1、ks5uks5uks5u考情纵览考纲概要考纲解读高考考情1微生物的培养、分离与应用（）。1了解微生物的培养、分离与应用。12016江苏卷（25）、2016新课标卷（39）、2016新课标卷（39）ks5uks5uKs5u考向导航ks5uks5uks5uKS5U考向一微生物的培养与应用ks5uks5uks5uKS5U1微生物的实验室培养（1）培养基概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。（2）无菌技术含义：指在培
2、养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。关键：防止外来杂菌的入侵。不同对象的无菌操作方法（3）大肠杆菌的纯化培养2微生物的筛选和计数ks5uks5uKs5u.Com（1）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。实验流程：土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察细菌的计数。（2）分解纤维素的微生物的分离纤维素分解菌的筛选实验流程【例1】（2016年新课标卷，39）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而
3、不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是_。（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_和_。分离纯化时应挑选出_的菌落作为候选菌。（3）乳酸菌在-20长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。（3）对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。即将1mL培养的菌种转移到已灭菌的盛有1mL甘油的甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在-20的冷冻箱中保存。所以乳酸菌在-20长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油。【答案】（1）无菌水泡菜滤液中菌的浓度高
4、，直接培养很难分离得到单菌落（2）鉴别乳酸菌中和产生的乳酸具有透明圈（3）甘油【变式训练1】（2017届四川省成都市高中毕业班摸底测试生物试卷）在鉴别纤维素分解菌的培养基中，常常加入水溶性的羧甲基纤维素钠（CMC-Na）。下列叙述错误的是（）A羧甲基纤维素钠（CMC-Na）主要为细菌提供氮源B刚果红染液能与培养基中的纤维素形成红色复合物C刚果红可在倒平板时加入,加入前需要将刚果红溶液灭菌D纤维素酶至少包括三种组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶【解析】羧甲基纤维素钠为可溶性纤维素衍生物，在鉴别纤维素分解茵的培养基中作为碳源， A错误；刚果红与纤维素形成红色复合物，分解纤维素的菌可以分解纤维素，从
5、而使红色消失产生透明，B正确；刚果红可在倒平板时加入，加入前需要将刚果红溶液灭菌，C正确；纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，D正确。【答案】A（3）利用培养基的特定化学成分分离特定微生物：如当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。（4）通过某些特殊环境分离微生物：如在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存；在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。考点速记1无菌操作技术包括消毒和灭菌，消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒和紫外线消毒等；灭菌包括灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。2培养基的制备包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板等步骤，倒置平板的目的是防止培养皿盖上的水滴滴入培养基造成污染。3大肠杆菌的纯化包括平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法要求多次划线，稀释涂布平板法要求菌液要充分地稀释。4微生物的计数要求制作多个平板，且每个平板上能长出30300个菌落。5尿素分解菌和纤维素分解菌的分离都运用了选择培养基，前者所用的培养基中尿素是唯一的氮源，后者所用的培养基中纤维素是唯一的碳源。