1、 高二生物 导学案执笔： 审核： 审批： 学案编号： 授课人： 授课时间： 姓名： 班级： 小组： 课题课题3 分解纤维素的微生物的分离课型新授课时1教师复备栏（学生笔记栏）【学习目标】站得高明确学习目标简述纤维素酶的种类及作用，从土壤中分离出分解纤维素的微生物，讨论这类微生物的应用价值。【学习重点和难点】重点：从土壤中分离分解纤维素的微生物。 难点：从土壤中分离分解纤维素的微生物。【学法指导】1. 利用课本中图2-12来了解纤维素酶的作用。 2、通过“筛子筛沙”这一形象的比喻来说明筛选微生物的基本思想方法。【知识链接】复习旧知，以旧带新1、在微生物学中，将 特定种类的微生物生长，同时 或 其
2、他种类微生物生长的培养基，称做 。2、统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。3、设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高结果的 。4、土壤有“ ”之称。土壤中的微生物，数量 ，种类 。5、微生物的接种方法很多，最常用的是 法和 法【学习内容】一、 自主学习：起步稳夯实基础促发展学生阅读教材P2730 ,完成下列学案 (一)、纤维素与纤维素酶：1、棉花是自然界中 含量最高的天然产物，此外， 、 等也富含 。2、纤维素酶是一种 。一般认为它至少包括三种组分，即 、 和 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。正是在这三种酶的 作用下，纤维素最终被水解成 ，为微生物的
3、生长提供 。（二）纤维素分解菌的筛选1、在筛选纤维素分解菌的过程中，人们发明了 染色法，这种方法能够通过 直接对微生物进行 。2、刚果红是一种 ，它可以与像 这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的纤维二糖和 发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入 时， 能与培养基中的纤维素形成 。当纤维素被纤维素酶 后，刚果红- 的复合物就无法形成，培养基中会出现以 为中心的 。这样，我们就可以通过是否产生 来筛选 菌（三）实验设计：土壤取样 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的 上挑选 的菌落。1、土壤取样：纤维素分解菌大多分布在富含 的环境中，因此，采集地土样时，可能选择 丰富的环境，如树林中多年落叶形
4、成的腐殖土，多年积累的 等等。2、选择培养：在将样品稀释涂布到鉴别 的培养基之前，可以通过选择培养增加纤维素分解菌的 ，以确保能够从样品中分离到所需要的 。3、刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种：一种是先培养微生物，再加入 进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入 。二、合作探究:走得欢探索中收获，收获中提升 1、为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？2、为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？3、在从土壤中获取纤维素分解菌时，为什么可以将滤纸埋在土壤中？你认为滤纸应该埋进土壤多深？【整理学案】：构建网络，内化知识分解纤维素的微生物的分离基础知识 实验设计 操作提示 【达标测评】步步
5、高巩固成果，对答如流1下列生物能分解纤维素的是( ) 人 兔 牛 蘑菇 纤维杆菌 A B C D2纤维素酶可以将下列哪种物质分解( ) A牛肉片 B鱼片C滤纸条 D塑料条3下列不属于纤维素酶组分的是( ) AC1酶 BCx酶C葡萄糖苷酶 D半乳糖苷酶4纤维素酶发挥作用的最适pH是( ) A2.0 B4.8 C6.8 D7.85刚果红能与下列哪种物质形成红色复合物( ) A葡萄糖 B纤维二糖C麦芽糖 D纤维素6从土壤中分离获得某种微生物的步骤是( ) 土壤取样 梯度稀释 选择培养 涂布培养 筛选菌株 A B C D7纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于有( ) ANaNO3 BKClC酵
6、母膏 D纤维素粉8分离土壤中纤维素分解菌所用到的方法是( ) 稀释倒平板法 涂布平板法 单细胞挑取法 选择培养基分离 A B C D9分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是( ) A经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 B富集培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少 C经稀释培养后，用刚果红染色 D对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上10纤维素、纤维素酶和控制纤维素酶合成的物质，它们的基本组成单位依次是( ) A葡萄糖、葡萄糖和氨基酸 B葡萄糖、氨基酸和核苷酸 C氨基酸、氨基酸和核苷酸 D淀粉、蛋白质和核酸11下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述，不正确的是( )
7、A纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵 B对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后，无需再进行其他实验 C纤维素酶的测定方法，一般是对所产生的葡萄糖进行定量的测定 D纤维素酶是一种复合酶12在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是（ ） A用液体培养基可获得大量菌体 B纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长 C用液体培养基可以充分利用培养基中营养物质 D用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌13在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前一般先进行选择培养，其主要目的是( ) A完全除去其他微生物 B没有意义，去掉这一步更好 C增加纤维素分解菌的浓度 D使纤维素分解菌充分长大14两种刚果
8、红染色法的结果是( ) A均会出现透明圈B均不会出现透明圈 C方法一出现,方法二不出现D方法一不出现，方法二出现15纤维素酶在植物细胞工程方面有着广泛的应用，你认为在下列哪种生物体中提取纤维素酶比较合理( ) A发酵酵母 B在腐木上生长的霉菌 C高等植物细胞 D白蚁体内的鞭毛虫【学后反思】参考答案：1、C 解析兔、牛为草食动物，其肠道内有分解纤维素的微生物，蘑菇、纤维杆菌能分泌纤维素酶分解纤维素，人不能消化纤维素。2C 3 D 4 B 5 D 6 B 7 D 8 B解析分离土壤中的纤维素分解菌时，先进行选择培养，以增大纤维素分解菌的浓度，即富集培养，梯度稀释后涂布平板，培养，最后运用挑取单细胞
9、法以获得纯培养。9A解析经选择培养后培养基上纤维素分解菌的浓度增加，所以需要将样品进行梯度稀释后才能涂布到鉴定纤维素分解菌的培养基上；选择培养可省略，但选择培养可增加纤维素分解菌浓度，此步若省略所得到的微生物可能较少；经稀释培养长出菌落后，再加刚果红染色；设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。10B11B 解析初步筛选只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产生纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。12A 13C 14A 15B习题（ ）1、刚果红能与哪
10、项物质形成红色复合物？A、纤维二糖 B、纤维素 C、葡萄糖 D、麦芽糖（ ）2、寻找纤维素分解菌应到？ A、湿润的环境中 B、富含纤维素的环境中 C、富含无机盐的环境中 D、池塘中（ ）3、以纤维素为惟一碳源筛选出了真菌和细菌，试分析此类微生物在生态系统中的作用与下列哪种生物类似:A硝化细菌 B蓝藻 C蚯蚓 D兔子（ ）4、微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是：AC1酶和Cx酶 BC1酶和葡萄糖苷酶 CCx酶和葡萄糖苷酶 DC1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶（ ）5、在加入刚果红的培养基中会出现透明圈，产生的透明圈是:A刚果红与纤维素形成的复合物 B刚果红与纤维二糖形成的复合物 C纤维素分解后形
11、成的葡萄糖导致的 D以纤维素分解菌为中心形成的（ ）6、从土壤中筛选蛋白酶产生菌时，所用培养基为:A液体培养基 B选择培养基 C基础培养基 D鉴别培养基（ ）7、下列对刚果红染色法的叙述，不正确的是:A可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应 B可以在倒平板时就加入刚果红C既可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，也可以在倒平板时就加入刚果红D可以将刚果红与培养基中的其他物质混合后再灭菌倒平板（ ）8、纤维素酶的测定方法一般是:A对纤维素进行定量测定 B对纤维素分解菌进行定量测定C对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定D对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定（ ）9
12、、自养微生物所需碳源和能源为不同的物质，而可作为异养微生物碳源和能源的是:ACO2BNaHCO3 C碳酸盐 D含碳有机物（ ）10、能够测定样品活菌数的方法是:A稀释涂布平板法 B直接计数法 C重量法 D比浊法（ ）11、在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养与观察，则乙组实验属于:A空白对照 B标准对照 C相互对照 D条件对照（ ）12、下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是:A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105
13、、106倍的土壤稀释液和无菌水各01ml，分别涂布于各组平板上C将实验组和对照组平板倒置，370C恒温培养24-48小时D确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数（ ）13、(双选)在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前一般先进行选择培养，下列说法正确的是：A.所选用的选择培养基中纤维素作为唯一碳源 B没有意义，去掉这一步更好C增加纤维素分解菌的浓度 D使纤维素分解菌充分长大（ ）14、(双选)关于分解纤维素的细菌的分离和纯化操作的叙述中，下列说法正确的是：A在地表下面10米深处的土壤中取样 B要用只含有纤维素有机营养的选择液体培养基进行选择培养C要用酚红培养基进行
14、进一步鉴定 D要进行稀释涂布平板法接种15、有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和作用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功的筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。(1)培养基中加入的化合物A是_，为微生物的生长提供_，这种培养基属于_培养基。(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入_。(3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度。为获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是_，操作时采用_灭菌的方法；还可用_的方
15、法接种。(4)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是 _。16、纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。回答下列问题：（1）在培养纤维素分解菌的过程中，进行平板划线时，每次划线结束后仍然要灼烧接种环，原因是 。（2）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用 染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于（ ）内。 A. B. C. D.（3）乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数，与分离 醋酸菌相比，进行培养时除了营养不同外，最主要的实验条件差别是 ，该同学采用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数
16、目 ，原因是 。（4）丙同学在提取和分离纤维素酶的过程中，为了保证抵制外界酸和碱对酶活性的影响，采取的措施是向提取液和分离液中添加 。若探究纤维素酶活性的最适温度，如何设置对照？ 。17、从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从环境采集。（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基，并在条件下培养。（3）下面
17、两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是，获得图B效果的接种方法是。（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行，接种前要进行，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在条件下进行。18某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答问题：培养基中加入化合物A的目的是筛选 ，这种培养基属于 培养基。“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 ，实验需要振荡培养，由此推测“
18、目的菌”的代谢类型是 。培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量 的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量 。转为固体培养时，常采用 的方法接种，获得单菌落后继续筛选。实验结束时，使用过的培养基应该进行 处理后，才能倒掉。答案课题3 分解纤维素的微生物的分离-练习1B 2B 3C 4A 5D 6B 7D 8 C 9D 10 A 11D 12D 13AC 14B D答案15、(1)纤维素碳源选择(2)刚果红(3)接种环灼烧稀释涂布平板(4)防止造成环境污染16（1）及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境或感染实验操作者（2）刚果红 A（3）保证无氧环境 少（低） 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（4）缓冲溶液 不同的温度梯度之间就可以相互对照17（1）海滩等高盐（2）以淀粉为唯一碳源高温（3）稀释涂布平板法平板划线法（4）pH调整高压蒸汽灭菌无菌18 答案： 目的菌 选择 化合物A 异养需氧型 减少 增加 划线 灭菌
