1、本作品版权由张运安老师所有,授权予北京校园之星科技有限公司，任何机构或个人均不得擅自复制、传播。本公司热忱欢迎广大一线教师加入我们的作者队伍。有意者请登录高考资源网()版权所有，盗用必究！实验九、DNA的粗提取与鉴定一、教学目标 知识方面 1.初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。2.观察提取出来的DNA物质。情感态度与价值观方面1通过完成实验，激发学生学习兴趣，对科学研究产生更加积极的心态。 能力方面 1. 学生在完成该实验的过程中，进一步丰富学生的实验技能，提高动手能力和熟练操作的技能。2. 学生通过该实验，对物质的提取和分离以及鉴定的实验有了进一步的认识。二、实验原理 DNA在氯化钠溶液中
2、的溶解度随氯化钠的浓度变化而变化。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低。这样可使DNA析出。DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质可以溶于酒精溶液，这样可以使DNA纯度增加。DNA遇二苯胺，在沸水浴时，会染成蓝色。这样可以用二苯胺鉴定DNA。三、实验材料鸡血细胞液（510 mL）；体积分数为95的冷酒精，蒸馏水，质量浓度为0.1 gmL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2 molL和0015 molL的NaCl溶液，二苯胺试剂；烧杯（100 mL，1个， 50 mL， 500 mL，各2个），漏斗，试管（20 mL，2个），玻璃棒，滴管，量筒（100 mL，1个
3、），纱布，镊子，滤纸，铁架台，铁环，三角架，酒精灯，石棉网，载玻片，试管夹。 四、实验步骤1提取细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。 5 min2溶解DNA：3析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢4过滤：取黏稠物5再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。3 min6过滤：取滤液。7提取出含杂质较少的DNA，逆时针方向搅拌，稍慢。5 min8DNA的鉴定：沸水浴5min 五、注意事项1.实验材料必须准备充足。本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:
4、3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。如果不具备购买活鸡的条件,也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。2.盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程中DNA的损失。3.获取较纯净的DNA的关键步骤。(1)充分搅拌鸡血细胞液DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。(2)沉淀DNA时必须用冷酒精实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精,并在冰箱(至少5S以下)中至少存放24 h。(3)正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA分子。进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动510 min。
