1、第一章无菌操作技术实践第一节微生物的分离和培养教学建议在介绍培养基知识时,教师可以采用资料分析的形式,让学生通过主动的分析,认识培养基的基本组成成分,并结合必修模块“分子与细胞”中的知识,让学生从构成生物体的基本元素这一角度理解培养基中为什么都需要具备这些基本成分。无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。倒平板、平板划线操作,其操作中的每一步都需要做到“无菌”,即防止杂菌污染。只有熟练、规范地进行无菌操作,才可能成功地培养微生物。由于本节操作内容较多,教师通过教科书或光盘或PPT使学生了解实验操作的方法和过程。如,如何配制牛肉膏蛋白胨固体培养基,如何纯化大肠杆菌,使学生在头脑
2、中有个清晰的流程,初步了解具体实验的方法。特别是倒平板、平板划线操作起来有难度,而且后面还会用到,所以一定要给学生演示清楚。有条件最好每位同学都能倒一两个平板,并且练习一下平板划线法。最后可根据学生的实验结果进行相关问题的讨论。培养微生物的实验,操作本身所需时间并不长,但是,由于操作前通常需要制备培养基、对培养基和其他材料用具进行灭菌,操作后通常需要几天的培养时间和对微生物进行观察,因此,教师在安排教学的时候,要注意将课上与课下的时间统筹安排。此外,微生物技术的掌握需要一定的实践经验,建议教师先通过预实验进行摸索,积累经验后,再安排教学。参考资料一、实验安排及注意事项1.从菌种保藏中心购买菌种
3、后,教师首先需要用平板划线法纯化培养所得菌种,并根据学生小组的数目,准备好数个平板。2.第1课时完成基础知识的教学,学习各种操作方法,并制备培养基。高压蒸汽灭菌所需要的时间较长,因此需要利用课下时间完成。课下完成后,再于第2课时完成大肠杆菌的纯化培养。此后安排学生连续观察记录34 d。3.配制培养基时,教师需要提示学生按照每个培养基消耗1520 mL的量来估算总用量。全班同学的培养基可以集中起来,分批灭菌。4.灭菌后,培养基冷却到50 左右时进行倒平板操作。如果不能及时操作,需要将培养基放到55 左右的电热箱中保温,以防止琼脂凝固。5. 如果打算做本章的第二或第三节,建议此课题不仅要练习平板划
4、线操作,还要练涂布平板法操作。为此,教师需要提前1天用液体培养基培养大肠杆菌。培养一夜后,于第2天将培养液分发到各小组。6.实验后,所有用过的培养基、培养液等都需要统一进行灭菌后再丢弃,否则将会造成环境污染。二、课题成果评价1.培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温12 d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。2.接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。3.是否进行了及时细致的观察与记录培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。
