1、选修一 专题二限时45分钟；满分100分一、选择题(每小题5分，满分20分)1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的下列操作中，不正确的是A操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板B将称好的牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸C灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%琼脂，并使其溶解D将培养基冷却到约50 时，在酒精灯火焰附近倒平板解析琼脂加入到牛肉膏蛋白胨溶液中，溶化后再灭菌。答案C2(2014南通调研)下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是 A步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行B步骤中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖C步骤中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理D划线接
2、种结束后，将图平板倒置后放入培养箱中培养解析步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A正确；倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，B错误；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源干上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落，C正确；划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，D正确。答案B3苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚
3、，研究人员从土壤中筛选获得了只能利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是A图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B如果要测定中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C若图中为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一碳源D使用平板划线法可以在上获得单菌落解析 若为对照实验，则中培养基应含除苯酚外的其他碳源，中以苯酚作为唯一碳源。答案C4用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是A涂布了一个平板，统计的菌落数是230B涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C涂布了三个平板，统计
4、的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233解析在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以A、B不正确。C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，此时，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。答案D二、非选择题(共80分，每小题20分)5(2014潍坊模拟)莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，可按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。请据图回答：(已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的
5、固体培养基不透明)(1)由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为_，目的是_。(2)在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行_，将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和_法，从图中看本实验采用的是_(填“前者”或“后者”)。(3)一段时间后，培养基出现无透明带和有透明带两种菌落，我们筛选的目的菌是_菌落中的细菌，该菌落生长所需的氮元素主要来源于_。(4)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基，应如何设置对照组？_。答案(1)选择培养初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并提高其密度(2)梯度稀释稀释涂布平板后者(3)有透明带莠去津(4)配制的培养基灭菌后不接种菌种，与实验组放在
6、相同条件下培养6(2014南京模拟)常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母。请分析回答下列问题：(1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是_。(2)取从自然界中采集的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养。 图乙是经过图甲过程A纯化培养的结果，在培养基上接种时划线的顺序依次是_(用编号表示)。研究者在图甲过程C的操作培养过程中，得到了一个经培养后菌
7、落分布如图丙所示的平板，推测接种时可能的操作失误是_。 (3)将培养基上的酵母菌菌株转接到仅以_为碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。(4)从以上筛选得到的活酵母菌中提取DNA，利用PCR技术大量扩增获得目的基因。若将1个目的基因分子复制10次，则需要在缓冲液中至少加入_个引物。将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上，然后将所得的重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏_能力的酿酒酵母作为受体菌。(5)将经上述流程培育获得的转基因酿酒酵母接种在含_的培养基中进行酒精发酵能力测试。随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能_，即
8、说明所需菌株培育成功。解析(1)待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染。 (2)在培养基上接种划线的顺序依次是每一区的划线应从前一区划线的末端位置开始划线，从而能将菌种逐区减少，所以划线顺序是；培养后菌落分布不均匀可能是接种时涂布不均匀造成的。(3)利用选择培养基选择培养时，培养基中若仅以木糖为碳源，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。(4)PCR技术大量扩增目的基因时，缓冲液中需要加入的引物个数计算公式为2n12，所以若将1个目的基因分子复制10次，则需要在缓冲液中至少加入2112个引物，质粒中的标记基因作用是用于筛选
9、含目的基因的受体细胞，将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上，然后将所得的重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏尿嘧啶合成能力的酿酒酵母作为受体菌。若选择培养基中的酵母菌能合成尿嘧啶，则说明目的基因导入受体酵母菌中。(5)基因工程是为了培养能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母，所以检测时应将培育获得的转基因酿酒酵母接种在含葡萄糖和木糖的培养基中进行酒精发酵能力测试，随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能利用葡萄糖和木糖产生酒精，且对酒精的难受能力强，即说明所需菌株培育成功。答案(1)防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染(2)涂布不均匀(3)木糖(4)211
10、2尿嘧啶合成(5)葡萄糖和木糖利用葡萄糖和木糖产生酒精，且对酒精的耐受能力强(合理即可)7(2014合肥二模)纤维素酶是一种复合酶，能将纤维素分解为葡萄糖，刚果红能够和纤维素结合形成一种红色的复合物，当纤维素被分解时，红色物质消失，形成透明圈，过程如图甲所示。据此，某实验小组为了研究pH对纤维素分解菌产生的纤维素酶活性的影响，将纤维素分解菌分别接种在pH不同的刚果红纤维素培养基中，通过观察出现透明圈的最早时间和24h后透明圈直径的大小来判断纤维素酶活性的高低，实验流程如图乙所示：红色复合物红色消失，形成透明圈甲乙根据题意，回答下列问题：(1)实验流程中，选择培养的目的是_。选择培养基中应该加入
11、_作为唯一的碳源，另外还要加入的基本营养物质有_。(2)为了说明选择培养基对纤维素分解菌起到了选择的作用，应怎样设置对照实验？_。(3)根据流程图可知，将纤维素分解菌接种到培养基上所用的方法为_。本实验中该接种方法所用的培养基从物理状态看，属于_培养基。(4)该实验小组设置了pH分别为6、7、8的三组实验进行观察，得到了如下的实验结果：pH出现透明圈的最早时间(h)24h后透明圈的直径(cm)664.427103.668241.33 通过上述结果可知，该实验的自变量是_，因变量是_，纤维素分解菌更适合在偏_(填“酸”、“碱”或“中”)性环境下生长。答案(1)增加纤维素分解菌的数量纤维素氮源、水
12、和无机盐(2)将培养基中纤维素改为葡萄糖，其他条件都相同(3)稀释涂布平板法固体(4)pH出现透明圈的最早时间以及24h后透明圈的直径大小酸8(2014孝感统考)某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌(可利用空气中N2合成含氮有机物)和酵母菌混合在一起，得到混合菌。请你完成得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的分离实验步骤，并回答有关问题：(1)主要步骤：制备两种培养基：一种是_培养基，另一种是加_的培养基。分别分成两份，依次标上A，A和B，B，备用。分别向A、B培养基中接种_。接种后，放在恒温箱中培养34天。分别从A、B培养基生长良好的菌落中挑取菌种，按照AA，BB的方式进行接种。接种后，把
13、A、B培养基放入恒温箱中培养34天。(2)回答问题：在步骤中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有：对培养基进行_；将_在酒精灯火焰上灭菌；接种过程在_附近进行。第两个步骤的目的是获得_。解析(1)将微生物进行分离一般采用选择培养基。选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。根据这一原理可将两种微生物分离开来。(2)在微生物培养过程中的灭菌措施有：培养基和培养皿的高压蒸气灭菌、金属用具的灼烧灭菌、接种过程在酒精灯火焰附近进行等。为获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌，可以用选择培养基重复进行选择培养。答案(1)无氮 青霉素混合菌(2)高压蒸气灭菌接种环酒精灯火焰纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌
