1、网络整合要点突破阶段复习课 网络整合要点突破网络整合要点突破突破一 几种酶的作用比较酶类作用实质模板作用部位作用结果限制性核酸内切酶 可切割双链DNA分子不需要磷酸二酯键形成粘性末端或平末端DNA连接酶催化两个双链DNA片段连接起来不需要形成重组DNA分子DNA聚合酶催化脱氧核苷酸单链与单个脱氧核苷酸连接需要(DNA单链)形成新的DNA分子DNA水解酶催化DNA分子水解不需要形成脱氧核苷酸网络整合要点突破DNA解旋酶催化双链DNA分子解旋不需要碱基对间的氢键 形成单链DNA分子RNA聚合酶催化RNA的合成需要(DNA单链)磷酸二酯键形成新的RNA网络整合要点突破【突破体验】1下图为DNA分子在
2、不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是()网络整合要点突破ABCD解析 本题考查与DNA有关的四种酶的作用。表示限制性核酸内切酶将DNA链切割成有粘性末端的DNA片段。表示两个DNA片段在DNA连接酶的作用下被连接成DNA双链。表示DNA的两条链在解旋酶的作用下正在打开，即正在解旋。表示分别以DNA的两条母链为模板，在DNA聚合酶的作用下合成两条DNA子链，即DNA复制。答案 C网络整合要点突破2如图所示有关基因工程中酶功能的叙述，不正确的是()A切断a处的酶为限制性核酸内切酶B连接a处的酶为DNA连接酶C切断b处的酶为解旋
3、酶D连接b处的酶为DNA聚合酶网络整合要点突破解析 图示DNA分子结构中，a处为磷酸二酯键，b处为氢键。题中各选项涉及的酶有：限制性核酸内切酶、DNA连接酶、解旋酶、DNA聚合酶，其中只有解旋酶不作用于a处而作用于(切断)b处。b处的连接是通过碱基互补配对方式实现的。答案 D网络整合要点突破突破二 重组DNA的构建过程及可能产物1构建过程网络整合要点突破2分子间的不同连接产物网络整合要点突破【突破体验3】如图为某种质粒表达载体的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoR、BamH 的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tetR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知
4、目的基因的两端分别有包括EcoR、BamH 在内的多种酶的酶切位点。网络整合要点突破请据图回答下列问题。(1)将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoR 酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有_、_、_三种。若要从这些连 接 产 物 中 分 离 出 重 组 质 粒，需 要 对 这 些 连 接 产 物 进 行_。(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些受体细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核受体细胞所含有的连接产物是_；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核受体细胞所含有的连接产物是_。网络整合要点突破(3)在
5、上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_。解析(1)用EcoR 酶切出的目的基因和质粒具有相同的粘性末端，如果放在一起加入DNA连接酶，则可出现三种连接产物，即会出现目的基因自身形成的连接物、载体自身形成的连接物以及重组质粒，要通过筛选、纯化才能选出符合要求的DNA。(2)载体自身形成的连接物能重新形成完整的tetR基因，具有抗四环素的功能，其他连接物中tetR基因被限制性核酸内切酶破坏，不再具有抗四环素的特点；在整个操作过程中，ampR基因保持完整，质粒自身形成的连接物和重组质粒都具有抗青霉素的特性。网络整合要点突破(3)将含有目的基因的
6、靶DNA片段和载体分别用两个不同的限制性核酸内切酶切割，使两种DNA片段自身的5和3粘性末端不同，但二者相同末端又互补，这明显减少了靶DNA片段和载体自身环化与串连，使外源DNA片段能正确插入载体启动子下游。在本题中目的基因两端有EcoR 酶切点和BamH 酶切点，在质粒载体上也有这两种酶的切点，所以可以用这两种酶切出非同源性互补末端来阻止其他连接。答案(1)目的基因载体连接物 载体载体连接物 目的基因目的基因连接物 分离纯化(2)载体载体连接物 目的基因载体连接物、载体载体连接物(3)EcoR 和BamH 网络整合要点突破突破三 基因工程具体应用的过程及技术比较名称过程模型技术转基因植物基因
7、工程、植物组织培养转基因动物基因工程、胚胎体外培养、胚胎移植网络整合要点突破基因工程药物基因工程、发酵工程基因工程疫苗基因工程、发酵工程网络整合要点突破基因治疗基因工程网络整合要点突破【突破体验4】应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据下列资料回答问题。材料一 蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法培育转基因蜘蛛羊。网络整合要点突破材料二 注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦。将疫苗藏身水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫
8、接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。网络整合要点突破(1)图中过程需要的工具酶有_，过程表示_。(2)山羊体细胞通常为_，通过过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从_中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。(3)图中过程表示_技术；通过培育转基因莴苣，相比诱变育种和杂交育种方法，具有_等突出优点。解析 题图为转基因植物和转基因动物的技术流程。表示构建重组DNA分子，需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶；表示将重组DNA分子导入受体细胞，表示胚胎体外培养，表示胚胎移植，表示植物组织培养。基因工程育种相较于诱变育种和杂交育种具有目的性强、可克服远缘杂交不亲和障碍等优点。网络整合要点突破答案(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶 将重组DNA分子导入受体细胞(2)受精卵 乳汁(3)植物组织培养 目的性强，可克服远缘杂交不亲和障碍
