1、B部分试题二、非选择题(共60分)9(12分)从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从_环境采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基，并在_条件下培养。(3)下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是_，获得图B效果的接种方法是_。
2、(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_，接种前要进行_，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。解析噬盐菌的菌样应从高盐环境采集。微生物产生淀粉酶说明其碳源是淀粉，应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养。图A菌落分布较均匀，接种方法是稀释涂布平板法，图B菌落集中呈线状，接种方法是平板划线法。配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在实验中要注意在无菌条件下进行。答案(1)海滩等高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温(3)稀释涂布平板法平板划线法(4)pH调整高压蒸汽灭菌无菌10(12分)下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养
3、基配方。请回答：试剂牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水用量5 g10 g5 g20 g1 000 mL(1)培养基的类型有很多，但培养基中一般都含有水、碳源、_和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是_。培养基配制完成以后，一般还要调节pH，并对培养基进行_处理。该培养基从物理性质上分类属于_。(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_和_。(3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？(列举两项)解析培养基中都应含有水、无机盐、碳源、氮源。配制培养基时加入了琼脂，因此该培养基属于固体培养基。培养基配制完成后要调pH和灭菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作为有机碳源。分离纯化微生
4、物一般用平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法中每次划线前都要将接种环灼烧灭菌，以杀死上次划线时接种环上残留的菌种；采用稀释涂布平板法时稀释度要足够高，否则会使微生物不能分散成单个细胞。答案(1)氮源牛肉膏和蛋白胨灭菌固体培养基(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染。(任选两个)11(12分)在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低，含一定
5、量该除草剂的培养基不透明)。(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行_处理。(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是_。(3)在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是_或有氧条件抑制了这些细菌的生长。(4)在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是_，有透明带菌落利用的氮源主要是_，据此可筛选出目的菌。(5)科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B，然后对突变株A和B进行实验，结果如下表所示：接种的菌种一般培养基实验处理及结果A不生长添加营养物质甲，能生长B不生长添
6、加营养物质乙，能生长AB能生长不添加营养物质甲、乙就能生长突变株A不能在一般培养基上生长的原因是_。突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是_。解析(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。(2)从物理性质方面来看，题图培养皿中培养基属于固体培养基；从用途方面来看，该培养皿中培养基属于选择培养基。该除草剂为含氮有机化合物，降解该除草剂的细菌可以以除草剂为氮源。故该培养基中除加入除草剂外，不再含有其他氮源，以选择出能降解该除草剂的细菌。(3)在以该除草剂为唯一氮源的培养基上，不能降解该除草剂的细菌(除具有固氮能力的细菌外)是不能生长的。(4)含一定量
7、该除草剂的培养基不透明，形成透明带是由于该除草剂被某些细菌降解。(5)突变株A的生长依赖于营养物质甲，突变株B的生长依赖于营养物质乙。不添加营养物质甲和乙，二者混合培养时都能生长，最可能的原因是突变株A为突变株B提供了营养物质乙，突变株B为突变株A提供了营养物质甲。答案(1)稀释(2)在无氮固体培养基中添加了该除草剂(3)培养基中缺少这些细菌可利用的氮源(4)氮气该除草剂(5)突变株A缺乏合成营养物质甲所需要的酶突变株A生长需要营养物质甲，突变株B可以提供；突变株B生长需要营养物质乙，突变株A可以提供12(12分)请回答下列与大肠杆菌有关的问题。(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于_；它的
8、同化作用类型是_。(2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。成 分含 量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HPO42.0 g显色剂0.2 g琼脂12.0 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，根据用途划分该培养基属于_培养基(选择、鉴别)。该培养基中的碳源是_。(3)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和_。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行_。(4)现有一升水样，用无菌吸管吸取1 mL水样至盛有9 mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度。各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57
9、，则每升原水样中大肠杆菌数为_。(5)以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是_。A制作果酒 B由果酒制作果醋C制作泡菜 D制作腐乳(6)利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入_。解析(1)大肠杆菌不能制造有机物，必须以现成的有机物来合成组成自身的物质，属于异养型生物，在生态系统中主要分解有机物，属于分解者。(2)根据表中培养基的组成可看出，该培养基中的碳源是乳糖、蔗糖(蛋白胨)，由于在培养基中添加了显色剂，可判断此培养基为鉴别培养基。(3)培养大肠杆菌等微生物时，常用的接种方法是平
10、板划线法和稀释涂布平板法。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行灭菌。(4)根据公式计算：每升原水样中大肠杆菌数(555657)30.11031035.6108。(5)制作果酒用到的微生物是酵母菌，是真核生物；制作果醋和制作泡菜分别用的微生物是醋酸菌和乳酸菌，二者都是原核生物；制作腐乳用到的微生物是霉菌，属于真核生物；而大肠杆菌属于原核生物。(6)植物组织培养与微生物培养明显不同的就是，组织培养的培养基中还需要加入植物激素，主要是生长素和细胞分裂素，作用是诱导根、芽的分化。答案(1)分解者异养型(2)鉴别乳糖、蔗糖(蛋白胨)(3)稀释涂布平板法灭菌(4)5.6108(5)B、C(6)植物激素(
11、或生长素和细胞分裂素)13(12分)植物的秸秆、枝叶等纤维物质是地球上最多的可再生资源，以纤维素类物质生成燃料乙醇的研究越来越受重视。纤维素酶糖化法是目前常用的方法，其操作过程如图所示：(1)该方法中，微生物X与微生物Y不同，微生物Y是_，若从土壤中获得微生物X，请写出分离的流程图。为了鉴别微生物X，培养基的成分为CMCNa、酵母膏、KH2PO4、琼脂、土豆汁等；在该培养基中，CMCNa的作用是_。(2)若经选择，微生物X为木霉，则其内分解纤维素的酶至少包括_三种组分，这三种酶协同作用，将纤维素分解为葡萄糖。(3)在操作过程中，过程需_以保证乙醇的产生。(4)操作发现，糖液浓度过高时，葡萄糖的
12、产生会受到抑制，其原因是_。解析微生物Y能发酵糖液产生乙醇，故微生物Y是酵母菌。鉴别纤维素分解菌的培养基中，CMCNa能被CX酶和C1酶分解为纤维二糖，可使被刚果红染色的培养基的红色褪去，便于鉴别，也为微生物的生长提供碳源。纤维素酶是一种复合酶，至少包括C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶三种组分。酵母菌发酵产生乙醇是无氧呼吸的过程，在操作过程中应密闭发酵。随着产物(葡萄糖)的增多，反应将会受到抑制，其机理为酶的活性受到反馈抑制。答案(1)酵母菌土壤取样选择培养梯度稀释将菌液涂布到特定的选择培养基上挑选产生透明圈的菌落。提供碳源(或便于鉴别)(2)C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶(3)密闭发酵(4)产物(葡萄糖)过多，反馈抑制了分解秸秆的酶的活性
