1、课时作业三十七一、选择题1下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是 ( )A动物细胞培养的目的就是为获得细胞分泌蛋白B动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散开C动物细胞培养通常不会出现接触抑制现象D可以通过细胞培养技术获得完整的动物个体B 动物细胞的培养是为了获得更多的动物细胞，它无法获得完整动物个体。在培养之前对材料要用胰蛋白酶处理使细胞分散开。在培养过程中动物细胞会出现接触抑制现象。 2(2014广东四校联考)下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是 ( )A培养基成分不同B动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能
2、培养成植株 A 动物细胞培养所采用的培养基成分中要有动物血清等，植物组织培养培养基成分中要有植物激素，二者成分不同；二者都需要在无菌条件下进行、都可进行传代培养、细胞均能够大量培养。 3某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染，为查找污染原因设计了4个实验，实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是 ( )A污染主要是培养基灭菌时间短造成的B污染主要来源于组织培养所用的离体组织C调节培养基pH能解决污染问题D调节培养温度能解决污染问题B 由图可知，培养基的灭菌时间、pH以及培养温度对污染率的影响不大；离体组织灭菌时间越长污染率越低，说明离体组织是污染的主要来源。
3、4 (2014苏北四市模拟)进行生物工程设计时，下表各组所选择的实验材料与实验目的配置错误的是( )组别实验目的实验材料材料特点1动物细胞核移植卵(母)细胞细胞大，细胞质能有效调控核发育2体细胞诱变育种愈伤组织细胞分裂能力强，易诱发突变3植物体细胞杂交培育新品种花粉粒易于获取，易于培养4烧伤患者皮肤细胞移植自体皮肤生发层细胞分裂能力强，且不会引起免疫排斥A1B2C3D4C 细胞核移植常用卵细胞的细胞质，原因是卵细胞体积大，容易操作，且细胞质中含有促进遗传信息表达的信息分子；诱变育种可以选择愈伤组织，愈伤组织细胞分裂能力强，但与其他细胞突变频率都一样，比较低；植物体细胞杂交一般选择植物的体细胞，
4、单倍体育种选用花粉粒。 5(2014南通学情调研)有关“治疗性克隆”的说法错误的是 ( )A其核心技术是胚胎干细胞培养技术B中国政府既反对生殖性克隆，也反对治疗性克隆C解决了临床上供体器官不足和器官移植后免疫排斥问题D胚胎干细胞可以克隆出不同组织细胞的根本原因是基因的选择性表达 B 治疗性克隆是指从胚胎中取出干细胞用于医学研究和治疗，其关键技术是胚胎干细胞的培养，目的是培养出能够用于医学治疗的供体器官，以解决供体器官不足和移植后免疫排斥问题。用胚胎干细胞能够培养出不同的组织器官，原因是基因进行选择性表达。中国政府反对生殖性克隆，但不反对治疗性克隆。 二、非选择题6 (2014西安名校质检)如图
5、为种间植物细胞融合再生植物示意图，请据图回答问题。(1)步骤是使植物细胞形成 阶段，其关键技术是 。(2)步骤一般要用 。(3)为 过程之后，两者最终融合为一体成为一个新的杂种细胞。(4)在形成再生植株的过程中，与组织培养相似的步骤是 。(5)培养的杂种植株在形态上表现为 ，其根本原因是 。(6)亲本A细胞与亲本B细胞两两融合后的细胞有 种，具体为 。解析 植物细胞首先要用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，然后用聚乙二醇诱导剂诱导融合，形成杂种细胞。A细胞和B细胞融合后形成AA、BB和AB三种融合细胞。答案 (1)原生质体 使用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁 (2)聚乙二醇(PEG)等诱导剂诱导融合(3
6、)原生质体融合 (4) (5)杂种特性 具有双亲的全部遗传物质(6)3 AA、BB、AB 7人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：请回答：(1)过程代表的是 。(2)过程构建A基因表达载体时，必须使用 和 两种工具酶。(3)过程采用的实验技术是 ，获得的X是 。(4)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。解析 (1)根据图中过程中由RN
7、A指导合成DNA可判断为逆转录。(2)基因工程构建基因表达载体时用限制性核酸内切酶(限制性内切酶、限制酶)将目的基因和运载体切出相同的黏性末端，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接起来。(3)图中为小鼠骨髓瘤细胞和效应B淋巴细胞的融合过程，可得到杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体。(4)病毒表面的A蛋白为主要抗原，因此可用A蛋白制备疫苗，刺激机体产生抗体。对于病毒的检测可采用与已知病毒进行核酸序列比较的方法，也可根据抗原与抗体发生特异性结合的特点，用抗A蛋白的单克隆抗体进行检测。答案 (1)逆(反)转录(2)限制性核酸内切酶(限制性内切酶、限制酶) DNA连接酶(3)细胞
8、融合 杂交瘤细胞(4)A蛋白 核酸(基因)序列 抗A蛋白的单克隆抗体 8某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题。(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量 。(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是 。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是 。(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长 。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传
9、代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更 。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用 处理。(4)为了防止基因培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 。(5)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入 ，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的 或 合成水平的差异，确定Y的药效。解析 (1)甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。肿瘤细胞为无限增殖的细胞，细胞周期短。在相同条件下，培养相同的时间，甲细胞的数量多于乙细胞。(2)动物细胞培养
10、液中必须加入动物血清，血清中含有血清蛋白、生长因子、促进细胞贴壁的因子、激素等合成培养基中缺乏的物质。细胞培养应在含5%CO2的恒温培养中进行，CO2的作用是调节培养液pH。(3)甲为肿瘤细胞，能无限增殖，传代的次数要比乙细胞多，乙细胞(正常肝细胞)在培养瓶中贴壁生长，当铺满瓶壁时，生长停止。为得到更多的肝细胞，需要定期地用胰蛋白酶使细胞脱离瓶壁，进行传代培养。(4)培养液中加入抗生素来抑制和杀灭细菌，抗生素对动物细胞没有影响。(5)设计一组加入抗癌药物的实验组，一组不加药物的对照组，通过检测药物影响X基因的表达过程，即转录形成mRNA、翻译形成蛋白质的量来检验药效。答案 (1)多 (2)血清
11、可以补充合成培养基中缺乏的物质 维持培养液pH (3)停止 多 胰蛋白酶 (4)抗生素 (5)Y mRNA 蛋白质 9下图是某单基因遗传病的家系图，请分析并回答：(1)据图分析，该病的致病基因位于 染色体上。为诊断2号个体是否为杂合子，可将致病基因的DNA片段用 作标记制成探针进行检测。为获得大量致病基因，通常采用PCR技术进行扩增，该技术成功的关键是要有 酶，扩增的前提是要有一段该致病基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成 。(2)若该病会导致病人免疫力下降，治疗需要大量的抗体。临床使用的鼠源性单抗(一种单克隆抗体)是用经过免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合，用 培养基筛选出杂交瘤细胞，然后进行
12、和抗体检测，再经多次筛选、培养即可提取出大量鼠源性单抗，鼠源性单抗具有特异性强、 ，并可在体外大量制备的特点。(3)若5号个体在连续隔周注射某种鼠源性单抗治疗一种病毒感染性疾病，开始病毒量明显减少，一段时间后，这种病毒量又开始上升。上升的原因可能是病毒发生了 ，还可能是人体产生了能与鼠源抗体特异性结合的 ，使鼠源性单抗不能发挥抗病毒的作用。(4)目前，研究人员可应用 技术，改造鼠源性单抗分子的结构，降低人体对鼠源性单抗的免疫反应。解析 (1)由3、45可推断，该遗传病的致病基因为常染色体上的隐性基因。利用放射性同位素标记的致病基因DNA片段作为探针，可以检测2号个体是否为杂合子。PCR技术的关
13、键是要有热稳定的DNA聚合酶。(2)单克隆体的制备需要经过免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合，用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，然后进行克隆化培养和抗体检测再经多次筛选，培养即可提取获得。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并可在体外大量制备等特点。(3)病毒的遗传物质祼露，容易受外界因素的影响而发生突变。(4)通过蛋白质工程，可以获得自然界并不存在的蛋白质。答案 (1)常 放射性同位素 热稳定(或耐高温)的DNA聚合(Taq) 引物(2)特定的选择性(选择) 克隆化培养 灵敏度高(3)变异(突变、基因突变) 抗体(4)蛋白质工程 10(2012江西南昌一模)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕
14、后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：(1)制备单克隆抗体过程中要用到 和 技术。(2)在B淋巴细胞内DNA合成有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤所阻断。而骨髓瘤细胞的DNA合成没有S途径。利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的 成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_。培养杂交瘤细胞的条件包括：无菌、无毒的环境，营养， 、 。(3)哺乳动物在怀孕初期能为胚胎的收集提供可能，这是因为 ；在胚胎移植技术中收集到胚胎后要进行 、 以及移植后的检查等步
15、骤；胚胎移植时可利用激素对受体进行 处理，使受体处于适合的生理状态；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生 反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能。(4)为了更多地生产出人HCG，有人构思采用胚胎分割技术，把一个胚胎分割成很多份数，进而培育出大量相同的转基因牛。你认为这种方法可行吗？为什么？ ，_。解析 (1)制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。(2)利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的氨基嘌呤具有筛选杂交瘤细胞的作用。杂交瘤细胞的特点是能无限增殖并分泌特异性抗体。培养杂交瘤细胞的条件包括：无菌、无毒的环境，营养，温度和pH，气体环境。
16、(3)哺乳动物在怀孕初期能为胚胎的收集提供可能，这是因为早期胚胎在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态；在胚胎移植技术中收集到胚胎后要进行检查、培养或保存，胚胎移植时要对受体进行同期发情处理；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能。(4)如果把一个胚胎分割成很多份数，移植的成功率很低。答案 (1)动物细胞培养 动物细胞融合(2)氨基嘌呤 能无限增殖并分泌特异性抗体 温度和pH 气体环境(3)早期胚胎在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而且处于游离状态 检查 培养或保存 同期发情 免疫排斥(4)不可行 因为胚胎分割的份数越多，操作难度会越大，移植的成功率也越低
