1、2014-2015学年山东省潍坊市安丘一中高二（下）期中生物模拟试卷（基因工程）一、选择题1（3分）（2014南京三模）超氧化物歧化酶（SOD）是一种源于生命体的活性物质如图为人工培育含SOD植物新品种的过程，相关叙述正确的是（）A过程可用基因枪法导入SOD基因B、过程所用的激素种类和比例都相同CSOD催化反应的机制是为反应提供活化能D图示育种过程体现了植物细胞的全能性2（3分）（2015姜堰市校级模拟）下列有关转基因食品和转基因生物的叙述中，正确的是（）A转基因食品只能用作牲畜饲料B目前对转基因食品的安全性仍然存在争议C转基因食品与非转基因食品的营养物质种类差别很大D目前我国对农业转基因生物
2、的研究和试验尚未作出具体规定3（3分）（2015沙坪坝区校级模拟）某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如表限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示下列有关说法不正确的是（）a酶切割产物（bp）b酶再次切割产物（bp）2100：1400：1000：5001900：200：800：600：1000：500A在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个Ba酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接Ca酶与b酶切断的化学键相同D用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，AGATCCTCTAG
3、G序列会明显增多4（3分）（2011秋涟水县校级期末）应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的这里的基因探针是指（）A用于检测疾病的医疗器械B用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C合成球蛋白的DNAD合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段5（3分）（2012秋重庆期末）利用基因工程技术可使大肠杆菌生产人的胰岛素，下列相关叙述正确的是（）A人和大肠杆菌在合成胰岛素时，转录和翻译的场所都是相同的B所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C通过检测，大肠杆菌中没有胰岛素产生则可判断重组质粒未导入受体菌D选用大肠杆菌作为受体细胞主要原因是其繁殖快、易培养、产量高6（3分
4、）（2015春安丘市校级期中）“筛选”是很多生物试验过程中的重要环节下列叙述中错误的是（）A单倍体育种中筛选杂种植株的花粉B多倍体育种中筛选秋水仙素处理后的植株C单克隆抗体制备过程中需要两次筛选D基因工程中筛选含有目的基因的受体细胞7（3分）（2012泰州一模）云南农业大学研究人员培育出10头猪蹄发荧光的转基因猪主要研究过程是：将瘦素基因 与绿色荧光蛋白基因导入猪胎儿成纤维细胞；将转基因的成纤维细胞核移植到去核的猪卵 母细胞，并培育形成早期胚胎；将胚胎移植到代孕母猪体内，最终获得转基因猪在这一过程中不必进行的是（）A将瘦素基因与绿色荧光蛋白基因拼接，并构建基因表达载体B培养并筛选处于减数第二次
5、分裂中期的猪次级卵母细胞C筛选出转基因猪胎儿成纤维细胞和转基因克隆胚胎D给代孕母猪注射环孢霉素A阻止T细胞增殖，以利于代孕母猪接受胚胎8（3分）（2014春晋江市校级期末）水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly和Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（）A促使目的基因导入受体细胞中B促使目的基因在受体细胞中复制C筛选出获得目的基因的受体细胞D使目的基因容易成功表达9（3分）（2015春安丘市校级期中）20世纪90年代开始兴起的DNA疫苗被称为第三次疫苗革命，医学专家将含病毒抗原基因的重组质粒注入人体表达后使人获得免疫能力下
6、列叙述不正确的是（）A重组质粒在内环境中表达后引起机体免疫反应B病毒抗原基因在体内表达时需要RNA聚合酶C病毒抗原基因与质粒重组时需要DNA连接酶D注射DNA疫苗后机体会产生相应的记忆细胞10（3分）（2015春安丘市校级期中）限制性内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，不同的限制性内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切现以3种不同的限制性内切酶对6.2kb大小的线状DNA进行剪切后用凝胶电泳分离各核酸片段，实验结果如图所示：请问：3种不同的限制性内切酶在此DNA片段上相应切点的位置是（）ABCD11（3分）（2015春岐山县期中）1抗胰蛋白酶缺乏症是北美常见的一种单基因遗传病，患者成年后会出现
7、肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡利用基因工程技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人1抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更容易获得这种酶下列关于该过程的叙述中错误的是（）A载体上绿色荧光蛋白基因（GFP）的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞B将目的基因导入羊膀胱细胞中，将会更加容易得到1抗胰蛋白酶C培养出的转基因羊的所有细胞中都含有该目的基因，故该羊有性生殖产生的后代也都能产生1抗胰蛋白酶D目的基因与载体重组过程需要DNA连接酶的催化作用12（3分）（2013安徽）如图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图下列叙述正确的是（）A根据培养皿中菌落数可以准确
8、计算样品中含有的活菌实际数目B外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制C重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接D放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置13（3分）（2005青浦区一模）如果科学家通过转基因工程，成功地把一位女性血友病患者的造血细胞进行改造，使其凝血功能恢复正常，那么后来她所生儿子中（）A全部正常B一半正常C全部有病D不能确定14（3分）（2014嵊州市校级一模）上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，以
9、下与此有关的叙述正确的是（）A“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物B“提高基因的表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因C只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中是纯合的D转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，故不能合成人白蛋白15（3分）（2015春龙海市校级期中）在现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是（）A对植物的离体组织进行培养，大规模培育优良品种B将鼠的骨髓瘤细胞与已免疫的B淋巴细胞融合，制备单克隆抗体C利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜甘蓝”D将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株16（3分）（
10、2015春安丘市校级期中）利用生物工程改造生物特性，从而生产人类所需的产品下列有关措施的叙述中，不正确的是（）A利用基因突变原理培育成青霉素高产菌株B利用基因突变原理培育成生产人干扰素的酵母菌C利用基因工程手段培育成生产人胰岛素的大肠杆菌D利用细胞工程技术培育成生产单克隆抗体的细胞系17（3分）（2011江苏）关于现代生物技术应用的叙述错误的是（）A蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养18（3分）（2006秋丰台区期末）既可用于基因重组技术又可用于细胞融合技术的是（）A病
11、毒B纤维素酶C聚乙二醇D质粒二.解答题19（20分）（2015房山区一模）埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别EBO结构及基因组如图1所示目前尚无针对该病毒的特效药或疫苗（1）埃博拉病毒（EBO）的遗传物质是，EBO病毒容易变异的原因是（2）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的细胞与鼠的瘤细胞进行杂交，获得纯净的单一品种抗体，其特点是，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”，抗击埃博拉病毒（EBO）（3）图2表示转基因技术生产埃博拉病毒蛋白疫苗与重组病毒粒子疫苗的基本过程该技术的目的基因最好选择实验
12、发现，用昆虫细胞替代酵母菌承担辅助重组质粒与重组病毒的共转染，也能收集到目的基因表达的蛋白质，这一现象说明以EBO病毒包膜蛋白作为疫苗比较安全，其原因是重组病毒中须除去腺病毒复制激活基因（E），目的是使重组病毒不能在人体内，提高了疫苗的安全性20（15分）（2015春安丘市校级期中）如图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转人赖氨酸基因的克隆牛“织女”的大致过程，请据图回答问题（1）克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有： （至少答出两项）（2）实施基因工程包括四个基本操作步骤，其核心步骤是，实现过程的常用方法是（3）现有长度为1000碱基对（by）的DNA
13、分子，用限酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000by，说明此DNA分子为 （填“线性”或“环状”），用Kpn I单独酶切得到400by和600by两种长度的DNA分子，用EcoR、Kpn同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子请绘出该DNA分子的酶切图谱的示意图： （请在图中标明限制酶的类型、酶切位点和碱基长度）21（15分）（2015乌鲁木齐模拟）人红细胞生成素（htPA）是一种重要的蛋白质，它可以治疗贫血症，可通过转基因技术大量生产如图是通过转基因羊生产红细胞生成素的过程请据图回答：（1）若需在短时间内获得较多的红细胞生成素基因，通常采用技术将该基因导入受精卵常用的
14、方法是（2）红细胞生成素基因与质粒用限制性核酸内切酶切割后，通过DNA连接酶连接，构建基因表达载体检测目的基因是否已插入受体细胞的DNA，可采用技术（3）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其采集的精子需要经过处理，才具备受精能力（4）为了获得多个相同的转基因母羊，常采用的方法，该方法操作的最佳时期是胚胎发育的期22（12分）（2015春安丘市校级期中）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断如图1是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，图表表示杂种细胞中基因的存在与人体染色体间的关系（注：“+”表示有，“”
15、表示无），请分析回答：杂种细胞系一二三四五小鼠基因A+B+C+小鼠染色体1+2+3+（1）制备单克隆抗体用到的生物学技术有图1中给小鼠注射的HCG相当于，过程常采用的方法有（至少答2点），（2）科研人员发现形成的杂种细胞中小鼠的染色体会随机丢失，各种杂种细胞保留小鼠染色体的种类和数量是不同的，对杂种细胞进行染色体和基因关系分析的结果如图2据此推测，2号染色体上有基因，能无限增殖的各种细胞系有（3）在之前要进行抗体筛选的目的是，在此过程生产的单克隆抗体可以与特异性结合，从而诊断早孕23（12分）（2015春安丘市校级期中）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体已知某传染性疾病的病原
16、体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：（1）过程代表的过程是过程代表的过程是（2）过程构建A基因重组载体时，必须使用、两种工具酶（3）过程发生的生理过程是、（4）过程的实验技术名称是，过程依据的原理是需用促进X的形成（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的所制备的疫苗对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行比较；或用图中的进行特异性结合检测24（10分）（2015春安丘市校级期中）如图是利用奶牛乳汁生产人血清白蛋白的图解，根据下图回答：（1）在形成图中的过程中，我们称为，获取的途径主要有（2）人血清
17、白蛋白的生产说明该工程突破了自然界物种之间的，在基因表达载体中，人的血清白蛋白基因前端必须要有（3）对处理后的分散细胞进行培养，通常要在培养液中添加一定量的，此外应定期，以便保证被培养的细胞处于的环境中25（12分）（2015春安丘市校级期中）A、转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示（至代表过程，A至C代表结构或细胞）：（1）图中过程用到的酶是，所形成的B叫做（2）过程常用处理农杆菌，使之成为细胞，利于完成转化过程（3）图中过程需要用到的激素是（4）在分子水平上，可采用的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原B、野生马铃薯
18、品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯（1）专家在实验中，需用到的酶主要有和等（2）专家在实验中，用于诱导融合使用的化学试剂是（3）对于农民，种植杂交系马铃薯除可获得较高的收成外，还有什么优点？（要求写出两点）2014-2015学年山东省潍坊市安丘一中高二（下）期中生物模拟试卷（基因工程）参考答案与试题解析一、选择题1（3分）（2014南京三模）超氧化物歧化酶（SOD）是一种源于生命体的活性物质如图为人工培育含SOD植物新品种的过程，相关叙述正确的是（）A过程可用基因
19、枪法导入SOD基因B、过程所用的激素种类和比例都相同CSOD催化反应的机制是为反应提供活化能D图示育种过程体现了植物细胞的全能性考点：植物培养的条件及过程 分析：本题主要考查植物组织培养的知识植物组织培养是指利用特定的培养将离体的植物细胞、组织或器官培养成完整植株的过程，所以花药的离体培养、基因工程中的受体细胞的培养、植物体细胞杂交后杂种细胞的培养以及植物的大量快速繁殖都要用到植物组织培养技术植物组织培养的过程是外植体愈伤组织胚状体试管苗脱毒植物苗的取材一般是幼嫩的芽或茎，主要是这些部位不带病毒植物组织培养过程中，生长素和细胞分裂素同时使用时，两者用量的比例影响着细胞的发育方向（或分化）培养中
20、必须具备植物激素、无机物（矿质元素）、有机物等营养物质解答：解：A、目的基因导入植物细胞的方法有：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法，A正确；B、脱分化、再分化过程所用的激素种类相同是细胞分裂素和生长素，但比例不同，B错误；C、SOD催化反应的机制是为反应降低活化能，C错误；D、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，D正确故选：AD点评：本题主要考查学生对知识的记忆和理解能力1、细胞分裂素和生长素的使用顺序不同，培养的结果不同先使用生长素，再使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化；两者同时使用，细胞分化频率提高2、生长素和细胞分裂素的使
21、用比例不同，培养的结果不同生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长2（3分）（2015姜堰市校级模拟）下列有关转基因食品和转基因生物的叙述中，正确的是（）A转基因食品只能用作牲畜饲料B目前对转基因食品的安全性仍然存在争议C转基因食品与非转基因食品的营养物质种类差别很大D目前我国对农业转基因生物的研究和试验尚未作出具体规定考点：转基因生物的安全性问题 分析：转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）转基因食品、产品上
22、都要标注原料来自转基因生物，如“转基因”“转基因加工品（制成品）”“加工原料为转基因”“本产品为转基因加工制成”对于转基因食物潜在隐患要进行开展风险评估、预警跟踪等措施多环节、严谨的安全性评价，保障了现代生物技术的安全性解答：解：A、转基因食品也可以食用，A错误；B、目前对转基因食品的安全性仍然存在争议，B正确；C、转基因食品与非转基因食品的营养物质种类差别不大，C错误；D、为了加强对业转基因生物的标识管理，保护消费者的知情权，我国对农业转基因生物实行了标识制度，D错误故选：B点评：本题考查转基因生物的安全性问题，要求考生识记转基因生物安全性问题，了解人们在食物安全、生物安全和环境安全三个方面
23、进行的争论，再根据题干要求准确判断各选项即可3（3分）（2015沙坪坝区校级模拟）某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如表限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示下列有关说法不正确的是（）a酶切割产物（bp）b酶再次切割产物（bp）2100：1400：1000：5001900：200：800：600：1000：500A在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个Ba酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接Ca酶与b酶切断的化学键相同D用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，AGA
24、TCCTCTAGG序列会明显增多考点：基因工程的原理及技术 分析：分析题图：a酶和b酶识别的脱氧核苷酸序列不同，但切割后产生的黏性末端相同分析表格：a酶可以把原有DNA切成4段，说明有该DNA分子上有3个切口，即a酶的识别序列有3个；b酶把大小是2100的DNA切成大小分别为1900和200两个片段，把大小是1400的DNA切成大小分别为800和600两个片段，且a酶和b酶的识别位点不同，说明b酶的识别序列有2个解答：解：A、由以上分析可知，a酶的识别序列有3个，b酶的识别序列有2个，A正确；B、a酶与b酶切出的黏性末端相同，用DNA连接酶可以将它们连接起来，B错误；C、限制酶切割的化学键都是
25、磷酸二酯键，C正确；D、a酶和b酶切割后形成的黏性末端相同，在DNA连接酶的作用下可连接形成AGATCCTCTAGG或GGATCTCCTAGA所以用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，所得DNA分子中AGATCCTCTAGG序列会明显增多，D正确故选：A点评：本题结合图表，考查基因工程的原理及技术，重点考查限制酶的相关知识，要求考生识记限制酶的特点及作用，能比较图中a酶和b酶的识别序列，明确两者切割后产生的黏性末端相同；能分析表中数据，明确a酶有3个识别位点，b酶有2个识别位点，再结合所学的知识准确判断各选项4（3分）（2011秋涟水县校级期末）应用基因工程
26、技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的这里的基因探针是指（）A用于检测疾病的医疗器械B用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C合成球蛋白的DNAD合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段考点：基因工程的原理及技术 分析：探针是指能与特定靶DNA分子发生特异性作用、并能被特定方法探知的分子基因探针是指用放射性同位素或荧光分子标记的DNA单链，利用碱基互补配对原则，检测目的基因是否导入受体细胞的染色体DNA中解答：解：A、基因探针不是检测疾病的医疗器械，A错误；B、在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作标记可以作为探针，B正确；C、基因探针是单链DNA，可用于检测特定的核苷酸
27、序列，C错误；D、基因探针是单链DNA，不是合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段，D错误故选：B点评：本题考查基因工程的相关知识，特别是基因探针的概念，要求考生熟记基因探针的概念，掌握基因探针的实质及作用，再运用所学的知识对选择作出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查5（3分）（2012秋重庆期末）利用基因工程技术可使大肠杆菌生产人的胰岛素，下列相关叙述正确的是（）A人和大肠杆菌在合成胰岛素时，转录和翻译的场所都是相同的B所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C通过检测，大肠杆菌中没有胰岛素产生则可判断重组质粒未导入受体菌D选用大肠杆菌作为受体细胞主要原因是其繁殖快、易培养、产量高考点：基
28、因工程的原理及技术 分析：1、大肠杆菌是原核生物，原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核（没有核膜、核仁和染色体）；原核细胞只有核糖体一种细胞器；原核细胞中，转录和翻译在相同时空中进行，而真核生物的转录和翻译过程在不同时间和空间进行2、DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来3、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因
29、导入受体细胞；目的基因的检测与表达其中基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，该过程需要限制酶和DNA连接酶解答：解：A、人的胰岛素基因在细胞核中，因此转录发生在细胞核中，而翻译发生在细胞质中的核糖体上，A错误；B、酶具有专一性，一种限制酶只能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，B错误；C、通过检测，大肠杆菌中没有胰岛素产生只能确定目的基因没有翻译成蛋白质，不能判断重组质粒未导入受体菌，C错误；D、选用大肠杆菌作为受体细胞是因为其具有繁殖快、易培养、产量高，且遗传物质相对较少，D正确故选：D点评：本题考查基因工程、原核细胞和真核细胞的形态和结构异同，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作
30、步骤；识记原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同，能运用所学的知识准确判断各选项6（3分）（2015春安丘市校级期中）“筛选”是很多生物试验过程中的重要环节下列叙述中错误的是（）A单倍体育种中筛选杂种植株的花粉B多倍体育种中筛选秋水仙素处理后的植株C单克隆抗体制备过程中需要两次筛选D基因工程中筛选含有目的基因的受体细胞考点：单倍体诱导与利用；基因工程的应用；单克隆抗体的制备过程 分析：1、花药产生的单倍体植株，体内只含有一个染色体组，只会表现一个基因控制的性状，通过观察子代性状即可确定类型2、多倍体育种过程中，经过秋水仙素处理的幼苗必须经过筛选选择染色体数量加倍的个体进行培养；3、单克隆抗体制备
31、过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞第二次筛选：利用多孔板法和抗原抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞解答：解：A、单倍体育种培养的花药产生的单倍体植株，体内只含有一个染色体组，只会表现一个基因控制的性状，通过观察子代性状即可确定类型，所以对于培养的花药不需要经过筛选，A错误；B、因为细胞的分裂是不同步的，用秋水仙素处理不一定所有细胞、幼苗的染色体数目都加倍，所以多倍体育种过程中，经过秋水仙素处理的幼苗必须经过筛选选择染色体数量加倍的个体进行培养，B正确；C、单克隆抗体制备过
32、程中的两次筛选：第一次筛选：获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），第二次筛选：获得产生特定抗体的杂交瘤细胞，C正确；D、基因工程育种过程中，带有目的基因的载体有没有导入受体细胞，需要在特定的选择培养基上或者是在下一代植株中进行选择，D正确；故选：A点评：本题考查了基因工程的基本操作程序、单倍体育种、胚胎移植，多被体育种，基因工程等意在考查考生的识记和理解能力，难度适中7（3分）（2012泰州一模）云南农业大学研究人员培育出10头猪蹄发荧光的转基因猪主要研究过程是：将瘦素基因 与绿色荧光蛋白基因导入猪胎儿成纤维细胞；将转基因的成纤维细胞核移植到去核的猪卵 母细胞，并培育
33、形成早期胚胎；将胚胎移植到代孕母猪体内，最终获得转基因猪在这一过程中不必进行的是（）A将瘦素基因与绿色荧光蛋白基因拼接，并构建基因表达载体B培养并筛选处于减数第二次分裂中期的猪次级卵母细胞C筛选出转基因猪胎儿成纤维细胞和转基因克隆胚胎D给代孕母猪注射环孢霉素A阻止T细胞增殖，以利于代孕母猪接受胚胎考点：基因工程的应用 分析：表达载体的构建包括目的基因、启动子、终止子、标记基因核移植技术成功率较低，受体细胞要用处于减数第二次分裂中期的卵母细胞解答：解：A、一个表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子、标记基因瘦素基因是目的基因，绿色荧光蛋白基因是标记基因需要用DNA连接酶连接构建基因表达载体故
34、A正确B、胚胎工程中受体细胞要用处于减数第二次分裂中期的卵母细胞故B正确C、待转移的核是转基因的成纤维细胞核核移植技术成功率较低，故要筛选转基因的成纤维细胞核和转基因克隆胚胎故C正确D、胚胎移植过程中需对供、受体进行同期发情处理，处理后的受体对移入的胚胎基本上不发生免疫排斥反应，所以不需要注射环孢霉素A阻止T细胞的增殖故D错误故选D点评：本题考查基因工程和胚胎工程的相关内容意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力8（3分）（2014春晋江市校级期末）水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly和S
35、er构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（）A促使目的基因导入受体细胞中B促使目的基因在受体细胞中复制C筛选出获得目的基因的受体细胞D使目的基因容易成功表达考点：基因工程的原理及技术 分析：水母发光蛋白的基因表达出水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly和Ser构成发光环，能够检测出目的基因的作用解答：解：A、标记基因表达出的蛋白质不能促使目的基因导入受体细胞中，A错误；B、标记基因表达出的蛋白质不能促使目的基因在受体细胞中复制，B错误；C、发光蛋白作为标记基因，便于重组后重组DNA分子的筛选，也就是有利于对目的基因是否导入进行
36、检测，C正确；D、目的基因的表达与标记基因无关，D错误故选：C点评：本题考查标记基因的作用，意在考查考生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成一定知识网络的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力9（3分）（2015春安丘市校级期中）20世纪90年代开始兴起的DNA疫苗被称为第三次疫苗革命，医学专家将含病毒抗原基因的重组质粒注入人体表达后使人获得免疫能力下列叙述不正确的是（）A重组质粒在内环境中表达后引起机体免疫反应B病毒抗原基因在体内表达时需要RNA聚合酶C病毒抗原基因与质粒重组时需要DNA连接酶D注射DNA疫苗后机体会产生相应的记忆细胞考点：基因工程的应用 分析：基因工程的操
37、作工具包括：限制酶、DNA连接酶、运载体体液免疫过程：（1）感应阶段：除少数抗原可以直接刺激B细胞外，大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；（2）反应阶段：B细胞接受抗原刺激后，开始进行一系列的增殖、分化，形成记忆细胞和浆细胞；（3）效应阶段：浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合，发挥免疫效应注射疫苗，引起人体的免疫反应，在体内产生抗体和记忆细胞，进而获得了对该抗原的抵抗能力解答：解：A、重组质粒在细胞中表达后分泌到细胞外，表达产生的蛋白质在内环境中作为抗原引起机体免疫反应，A错误；B、病毒抗原基因在体内表达时的转录过程中需要
38、RNA聚合酶，B正确；C、病毒抗原基因与质粒重组时需要DNA连接酶，C正确；D、注射DNA疫苗后抗原基因表达，引起机体发生特异性免疫反应，产生相应的记忆细胞，D正确故选：A点评：本题以第三次疫苗革命为载体，考查了基因工程和人体免疫的相关知识，考生要能够识记基因工程中的工具酶的作用；明确RNA聚合酶将用于合成RNA；识记免疫的相关知识等，然后对选项逐项分析10（3分）（2015春安丘市校级期中）限制性内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，不同的限制性内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切现以3种不同的限制性内切酶对6.2kb大小的线状DNA进行剪切后用凝胶电泳分离各核酸片段，实验结果如图所示：请问
39、：3种不同的限制性内切酶在此DNA片段上相应切点的位置是（）ABCD考点：基因工程的原理及技术 分析：1、题均根据各种大小的DNA分子片段类型看有几个切点；2、再根据两种酶组合后DNA分子片段大小将上述各自的切点移位组合解答：解：A、B酶将DNA序列并进行剪切，长度为1.0和5.2，切点1个，而图谱中B切点位0.3和5.9，A错误；B、C酶将DNA序列并进行剪切，长度为3.6、1.4和1.2，切点2个，而图谱中C切点位3.6和2.6，B错误；C、A酶将DNA序列并进行剪切，长度为4.2、1.7和0.3，切点2个，而图谱中A切点位0.3和5.9，C错误；D、据图分析，A酶切点2个，B酶切点1个，
40、C酶切点2个，而且长度符合，D正确故选：D点评：本题考查限制酶的相关知识，意在考查学生识图能力、信息的提取与应用能力、通过比较与综合做出合理判断的能力等11（3分）（2015春岐山县期中）1抗胰蛋白酶缺乏症是北美常见的一种单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡利用基因工程技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人1抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更容易获得这种酶下列关于该过程的叙述中错误的是（）A载体上绿色荧光蛋白基因（GFP）的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞B将目的基因导入羊膀胱细胞中，将会更加容易得到1抗胰蛋白酶C培养出的转基因羊的所有细胞
41、中都含有该目的基因，故该羊有性生殖产生的后代也都能产生1抗胰蛋白酶D目的基因与载体重组过程需要DNA连接酶的催化作用考点：基因工程的原理及技术 分析：基因工程技术的基本步骤：1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法4、目的基因的检测与鉴定：（1）
42、分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质抗原抗体杂交技术（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等解答：解：A、GEP基因为标记基因，作用是筛选出含有目的基因的受体细胞，A正确；B、将目的基因导入羊膀胱细胞中，可以从尿液中提取到1抗胰蛋白酶，B正确；C、目的基因在受体细胞中不是成对的，只有一个，所以有性生殖产生的后代可能没有目的基因，则也就不能产生1抗胰蛋白酶，C错误；D、目的基因与载体重组过程需要DNA连接酶的催化作用，D正确故选：C点评：本题考查基因工程的相关知识
43、，要求考生识记基因工程的原理、使用的工具及操作步骤，掌握各步骤中应注意的细节，再结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查12（3分）（2013安徽）如图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图下列叙述正确的是（）A根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目B外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制C重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接D放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置考点：基因工程的原理及技术；用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落 分析：分析题图：图示为通过DNA分子杂交鉴定含有某特
44、定DNA的细菌克隆示意图，先采用DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌，再采用放射自显影显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置，最后进行克隆化培养解答：解：A、根据培养皿中菌落数只能估算样品中含有的活菌数目，A错误；B、外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达，而复制需要有复制原点，B错误；C、重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子的碱基互补配对原则，C错误；D、放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置，因为菌落附着在膜上的位置是固定的，放射自显影后可以一一对应起来，D正确故选：D点评：本题结合题图，考查细菌培养和基因工程的有关知识，要求考生识记基
45、因工程的技术和原理、识记细菌培养的相关知识，能运用所学的知识对各选项作出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查13（3分）（2005青浦区一模）如果科学家通过转基因工程，成功地把一位女性血友病患者的造血细胞进行改造，使其凝血功能恢复正常，那么后来她所生儿子中（）A全部正常B一半正常C全部有病D不能确定考点：基因工程的应用 分析：体细胞发生的变异不能通过有性生殖传给子代，生殖细胞由于遗传物质的改变引起的变异可以通过有性生殖遗传给后代解答：解：血友病是伴X染色体隐性遗传病，通过基因工程对某女性血友病患者的造血细胞进行改造，使其凝血功能恢复正常，由于只改变体细胞（造血干细胞）的遗传物质，没有改变生
46、殖细胞的遗传物质，因此体细胞发生的变异不能通过有性生殖遗传给后代，故所生的儿子中都患血友病故选：C点评：体细胞发生的变异不能通过有性生殖传给子代，生殖细胞由于遗传物质的改变引起的变异可以通过有性生殖遗传给后代，学生对该内容存在误区14（3分）（2014嵊州市校级一模）上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，以下与此有关的叙述正确的是（）A“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物B“提高基因的表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因C只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白
47、，因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中是纯合的D转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，故不能合成人白蛋白考点：基因工程的应用 分析：转基因动物是指以实验方法导入外源基因，在染色体组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物“提高基因的表达水平”是指设法使牛乳腺细胞中的人蛋白基因更好的转录、翻译成更多的药物蛋白；人白蛋白基因导入的是牛的受精卵，随着受精卵的分裂、分化，存在于牛的每个细胞中，只是在牛的乳腺细胞中人白蛋白基因表达解答：解：A、转基因动物是指以实验方法导入外源基因，在染色体组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物体细胞中出现了新基因的动物不一定是转基因动物，基因突变也可能出现新基因
48、，这样的动物不能称为转基因动物，A错误；B、“提高基因的表达水平”是指设法使牛乳腺细胞中的人蛋白基因更好的转录、翻译成更多的药物蛋白，B错误；C、人白蛋白基因导入的是牛的受精卵，随着受精卵的分裂、分化，存在于牛的每个细胞中，只是在牛的乳腺细胞中人白蛋白基因表达，C错误；D、转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，即不表达，故不合成人白蛋白，D正确；故选：D点评：本题考查基因工程的应用等相关知识，考查考生的理解能力和综合分析能力，难度适中15（3分）（2015春龙海市校级期中）在现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是（）A对植物的离体组织进行培养，大规模培育优良品种B将
49、鼠的骨髓瘤细胞与已免疫的B淋巴细胞融合，制备单克隆抗体C利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜甘蓝”D将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株考点：植物组织培养的概念及原理；基因工程的应用；植物体细胞杂交的过程；单克隆抗体的制备过程 分析：现代生物技术的应用中，有许多技术是需要筛选和检测的，如制备单克隆抗体时，需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，还需要进行抗体阳性检测得到能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞；植物体细胞杂交过程中，需要筛选出杂种细胞进行组织培养；转基因技术中，需要筛选重组子和检测目的基因是否导入和表达解答：解：A、植物组织培养属于无性生殖，所以对植物的离体组织进行培养，大规模培育优良品
50、种不需要进行检测与筛选，A正确；B、将鼠的骨髓瘤细胞与已免疫的B淋巴细胞融合，需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，还需进行抗体阳性检测，得出能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，B错误；C、利用植物细胞工程技术培育“萝卜一甘蓝”时，需要筛选出萝卜一甘蓝杂种细胞进行培养，C错误；D、将抗虫基因导入植物细胞时，需要检测目的基因是否导入受体细胞和目的基因是否表达，D错误故选：A点评：本题综合考查植物组织培养、制备单克隆抗体、植物体细胞杂交和转基因技术等知识，要求考生识记相关知识，掌握这些技术的流程，能判断出这些生物技术的应用中，是否需要检测与筛选，属于考纲识记和理解层次的考查16（3分）（2015春安丘市校级
51、期中）利用生物工程改造生物特性，从而生产人类所需的产品下列有关措施的叙述中，不正确的是（）A利用基因突变原理培育成青霉素高产菌株B利用基因突变原理培育成生产人干扰素的酵母菌C利用基因工程手段培育成生产人胰岛素的大肠杆菌D利用细胞工程技术培育成生产单克隆抗体的细胞系考点：基因工程的应用；诱变育种；单克隆抗体的制备过程 分析：1、四种育种方法的比较如下表：杂交育种诱变育种单倍体育种多倍体育种方法 杂交自交选优 辐射诱变、激光诱变、化学药剂处理花药离体培养、秋水仙素诱导加倍 秋水仙素处理萌发的种子或幼苗原理 基因重组基因突变 染色体变异（染色体组先成倍减少，再加倍，得到纯种） 染色体变异（染色体组成
52、倍增加）2、基因工程是指按照人类的愿望，将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载体重组后转入细胞内进行扩增，并表达产生所需蛋白质的技术基因工程能够打破种属的界限，在基因水平上改变生物遗传性，并通过工程化为人类提供有用产品及服务基因工程的原理是基因重组解答：解：A、利用基因突变原理培育成青霉素高产菌株，A正确；B、利用基因工程即基因重组原理培育成生产人干扰素的酵母菌，B错误；C、利用基因工程手段培育成生产人胰岛素的大肠杆菌，C正确；D、利用动物细胞融合培育成生产单克隆抗体的细胞系，D正确故选：B点评：本题考查育种的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能
53、力17（3分）（2011江苏）关于现代生物技术应用的叙述错误的是（）A蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养考点：蛋白质工程；组织培养基的成分及作用；动物细胞与组织培养过程；动物体细胞克隆；单克隆抗体的制备过程 分析：蛋白质工程与基因工程不同，基因工程产生的是自然界中原有的蛋白质，而蛋白质工程能创造出自然界没有的蛋白质体细胞杂交技术目前主要用于制备单克隆抗体，克隆动物涉及了细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术解答：解：A、蛋白质工程可通过对现有基因进行改造合而合成自然界
54、中不存在的蛋白质，A正确；B、克隆动物利用了细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，体细胞杂交技术目前主要用于制备单克隆抗体，B错误；C、茎尖和根尖等分生区几乎不含病毒，所以将植物分生区（茎尖、根尖等）进行组织培养可以获得脱毒苗，C正确；D、动物细胞培养技术可为动物的转基因技术提供受体细胞等，并且基因工程中的受精卵需应用动物细胞培养技术培养成早期胚胎进行移植，D正确故选：B点评：本题综合考查蛋白质工程、体细胞杂交和动物细胞培养等相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力，难度适中18（3分）（2006秋丰台区期末）既可用于基因重组技术又可用于细胞融合技术的是（
55、）A病毒B纤维素酶C聚乙二醇D质粒考点：细胞融合的概念及方法；基因工程的原理及技术 分析：基因重组技术中工具有限制酶、DNA连接酶和运载体，运载体包括质粒、动植物病毒和噬菌体细胞融合技术中细胞融合的方法有物理法、化学法和生物法，物理法有离心、振动和电刺激，化学法一般用聚乙二醇作为促溶剂，生物法中一般使用灭活的病毒解答：解：A、基因重组技术中可以用动植物病毒或噬菌体作为运载体，也可以用灭活的病毒促进动物细胞的融合，A正确；B、纤维素酶只用在植物体细胞杂交过程中植物细胞壁的去除，B错误；C、聚乙二醇只用作细胞融合过程中促进细胞融合，C错误；D、质粒只用作基因重组技术中的运载体，D错误故选：A点评：
56、本题考查了基因工程和细胞融合过程中涉及的方法、工具等知识，意在考查考生的识记能力和区分能力，考生要善于总结两者的异同点，属于容易题二.解答题19（20分）（2015房山区一模）埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别EBO结构及基因组如图1所示目前尚无针对该病毒的特效药或疫苗（1）埃博拉病毒（EBO）的遗传物质是RNA，EBO病毒容易变异的原因是RNA是单链结构，稳定性较差（2）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴（效应B或浆）细胞与鼠的瘤细胞进行杂交，获得纯净的单一品种抗体，其特点是特异性强
57、、灵敏度高、反应快（产量大），可以用此抗体与药物制成“生物导弹”，抗击埃博拉病毒（EBO）（3）图2表示转基因技术生产埃博拉病毒蛋白疫苗与重组病毒粒子疫苗的基本过程该技术的目的基因最好选择GP蛋白基因（GP或GP基因）实验发现，用昆虫细胞替代酵母菌承担辅助重组质粒与重组病毒的共转染，也能收集到目的基因表达的蛋白质，这一现象说明不同生物共用一套遗传密码以EBO病毒包膜蛋白作为疫苗比较安全，其原因是蛋白质不具侵染性，不会破坏细胞结构重组病毒中须除去腺病毒复制激活基因（E），目的是使重组病毒不能在人体内大量复制，提高了疫苗的安全性考点：单克隆抗体的制备过程；遗传信息的转录和翻译；人体免疫系统在维持稳
58、态中的作用；基因工程的原理及技术 分析：分析图1：EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突，其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别分析图2：图2表示转基因技术生产埃博拉病毒蛋白疫苗与重组病毒粒子疫苗的基本过程解答：解：（1）看图1可知：埃博拉病毒（EBO）的遗传物质是RNA，EBO病毒容易变异的原因是RNA是单链结构，稳定性较差（2）经EBO免疫后小鼠体内可获取浆细胞，其与鼠的瘤细胞进行杂交，获得纯净的单一品种抗体，即单克隆抗体，其特点是特异性强、灵敏度高、反应快（产量大），（3）因为EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突，其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别故用转基因技术生产埃博
59、拉病毒蛋白疫苗，目的基因最好选择GP蛋白基因用昆虫细胞替代酵母菌承担辅助重组质粒与重组病毒的共转染，也能收集到目的基因表达的蛋白质，这一现象说明不同生物共用一套遗传密码以EBO病毒包膜蛋白作为疫苗比较安全，其原因是蛋白质不具侵染性，不会破坏细胞结构重组病毒中须除去腺病毒复制激活基因（E），目的是使重组病毒不能在人体内大量复制，提高了疫苗的安全性故答案为：（1）RNA RNA是单链结构，稳定性较差（2）B淋巴（效应B或浆） 特异性强、灵敏度高、反应快（产量大）（3）GP蛋白基因（GP或GP基因）不同生物共用一套遗传密码蛋白质不具侵染性，不会破坏细胞结构大量复制点评：本题结合图解，考查基因工程和细
60、胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具、操作步骤，掌握各步骤的相关细节；识记单克隆抗体的制备过程，能结合图中和题中信息准确答题，综合性较强，有一定难度20（15分）（2015春安丘市校级期中）如图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转人赖氨酸基因的克隆牛“织女”的大致过程，请据图回答问题（1）克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有：核移植技术、动物细胞培养、胚胎移植 （至少答出两项）（2）实施基因工程包括四个基本操作步骤，其核心步骤是基因表达载体的构建，实现过程的常用方法是显微注射法（3）现有长度为1000碱基对（by）的DNA分子，用限酶E
61、coRI酶切后得到的DNA分子仍是1000by，说明此DNA分子为环状 （填“线性”或“环状”），用Kpn I单独酶切得到400by和600by两种长度的DNA分子，用EcoR、Kpn同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子请绘出该DNA分子的酶切图谱的示意图： （请在图中标明限制酶的类型、酶切位点和碱基长度）考点：基因工程的原理及技术 分析：分析题图：是取自黑白奶牛的成纤维细胞；表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞；是采用胰蛋白酶处理后得到的单个细胞；表示囊胚；表示胚胎分割技术；表示胚胎移植过程；表示妊娠产生转人赖氨酸基因的克隆牛“织女”解答：解：（1）从图示可看出该流
62、程涉及的生物技术有：核移植技术、动物细胞培养，早期胚胎培养、胚胎移植（2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞（3）用限制性核酸内切酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000by，由此可推知该DNA分子为环状DNA；用Kpnl单独酶切会得到600by和400by两种长度的DNA分子和用EcoRI，Kpnl同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子，如图：故答案为：（1）核移植技术、动物细胞培养、胚胎移植 （2）基因表达载体的构建显微注射法（3）环状 点评：本题考查胚胎工程相关知识，意在考查学生是否理解实验方法和操作步骤，能否把所学
63、知识的要点，知识间的内在联系，形成知识的网络结构；关注科学、技术在社会发展中的作用21（15分）（2015乌鲁木齐模拟）人红细胞生成素（htPA）是一种重要的蛋白质，它可以治疗贫血症，可通过转基因技术大量生产如图是通过转基因羊生产红细胞生成素的过程请据图回答：（1）若需在短时间内获得较多的红细胞生成素基因，通常采用PCR技术将该基因导入受精卵常用的方法是显微注射法（2）红细胞生成素基因与同种质粒用限制性核酸内切酶切割后，通过DNA连接酶连接，构建基因表达载体检测目的基因是否已插入受体细胞的DNA，可采用DNA分子杂交技术（3）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵采
64、集的精子需要经过获能处理，才具备受精能力（4）为了获得多个相同的转基因母羊，常采用胚胎分割的方法，该方法操作的最佳时期是胚胎发育的桑椹胚或囊胚期考点：基因工程的应用；胚胎移植 分析：1、据图分析，该图包括基因表达载体的构建，将目的基因导入受体细胞，早期胚胎培养、胚胎移植2、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：目的基因的获取，基因表达载体的构建，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测与鉴定基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因3、胚胎移植时供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境胚胎移植的最佳时期是胚胎发育的桑椹胚或囊胚期解答：解：（1）若需在短时间内获
65、得较多的红细胞生成素基因，通常采用PCR技术将该基因导入受精卵常用的方法是显微注射法（2）红细胞生成素基因与同种质粒用限制性核酸内切酶切割后，通过DNA连接酶连接，构建基因表达载体检测目的基因是否已插入受体细胞的DNA，可采用DNA分子杂交技术（3）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵，采集的精子需要经过获能处理，才具备受精能力（4）为了获得多个相同的转基因母羊，常采用胚胎分割的方法，该方法操作的最佳时期是胚胎发育的桑椹胚或囊胚期故答案为：（1）PCR 显微注射法（2）同种 DNA分子杂交（3）超数排卵 获能（4）胚胎分割 桑椹胚或囊胚点评：本题考查基因工程、胚胎
66、工程等相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力22（12分）（2015春安丘市校级期中）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断如图1是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，图表表示杂种细胞中基因的存在与人体染色体间的关系（注：“+”表示有，“”表示无），请分析回答：杂种细胞系一二三四五小鼠基因A+B+C+小鼠染色体1+2+3+（1）制备单克隆抗体用到的生物学技术有动物细胞培养和动物细胞融合图1中给小鼠注射的HCG相当于抗原，过程常采用的方法有（至少答2点）PEG，灭活的病毒（2）科研
67、人员发现形成的杂种细胞中小鼠的染色体会随机丢失，各种杂种细胞保留小鼠染色体的种类和数量是不同的，对杂种细胞进行染色体和基因关系分析的结果如图2据此推测，2号染色体上有A、C基因，能无限增殖的各种细胞系有一二三四五（3）在之前要进行抗体筛选的目的是选出既能无限增殖又能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞，在此过程生产的单克隆抗体可以与人绒毛膜促性腺激素特异性结合，从而诊断早孕考点：单克隆抗体的制备过程 分析：分析题图：图示表示单克隆抗体的制备过程其中表示细胞融合过程；表示用培养基筛选出杂交瘤细胞；表示筛选出既能产生抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞；表示克隆化培养分析表格：2号染色体存在时，A和C基因也存在，
68、而2号染色体消失时，A和C基因也消失，说明2号染色体上有A、C基因表中含有基因B的除了杂种细胞系四外，还有杂种细胞系一解答：解：（1）制备单克隆抗体用到的生物学技术有动物细胞融合和动物细胞培养给小鼠注射的HCG相当于抗原是诱导细胞融合过程，促进动物细胞融合的方法有化学的PEG，物理的电刺激、离心、振荡，生物的灭活的病毒（2）分析表格，2号染色体存在时，A和C基因也存在，而2号染色体消失时，A和C基因也消失，说明2号染色体上有A、C基因表中杂种细胞系均能无限增殖（3）表示克隆化培养，在此之前要进行抗体筛选，其目的是选出既能无限增殖又能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞，在此过程生产的单克隆抗体可以与人
69、绒毛膜促性腺激素（或“HCG”）特异性结合，从而诊断早孕故答案为：（1）动物细胞培养和动物细胞融合 抗原 PEG、电刺激、离心振荡、灭活的病毒（2）A、C 一二三四五（3）选出既能无限增殖又能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞 人绒毛膜促性腺激素（或“HCG”）点评：本题考查单克隆抗体制备的相关知识，意在考查考生的识记能力和识图能力；能分析表格提取有效信息的能力；能理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，解决生物学问题的能力23（12分）（2015春安丘市校级期中）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗
70、原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：（1）过程代表的过程是逆转录过程代表的过程是获取目的基因（A基因）（2）过程构建A基因重组载体时，必须使用DNA连接酶、限制酶两种工具酶（3）过程发生的生理过程是增殖、分化（4）过程的实验技术名称是细胞融合技术，过程依据的原理是膜的流动性需用灭活的病毒促进X的形成（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的A蛋白所制备的疫苗对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒核酸序列进行比较；或用图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测考点：单克隆抗体的制备过程；基因工程的原理及技术 分析：分析题图：图示为疫苗生产和抗
71、体制备的流程之一，其中表示逆转录过程；是获取目的基因（A基因）的过程；是基因表达载体的构建过程；是将目的基因导入受体细胞的过程；是从小鼠皮下获取已经免疫的B细胞的过程；表示B细胞的增殖和分化过程；是细胞融合过程；X为杂交瘤细胞解答：解：（1）由以上分可知是逆转录； 过程代表的过程是：获取目的基因（A基因）的过程（2）过程构建A基因重组载体时，必须使用限制酶、DNA连接酶（3）过程发生的生理过程是增殖、分化（4）过程所用的实验技术是细胞融合技术，过程依据的原理是膜的流动性，需用灭活的病毒促进杂交瘤的形成（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的A蛋白所制备的疫苗对该传染病疑似
72、患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒的核酸序列，与已知病毒进行核酸序列比较；或采用抗原抗体杂交法，即用图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测故答案为：（1）逆转录 获取目的基因（A基因）（2）限制酶 DNA连接酶（3）增殖 分化（4）细胞融合技术 膜的流动性 灭活的病毒（5）A蛋白 核酸序列（或基因序列或RNA序列或核糖核苷酸序列） 抗A蛋白的单克隆抗体点评：本题结合疫苗生产和抗体制备的流程图，考查基因工程、动物细胞融合技术、单克隆抗体等知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，识记单克隆抗体的制备过程，能准确判断图中各过程的名称24（10分）（2015春安丘市校级期中）如图是利用
73、奶牛乳汁生产人血清白蛋白的图解，根据下图回答：（1）在形成图中的过程中，我们称为目的基因，获取的途径主要有从基因文库中获取、PCR技术扩增、人工合成（2）人血清白蛋白的生产说明该工程突破了自然界物种之间的生殖隔离，在基因表达载体中，人的血清白蛋白基因前端必须要有启动子（3）对处理后的分散细胞进行培养，通常要在培养液中添加一定量的抗生素，此外应定期更换培养液，以便保证被培养的细胞处于无毒、无菌的环境中考点：基因工程的应用；胚胎移植 分析：分析题图：是动物细胞培养过程，需要先用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞；是目的基因（血清白蛋白基因）；表示采用转基因技术，将目的基因（血清白蛋白基因）导入受体细胞的
74、过程；是囊胚；采用了胚胎分割技术，对囊胚进行胚胎分割时，要将内细胞团均等分割；表示胚胎移植过程；是转基因生物（乳腺生物反应器）解答：解：（1）在形成图中重组细胞的过程中，我们称为目的基因，获取的途径主要有从基因文库中获取、PCR技术扩增、人工合成（2）人血清白蛋白的生产说明该工程突破了自然界物种之间的生殖隔离；在基因表达载体中，人的血清白蛋白基因前端必须要有启动子，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度（3）动物细胞培养需要在在培养液中添加一定量的抗生素，防止培养过程中杂菌污染此外应定期更换培养液，以清除代谢废物，保证被培养的细胞处于无毒、无菌的环境故答案为：（1）目的基因 从基因文库中获
75、取、PCR技术扩增、人工合成（2）生殖隔离 启动子（3）抗生素 更换营养液 无毒、无菌点评：本题结合乳腺生物反应器的制备过程图，综合考查基因工程意义，要求考生掌握基因工程的操作步骤，识记目的基因获得的方法；识记并理解动物细胞培养的条件25（12分）（2015春安丘市校级期中）A、转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示（至代表过程，A至C代表结构或细胞）：（1）图中过程用到的酶是DNA连接酶，所形成的B叫做基因表达载体（重组质粒）（2）过程常用CaCl2溶液（或Ca2+）处理农杆菌，使之成为感受态细胞，利于完成转化过程（3）图中过程需
76、要用到的激素是生长素和细胞分裂素（4）在分子水平上，可采用抗原抗体杂交的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原B、野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯（1）专家在实验中，需用到的酶主要有纤维素酶和果胶酶等（2）专家在实验中，用于诱导融合使用的化学试剂是聚乙二醇（PEG）（3）对于农民，种植杂交系马铃薯除可获得较高的收成外，还有什么优点？（要求写出两点）可少施农药；可在盐碱地区种植考点：基因工程的应用；植物体细胞杂交的过程 分析：分析题图：表示基因表
77、达载体的构建过程；将目的基因导入受体细胞（农杆菌转化法）；表示植物组织培养过程，其中是脱分化过程、是再分化过程图中A是目的基因、B是基因表达载体（由启动子、终止子、目的基因和标记基因等部分构成）、C是愈伤组织解答：解：A、（1）解：（1）表示基因表达载体的构建过程，需用DNA连接酶将目的基因和运载体（质粒）连接形成重组质粒B是基因表达载体（2）目的基因导入微生物需要用Ca2+处理，使其成为感受态细胞（3）植物组织培养过程，除需要添加营养物质外，还需要添加生长素和细胞分裂素（4）检查转基因草莓果实提取液中有无相应抗原，采用抗原抗体杂交的方法检测，如出现杂交带，表明已出现相应产物B、（1）植物细胞
78、壁有纤维素和果胶组成的，植物体细胞杂交需要去除细胞壁，利用酶解法，如用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁（2）诱导植物细胞融合的方法：物理法：离心、振动、电激；化学法：聚乙二醇（PEG）（3）因为野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，所以种植杂交系马铃薯除可获得较高的收成外，可少施农药和可在盐碱地区种植故答案为：A、（1）DNA连接酶基因表达载体（重组质粒）（2）CaCl2溶液（或Ca2+）感受态（3）生长素和细胞分裂素（4）抗原抗体杂交B、（1）纤维素酶 果胶酶（2）聚乙二醇（PEG）（3）可少施农药；可在盐碱地区种植点评：本题以乙肝疫苗为素材，考查基因工程步骤、植物组织培养、植物体细胞杂交，意在考查学生的识图和理解能力，属于中档题
