1、高频命题点2细胞工程真题领航目标方向导入高考1(2019全国卷，38)培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图所示。回答下列问题。(1)利用胡萝卜根段进行组织培养可以形成试管苗。用分化的植物细胞可以培养成完整的植株，这是因为植物细胞具有_。(2)步骤切取的组织块中要带有形成层，原因是_。(3)从步骤到步骤需要更换新的培养基，其原因是_。在新的培养基上愈伤组织通过细胞的_过程，最终可形成试管苗。(4)步骤要进行照光培养，其作用是_。(5)经组织培养得到的植株，一般可保持原品种的_，这种繁殖方式属于_繁殖。解析：本题借助胡萝卜根组织块的组织培养的相关知识，考查考生理论联系实际，综合运用所
2、学知识解决生物学问题的能力；试题通过对组织培养流程的分析考查了科学思维素养。(1)植物细胞具有全能性，利用已分化的植物细胞通过植物组织培养可以培养成完整植株。(2)形成层细胞分化程度低，全能性较高，更容易诱导形成愈伤组织，进而获得完整植株。(3)愈伤组织的形成和试管苗的分化需要不同的生长素与细胞分裂素比例，因此诱导愈伤组织的形成阶段到分化阶段需要不同的培养基。愈伤组织通过再分化过程，最终可形成试管苗。(4)叶绿素的形成需要光，试管苗的发育也需要光，因此试管苗的诱导阶段需要光照。(5)通过植物组织培养获得植株，属于无性繁殖的一种，可以保持原品种的遗传特性。答案：(1)全能性(或答：形成完整植株所
3、需的全部基因)(2)形成层容易诱导形成愈伤组织(3)诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同分化(或答：再分化)(4)诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用(5)遗传特性无性2(2019全国卷，38)植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。回答下列问题。(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比，这种微型繁殖技术的特点有_(答出2点即可)。(2)通过组织培养技术，可把植物组织细胞培养成胚状体，再通过人工种皮(人工薄膜)包装得到人工种子(如图所示)，这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。人工种皮具备透气性的作用是_。人
4、工胚乳能够为胚状体生长提供所需的物质，因此应含有植物激素、_和_等几类物质。(3)用脱毒苗进行繁殖，可以减少作物感染病毒。为了获得脱毒苗，可以选取植物的_进行组织培养。(4)植物组织培养技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基本程序是_(用流程图表示)。解析：本题借助植物细胞工程实际应用的相关知识，考查综合运用能力。试题通过对比获得植物新个体的不同途径，体现了对科学探究素养中的结果分析要素的考查。(1)植物微型繁殖可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效、快速、大量繁殖。(2)人工种皮具备透气性，可以保证胚状体进行有氧呼吸时对氧的需求；人工胚乳应该含有
5、植物激素、矿质元素和糖等物质，保证胚状体的正常生长。(3)植物分生区附近(如茎尖)的病毒极少，可以切取茎尖进行组织培养，获得脱毒苗。(4)获得转基因植株，首先要通过细胞的脱分化过程，培养出愈伤组织，对愈伤组织继续培养，诱导分化形成小植株。答案：(1)能保持植物原有的遗传特性，繁殖速度快(2)有利于胚状体进行呼吸作用矿质元素糖(3)茎尖(4)含目的基因的细胞愈伤组织小植株知识拓展培养学生文字表达能力1哺乳类动物核移植分为哪些类型？何种类型较为成功，为什么？_答案：核移植分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，由于胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，所以胚胎细胞核移植更易成功。2(1)用什么方法可
6、去除次级卵母细胞中的极体和细胞核？_答案：显微操作去核方法或梯度离心，紫外光短时间照射，化学物质处理等。(2)克隆动物的遗传物质仅有供体动物提供吗？_答案：不是，去核的卵母细胞细胞质中也有DNA。核心整合掌握必备生物知识1植物细胞工程必记关键点(填空)(1)植物组织培养a植物组织培养的两个关键b植物激素的使用细胞分裂素比例较高时，促进芽分化，抑制根形成；生长素比例较高时，促进根分化，抑制芽形成。c光照的使用脱分化阶段不需要给予光照，再分化阶段需给予光照，以利于叶绿素的合成。(2)植物体细胞杂交a酶解法用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。b诱导剂聚乙二醇，c杂种细胞的形成标志新细胞壁的形成。d培养杂种
7、植株的技术植物组织培养。2动物细胞培养的特殊条件(填空)a营养条件：加入动物血清、血浆等；通入氧气以满足代谢的需要；通入二氧化碳以维持培养液的pH。b胰蛋白酶的两次使用：首先用胰蛋白酶处理动物的器官或组织，以制备单细胞悬液；培养过程中发生接触抑制时，同样要用胰蛋白酶使细胞分散开。c避免杂菌污染的措施：培养液及培养用具灭菌处理，加入一定量的抗生素，定期更换培养液。3理清克隆动物的培育流程(填空)(1)流程图(2)用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因是营养丰富、体积大、易操作，含有刺激细胞核恢复分裂能力的物质。4明确单克隆抗体的一过程两特点(填空)(1)制备过程 (2)单克隆抗体的特点：特异性强、灵
8、敏度高。(3)2次筛选的目的：第1次筛选获得杂交瘤细胞，第2次筛选获得能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞。考向立意突显科学思维和科学探究能力的考查考向一以植物细胞工程及应用为载体，考查学生的理解能力和解决问题的能力1利用现代生物技术，科研人员对马铃薯的培育进行了研究，请回答相关问题：(1)培育马铃薯脱毒苗所依据的原理是_，该培育过程涉及_和_两个阶段。(2)研究马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，结果如图。据图可知：茎尖越小，脱毒率_，成苗率_，培养脱毒苗茎尖的适宜大小为_。(3)若想培育出“番茄马铃薯”植株，运用传统有性杂交能否得到可育的杂种植株？为什么？_(4)若马铃薯细胞中含
9、m条染色体，番茄细胞内有n条染色体，则“番茄马铃薯”细胞在有丝分裂后期含_条染色体。解析：(1)培育马铃薯脱毒苗是对植物组织培养技术的应用，所依据的原理是植物细胞的全能性；该培育过程涉及脱分化和再分化两个阶段。(2)据图可知：茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低；培养脱毒苗茎尖的适宜大小为0.27 mm。(3)由于番茄和马铃薯属于两个不同物种，而不同种的植物存在生殖隔离，所以若想培育出“番茄马铃薯”植株，运用传统有性杂交不能得到可育的杂种植株。(4)若马铃薯细胞中含m条染色体，番茄细胞内有n条染色体，则“番茄马铃薯”细胞中含有(mn)条染色体，在有丝分裂后期含2(mn)条染色体。答案：(1)植物细
10、胞的全能性脱分化再分化(2)越高越低0.27 mm(3)否(或不能)，不同种的植物存在生殖隔离(4)2(mn)2如图为A、B两种二倍体植物体细胞杂交过程示意图，请据图回答：(1)步骤的方法是_。步骤常用的化学试剂是_，之后_(是/否)需要筛选。(2)在利用杂种细胞培育成为杂种植物的过程中，运用的技术手段是_，其中步骤是_。植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植物，与A、B两种植物相比，该杂种植物是新物种的原因是_。(3)培育该杂种植物的过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔遗传规律？为什么？ _。解析：(1)题图为植物体细胞杂交过程示意图，其中表示去壁获取原生质体的过程，常用酶解法，即用纤维素酶和
11、果胶酶处理；表示人工诱导原生质体融合，常用的化学试剂是聚乙二醇(PEG)，诱导后形成的两两融合的原生质体有三种，所以需要进行筛选。(2)题图中表示再生出新细胞壁的过程，杂种细胞通过植物组织培养技术培育成为杂种植物，过程表示脱分化；表示再分化过程。图中获得的杂种植物与A、B两种植物间均存在生殖隔离，所以是新物种。(3)图示为植物体细胞杂交过程，没有经过不同配子的结合，所以不属于有性生殖，因此该过程中遗传物质的传递不遵循孟德尔遗传规律。答案：(1)酶解法聚乙二醇是(2)植物组织培养技术脱分化该杂种植株与A、B两种植物间均存在生殖隔离(3)不遵循，该过程不属于有性生殖考向二以动物细胞工程及应用为载体
12、，考查学生的理解能力和解决实际问题的能力3某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如图所示。若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：(1)制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上，则小鼠最少需要经过_次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X
13、、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是_小鼠，理由是_。(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有_，体系中出现多种类型细胞的原因是_。(3)杂交瘤细胞中有_个细胞核，染色体数目最多是_条。(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是_。解析：(1)分析题图可知，经4次免疫后，小鼠Y的血清抗体效价就可达到16 000以上。由于4次免疫后的Y小鼠的血清抗体效价最高，故最适合用于制备B淋巴细胞。(2)细胞融合实验中，由于细胞融合是随机的，而且诱导融合率不可能达到100%，所以会有未融合的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞、融合的具有同种核的细胞
14、和杂交瘤细胞三种类型。(3)杂交瘤细胞同时具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的核物质，但细胞核只有一个。由于杂交瘤细胞在分裂过程中染色体会丢失，故细胞核中染色体数目最多是4060100(条)，有丝分裂后期染色体暂时加倍为200条。(4)B淋巴细胞已经分化，没有无限增殖的潜能。答案：(1)4YY小鼠的血清抗体效价最高(2)B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%(3)1200(4)不能无限增殖4双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。如图是科研人员通过杂交杂交瘤细胞技术(免疫的B细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产能同时识别癌胚抗原
15、和长春碱(一种抗癌药物)的双特异性单克隆抗体的部分过程。分析回答：(1)过程的目的是_，制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有_(至少答出两条)。(2)过程诱导融合的方法是_，过程选用的骨髓瘤细胞_(填“能”或“不能”)在HAT培养基上生长。(3)经过程筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中进行过程，原因是_。(4)请根据所学知识，用箭头和文字补全图中方框内获取单克隆杂交杂交瘤细胞的生产过程。(5)获得的单克隆杂交杂交瘤细胞在体外条件下培养或_，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。解析：(1)过程表示给小鼠注射抗原，目的是刺激小鼠产生能分泌识别癌胚抗原抗体的浆细胞(B淋巴细胞)；根据单克隆抗
16、体制备流程可知，该过程涉及的技术包括动物细胞融合技术、动物细胞培养技术。(2)诱导动物细胞融合的方法有聚乙二醇、灭活病毒、电激等；HAT培养基的作用是筛选出杂交瘤细胞，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上生长。(3)从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型，故筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体不是单克隆抗体，因此经过程筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板上运用抗原抗体杂交法筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞。(4)双特异性单克隆抗体制备过程为将获得的B淋巴细胞与单克隆杂交瘤细胞融合在选择培养基上筛选出杂交杂交瘤细胞克隆化培养、抗体检测筛选出单克隆杂交杂交瘤细胞。(5)获得的单克隆杂交杂交瘤细胞在体外条件下培养或
17、注射到小鼠腹腔内增殖，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。答案：(1)使小鼠产生能分泌识别癌胚抗原抗体的浆细胞(B淋巴细胞)动物细胞融合、动物细胞培养(2)聚乙二醇(PEG)诱导、电激等不能(3)从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型(筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体不是单克隆抗体)(4)将获得的B淋巴细胞与单克隆杂交瘤细胞融合在选择培养基上筛选出杂交杂交瘤细胞克隆化培养、抗体检测筛选出单克隆杂交杂交瘤细胞(5)注射到小鼠腹腔内增殖一、选择题1某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒
18、载体用BamH酶切后，与用BamH酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有_(答出两点即可)。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是_；并且_和_的细胞也是不能区分的，其原因是_。在上述筛选的基
19、础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落，还需使用含有_的固体培养基。(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于_。解析：(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有：能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点等。(2)依题意可知，目的基因插入后，导致四环素抗性基因(Tetr)失活，而氨苄青霉素抗性基因(Ampr)仍能行使正常功能。如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞，因二者均不含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都不能生长，所以是不能区分的；含有质粒载体和
20、含有插入了目的基因的重组质粒的细胞，因二者都含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都能生长，因此也是不能区分的。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有四环素的固体培养基；因目的基因插入后，导致四环素抗性基因(Tetr)失活，含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌在该培养基中不能生长，而含有质粒载体的则能正常生长。(3)噬菌体是专门寄生在细菌细胞中的病毒，在侵染细菌时，噬菌体的DNA进入到细菌细胞中，而蛋白质外壳仍留在细胞外；在噬菌体的DNA的指导下，利用细菌细胞中的物质来合成噬菌体的组成成分。据此可推知：基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，
21、其DNA复制所需的原料来自于受体细胞。答案：(1)能自我复制、具有标记基因(答出两点即可)(2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长含有质粒载体含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长四环素(3)受体细胞2研究人员利用PCR技术扩增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。请结合下图回答相关问题：注：Hind和ApaL是两种限制酶，箭头表示酶的切割位点。(1)利用PCR技术扩增目的基因的原理是_。图1中引物为单链DNA片段，它是根据_的脱氧核苷酸序列合成的。从理论上推测，第2轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的
22、比例为_。(2)图2所示的基因表达载体中的URA3基因能编码乳清苷5磷酸脱羧酶，该酶能催化酵母菌尿嘧啶的合成，若酵母菌缺乏乳清苷5磷酸脱羧酶，就无法生长，除非在培养基中加入尿嘧啶。利用URA3基因作为_基因来筛选转化成功的酵母菌，要选择_的酵母菌作为受体细胞，所使用的培养基_(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。(3)奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。工业生产过程中，_(填“能”或“不能”)选用大肠杆菌作为受体细胞表达出凝乳酶，原因是_。答案：(1)DNA双链可进行复制目的基因3/4(2)标记缺乏URA3基因(或不能合成乳清苷5磷酸脱羧酶)不需要(3)不能大肠杆菌无内质网和高尔基体(或大肠杆菌
23、无法对蛋白质进行加工和修饰)3真核生物基因中通常含有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。下图表示基因文库的制备和从基因文库中提取胰岛素基因的过程。请回答下列问题：(1)从基因结构分析，与基因组文库中的基因相比，从cDNA文库中获得的目的基因缺少的结构_(至少写两个)等。图中过程中存在的碱基配对方式有_(模板上的碱基在前)；过程所用的工具酶有_。(2)为了便于导入基因，细菌培养基中一般加入_，理由是_ 。(3)依据图中杂交结果，应选取培养基上_(填字母)菌落继续培养，才能获得含有胰岛素基因的受体菌。(4)从大肠杆菌中获得的“胰岛素”未能达到
24、期待的生物活性，从细胞结构角度分析，其原因是_。答案：(1)启动子、终止子、内含子AT，UA、GC、CG限制酶、DNA连接酶(2)CaCl2(或钙离子)钙离子使细菌处于感受态(或钙离子能提高细菌从外界吸收DNA的能力)(3)a(4)大肠杆菌中缺少对胰岛素进行加工和修饰的内质网和高尔基体4利用基因工程技术培育马铃薯新品种，目前已经取得丰硕成果。请根据教材所学知识，回答下列问题：(1)马铃薯易患多种疾病，导致其产量不高。通过导入抗病基因并使其表达可以提高马铃薯产量，基因工程中使用最多的抗病基因是_和病毒的复制酶基因。(2)马铃薯是双子叶植物，常用_法将目的基因导入马铃薯受体细胞中。构建好的基因表达
25、载体基本结构包括目的基因、标记基因、_、_、_等五部分。(3)科学家还培育出抗除草剂的转基因马铃薯，其设计方法：修饰除草剂作用的靶蛋白，使转基因马铃薯对除草剂_(填“敏感”或“不敏感”)，或使靶蛋白过量表达，转基因马铃薯吸收除草剂后仍能_。(4)将目的基因导入受体细胞后，还需对转基因植物进行_。解析：(1)通过导入抗病基因并使其表达可以提高马铃薯产量，基因工程中作用最多的抗病基因是病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因。(2)马铃薯是双子叶植物，常用土壤农杆菌转化法将目的基因导入马铃薯受体细胞中，构建好的基因表达载体基本结构包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等五部分。(3)除草剂只能
26、作用于杂草，不能作用于马铃薯，因此需要修饰除草剂作用的靶蛋白，使其对除草剂不敏感(抵抗)，或使靶蛋白过量表达，植物吸收除草剂后仍能正常代谢。(4)将目的基因导入受体细胞后，还需对转基因植物进行目的基因的检测与鉴定。答案：(1)病毒外壳蛋白基因(2)土壤农杆菌转化启动子终止子复制原点(3)不敏感正常代谢(4)目的基因的检测与鉴定5基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoR的识别序列示意图，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。请回答下列问题：(1)图3为目的基因中的某一片段，连接处化学键的酶有_。(2)若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2
27、可知，A、B、C、D四种单链DMA片段中除了B作为引物外，_(填“A”“C”或“D”)亦可作为引物。(3)为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是_。(4)如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含_，利于筛选出含重组质粒的受体菌。解析：(1)处化学键是磷酸二酯键，在复制过程中连接化学键的酶是DNA聚合酶，在基因工程中连接处化学键的酶是DNA连接酶。(2)若用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，DNA复制只能从5到3，因此构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取B和C作为引物。(3)为了使目的基因和质粒定向连
28、接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，四环素抗性基因没有被破坏，所以应该选择的限制酶是EcoR和Pst。(4)如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含抗四环素基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。答案：(1)DNA聚合酶和DNA连接酶(2)C(3)EcoR和Pst(4)抗四环素6我国某科研团队将小麦液泡膜Na/K逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。请回答下列有关问题：(1)为保证目的基因在水稻细胞中能够表达，运载体上应含有特定的_(填“复制原点”“启动子”或“标记基因”)。(2)水稻的转化过程：将水稻幼胚接种到诱导培养基上，经过_过程，培养出愈伤
29、组织，然后用_法，将目的基因和相关功能片段整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，最后诱导愈伤组织形成水稻植株。(3)为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取所有mRNA并反转录成_再以反转录产物为模板，利用TaNHX2基因为特异引物，通过_技术进行基因扩增。若以根细胞为材料，扩增结果为阳性(有产物生成)，以叶细胞为材料，扩增结果为阴性(无产物生成)，则说明_。(4)将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照。培养30天后观察现象，若_，则说明转基因植株获得了耐盐特性。解析：(1)基因表达是指转录和翻译形成蛋白质，其中
30、转录是由启动子启动的，因此为保证目的基因在水稻细胞中能够表达，运载体上应含有特定的启动子。(2)愈伤组织是外植体经过脱分化过程形成的；将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法。(3)mRNA反转录形成cDNA(互补DNA)；PCR技术可在体外扩增基因；若以根细胞为材料扩增结果为阳性(有产物生成)，以叶细胞为材料扩增结果为阴性(无产物生成)，则说明目的基因(TaNHX2基因)仅在根细胞中转录，未在叶细胞中转录。(4)将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照，培养30天后观察现象，若转基因植株获得了耐盐特性，则转基因植株存活率高于非转基因植株(转
31、基因植株叶片不变黄，非转基因植株叶片变黄，其它答案合理可给分)。答案：(1)启动子(2)脱分化农杆菌转化(3)cDNA(互补DNA)PCR目的基因(TaNHX2基因)仅在根细胞中转录，未在叶细胞中转录(仅回答“基因选择性表达”不正确)(4)转基因植株存活率高于非转基因植株7请回答下列有关核移植方面的问题：(1)目前，科学家通过细胞核移植实验，培育出多种哺乳动物新类型。在牛的核移植实验中。一般通过_(物理方法)激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程；当胚胎发育到_阶段时，将胚胎植入代孕牛体内。(2)在利用核移植技术进行治疗性克隆时，需要取患者体细胞的细胞核，移入一个已经去核的卵母细胞中，构成重
32、组细胞。这个过程中，所用的去核卵母细胞一般处于_期；所用的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是_；将患者的体细胞核植入去核的卵母细胞中构建重组细胞后进行细胞培养，而不是直接用体细胞进行细胞培养的原因是_。(3)经核移植获得的重组细胞进行体外培养时，培养液中通常要添加_等一些天然成分，而气体中CO2的主要作用是_。培养过程中，为了清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞造成危害，应定期_。解析：(1)在核移植实验中，激活受体细胞使其完成细胞分裂和发育进程一般采用的物理方法是电脉冲(或电刺激)。当牛的胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段时，可将其向受体移植。(2)在核移植过程中，作为受体细胞的去核卵母细
33、胞一般处于减数第二次分裂中期。用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，原因是传代10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型。体细胞核在体细胞中不能表现全能性，而卵母细胞的细胞质可以给它提供表达全能性的环境。(3)动物细胞培养所用的培养基属于合成培养基，常需加入血清、血浆等一些天然成分。动物细胞培养过程中，为了清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞造成危害，应定期更换培养液。答案：(1)电脉冲(或电刺激)桑椹胚或囊胚(2)M中(减数第二次分裂中)传代10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型体细胞核在体细胞中不能表现全能性，而卵母细胞的细胞质可以给它提供表达全能性的环境(3)血清、血浆维持培养
34、液的pH更换培养液8甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。回答下列问题：(1)为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用_酶和_酶去除细胞壁，获得具有活力的_，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成_组织，然后经过_形成完整的杂种植株。这种培养技术称为_。(2)上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指_。假设甲与乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是_。(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的_等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。解析：(1)细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，去除时用果胶酶和纤维素酶。原生质体融合后经诱导形成愈伤组织，再分化形成杂种植株。这一技术即为植物体细胞杂交技术。(2)多倍体指由受精卵发育而来，体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体。甲、乙有性杂交的后代在减分裂前期染色体联会异常，不能形成配子。(3)人工种子是由组织培养得到的胚状体。不定芽、腋芽、顶芽等材料用人工薄膜包装后得到的。答案：(1)纤维素果胶原生质体愈伤再分化(或分化)植物体细胞杂交技术(2)体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体在减数分裂过程中，前者染色体联会异常，而后者染色体联会正常(3)胚状体、不定芽、顶芽、腋芽
