蛋白酶定期处理。(4)为保证目的基因表达，需将目的基因和启动子、终止子调控组件重组在一起，常用显微注射法把基因表达载体注射到动物受精卵中。(5)因植物细胞有细胞壁，可以使疫苗成分避开胃酸和蛋白酶的降解；可食的转基因植物疫苗具备可以直接口服、使用简便、便于推广；运输方便、贮存简单等优点。答案(1)目的基因(2)同一种限制酶DNA连接酶3启动子、终止子、标记基因(3)动物血清贴壁生长和接触抑制胰蛋白(4)乳腺蛋白基因的启动子显微注射受精卵(5)植物细胞有细胞壁，可以使细胞中的疫苗成分避开胃酸和蛋白酶的降解生产简单、成本低廉，容易大量生产制造；直接口服、使用简便，便于推广；运输方便，贮存简单(其他合理答案亦可)