1、课时作业(三十八)微生物的培养一、选择题1(2011广州模拟)消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理()皮肤饮用水牛奶注射器培养皿接种环培养基果汁酱油手术刀ABC D以上全部【解析】消毒指用比较温和的方法杀死微生物的营养细胞，适用于那些不耐高温的液体。如牛奶、果汁、酱油，这样可以使其中的营养成分不被破坏。另外对要求不是很严格的皮肤、饮用水也用消毒的方法处理。而对于严格要求的接种环、手术刀等必须进行灭菌处理。【答案】A2(2011衡阳模拟)下列关于大肠杆菌的培养中叙述不
2、正确的是()A在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件B在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行消毒C若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的稀释度D使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃【解析】消毒应为灭菌。【答案】B3(2010合肥质检)如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是()A操作前不用做任何处理B划线操作须在火焰上进行C在5区域中才可以得到所需菌落D在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌【解析】第一次划
3、线前灼烧是为了防止微生物污染培养基，从第二次划线操作起，每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目减少，以便得到单个细菌繁殖形成的菌落。划线后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。【答案】D4(2010南京质检)甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是()注：“”表示培养基中加入了这种物质，“”表示培
4、养基中没有加入这种物质。A甲、乙、丙都是异养型微生物B甲、乙都是自养型微生物，丙是异养型微生物C甲是异养型微生物、乙是固氮微生物、丙是自养型微生物D甲是固氮微生物、乙是自养型微生物、丙是异养型微生物【解析】培养基缺少N素，培养基缺少有机物，培养基营养全面。N是微生物生长的必需元素，每一种微生物正常生长都需要N，但自己能够固氮的微生物可以生活在无氮培养基上。甲能在上生长繁殖，而乙、丙都不能，说明甲是能够固氮的微生物；乙能在中生长繁殖，甲、丙不能，说明乙不需要培养基为它的正常生命活动提供碳源物质，乙一定为自养微生物，甲、丙一定都为异养型微生物。【答案】D二、非选择题5(2011银川模拟)从自然界微
5、生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从_环境中采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基，并在_条件下培养。(3)接种前要对培养基进行_处理。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。(4)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是_，图B
6、效果的接种方法是_。一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_，应当怎样操作才可避免此种现象？_。(5)如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是_，应该保持_等不变(至少答两项)。【答案】(1)海滩等高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温(3)高压蒸汽灭菌无菌(4)稀释涂布平板法平板划线法菌液浓度过高增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染严格无菌操作；或用接种针划下一区域前接种针没有灭菌每划一个新区域前都要对接种针进行灭菌处理)(原因与操作要对应)(5)温度纤维素的量与浓度、反应时间、pH6(2010广州检测)急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。
7、因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为_。下面四种菌落分布图中，不可能用该方法得到的是_。(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？_为什么？_。(3)如分别取0.1 mL已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为_。(4)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌
8、的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌_。(5)手足口病的病原体是柯萨奇病毒。如需检测水样中是否有柯萨奇病毒，可以通过检测柯萨奇病毒特有的DNA片段来实现。但是水样中的病毒DNA极少，这时可以通过_技术扩增病毒DNA片段，然后进行检测。采用这种技术进行DNA扩增时，一定需要用到的酶是_。【解析】题干信息显示为通过涂布水样于平板培养基上后用菌落计数细菌数，故为稀释涂布平板法。将0.1mL稀释了103倍的水样涂布到琼脂固体培养基上，得到的菌落数为55、56、57，平均为56个，则每升水中大肠杆菌数为(560.1)1031035.6108个。DNA片段的扩增常用PCR技术
9、，此技术不需解旋酶，但需要耐高温的DNA聚合酶。【答案】(1)稀释涂布平板法 D(2)需要设置(对照组) 因为需要判定培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)(3)5.6108个(4)通过无菌操作向试管内注入一定量待检水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37恒温箱培养24 h。试管内有气泡生成的说明水样中有大肠杆菌(5)PCR 耐高温的DNA聚合酶7(2010韶关模拟).自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。.步骤如下：A制备稀释倍数为102、103、1
10、04、105、106的系列稀释液。B为了得到更加准确的结果，你选用_(平板法、稀释涂布平板法)接种样品。C适宜温度下培养。结果分析：(1)测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是()A一个平板，统计的菌落数是23B两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24C三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26D四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25(2)一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)_。(3)用这种方法测
11、定密度，实际活菌数量要比测得的数量_，因为_。(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？_，_。.在农业生产研究上，常需要进行微生物的培养和计数。下图是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意：_；_；_。【解析】稀释混合平板法相对于稀释涂布平板法更易得到单个细菌形成的菌落，故为得到更为准确的结果，可选此法接种；在计数时，取样越多，各样本平均数越接近实际值；在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)23.40.21051.17107。由于在涂布时可能出现两个或多个细菌连在一起的情况，使测定的密度少于实际的数量；培养基上出现杂菌，不一定来自大肠杆菌品系，可能是培养基被污染或培养过程中出现污染。【答案】.步骤B：稀释混合平板法(或) 结果分析：(1)D (2)1.17107(3)多当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落(4)不能因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程.每次划线前要灼烧冷却后从上一区划线末端开始划首尾区不重叠高考资源网w w 高 考 资源 网
