1、专题2 微生物的培养与应用一 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1 制备流程： 倒平板（1）计算100mL培养基中各种成分的用量：牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水 （2）称量时的动作要求是： ，原因： （3）溶化时需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？ （4）灭菌 培养基和培养皿的灭菌方法是否一样？ （5）倒平板仔细阅读教材中“倒平板操作”的图，文，初步体会操作要点。 在火焰旁右手 ，左手 ；使锥形瓶的瓶口 ；左手将培养皿 ，右手 ，立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后，将平板 。思考：倒平板为什么需要在酒精灯火焰附近操作进行？二 纯化大肠杆菌1常用的微生物接种方法有 和 ；还有 和 等。这些技术的核心都是要
2、 ，保证 2平板划线法：是通过 在琼脂固体培养基表面 的操作，将 的菌种逐步 分散到培养基的表面。最后可以分离到 由 细胞繁殖而来的肉眼可见的 ，这就是 。阅读P18“平板划线操作”的图，文字，初步了解该操作的方法。1采用什么办法来估计培养基的温度已经冷却到50左右？2锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？3平板冷凝后，为什么要将平板倒置？4在倒平板的过程中，如果皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板还能用来培养微生物吗？为什么？5 如何判断培养基的制备是否成功？二 纯化大肠杆菌（一）平板划线法结合P18“平板划线操作”的图，文字，整理平板划线操作的操作步骤将 在酒精灯火焰上灼烧直至 。在 旁冷却接种
3、环，并打开盛有菌液的试管的 。将试管口通过 达到 的目的。将冷却的接种环伸入到 ，沾取一环 。将试管口再次通过 后塞上 。左手将皿盖打开 ，右手将沾有菌种的接种环 ，划 ，盖上皿盖，不要划破 。灼烧接种环，冷却后从 划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将 相连。将平板 ， 培养。（1）灼烧接种环的目的灼烧时间目的操作的第一步每次划线前划线操作结束后（2）灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？（3）在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？（二）稀释涂布平板法阅读教材P19“稀释涂布平板法”的相关内容，整理归纳出稀释涂布平板法的操作过程1稀释
4、涂布平板法：将菌液先进行一系列的 ，然后将不同稀释度的菌液分别 到 培养基的表面，进行培养。如果稀释度足够高，则能在培养基表面形成 菌落。该方法分为两个环节： 和 2 系列稀释操作 认真阅读教材P19关于该操作的图，文字，解决下列问题：（1）该操作过程中涉及到了哪些无菌操作的措施？（2）如果原始菌液的细菌密度是108个/Ml，请计算：理论上6支试管中的细菌密度分别是多少？3 涂布平板操作（1）涂布平板操作过程中使用的接种工具是什么？（2）该操作过程中涉及到了哪些无菌操作的措施？（二）稀释涂布平板法结合预习内容，观看视频，思考以下问题，整理好答案1系列稀释操作向试管中注入菌液时，为什么要用手指轻
5、压移液管上的橡皮头，吹吸三次？2涂布平板操作 准确理解教材中的2个注意事项3两种纯化细菌的方法的比较项目优点缺点适用范围平板划线法可以观察 特征，对混合菌进行 计数适用于 菌稀释涂布平板法可以计数，可以观察菌落特征吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于 菌和 菌（三）微生物的培养 接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37恒温箱内培养，观察记录结果. 思考？为什么放置一个未接种的培养基于37恒温箱内培养三结果分析与评价1 如何判断大肠杆菌的分离纯化成功了？2未接种的培养基表面如果有菌落生长，说明了什么？3如果接种后的培养基上有不同形态的菌落，请分析原因4培养12h和24h后的菌落大小，菌落分布位置一样吗？分析原因？四 菌种的保藏完成教材P20“课题延伸”的学习，填写下表保藏方法保藏对象培养基保藏条件缺点临时保藏法甘油管保藏法
