1、课题3 酵母细胞的固定化一、选择题1下列属于固定化酶应用特点的是(C)可以被反复利用有利于酶与产物分离能自由出入载体一种固定化酶只催化一种酶促反应酶多用包埋法固定化ABCD解析酶被固定后可与产品分离，故可反复使用，但不能自由出入依附的载体。通常情况下固定化酶种类单一，所以不能催化一系列酶促反应。2下列不是用于包埋法固定化细胞的载体是(D)A琼脂糖B醋酸纤维素C聚丙烯酰胺D聚乙烯树脂解析用于包埋法固定化细胞的载体有：琼脂糖、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等，但不包括聚乙烯树脂。3酵母细胞的活化是指(D)A让酵母细胞恢复运动状态B让酵母细胞在缺水状态下更容易体现C让酵母细胞内酶活性加倍D让处于休眠状态的酵
2、母细胞重新恢复正常的生活状态解析酵母细胞活化是指让处于休眠状态的酵母菌细胞重新恢复正常的生活状态。4固定化酶技术常采用(B)A包埋法B化学结合和物理吸附法固定化C活化法D微囊化法解析酶分子较小，容易从包埋材料中漏出来，因此固定化酶应该采用化学结合法和物理吸附法。5固定化酶技术与固定化细胞技术的关系是(A)A固定化酶技术是固定化细胞技术的基础B固定化细胞技术是固定化酶技术的基础C固定化酶技术与固定化细胞技术是同时发展起来的D固定化细胞技术先于固定化酶技术解析固定化细胞技术是在固定化酶技术的基础上发展起来的，A正确。6高果糖浆指果糖含量为多少的糖浆(D)A10%B20%C30%D42%解析高果糖浆
3、指果糖含量为42%的糖浆。7酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经被广泛地应用于各个领域。下列有关叙述错误的是(A)A93高温会使TaqDNA聚合酶失去催化活性B制备固定化酶的方法主要有包埋法、化学结合法和物理吸附法等C固定化酶在固定时可能会造成酶的损伤而影响活性D固定化细胞可以催化一系列的酶促反应解析TaqDNA聚合酶是从一种水生耐热细菌中分离提取的，具有耐高温的特性，在93的高温条件下仍具有活性。8下列关于高果糖浆及其制备的叙述，正确的是(C)高果糖浆可以认为是高浓度果糖溶液的简称，一般为含果糖42%左右的糖浆高果糖浆是一种混合物，一般是果糖和葡萄糖的混合物。由于果糖较葡萄糖甜，又不易引发肥胖、
4、龋齿等，因此受到人们的青睐果糖是由淀粉或麦芽糖在葡萄糖异构酶的作用下形成的葡萄糖异构酶在6070时转化效率最高ABCD解析高果糖浆制备过程的实质就是在葡萄糖异构酶的作用下，葡萄糖发生结构上的变化，形成葡萄糖的同分异构体果糖。生产高果糖浆的原料一般是淀粉，淀粉在酶的作用下分解为糊精，糊精再进一步分解为葡萄糖，葡萄糖才是制备果糖的直接反应物。葡萄糖异构酶的最适温度为6070，可使果糖、葡萄糖混合物中的果糖比例高达70%90%，而果糖比例占42%左右时就可将其混合物称为高果糖浆。因此正确。9下图中符合固定化酶特征的是(D)解析固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学的方法将酶或细胞固定在一定空间内的
5、技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。固定化酶的优点是使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，还可以被反复利用。在装置中酶是固定不动的，反应物是动的。10(2019康杰中学高二期中)科研人员用海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，以研究固定化酶的相关性质和最佳固定条件。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量。图甲、乙、丙为部分研究结果。下列相关叙述中错误的是(A)A固定化酶的酶活力较高，主要原因是增加了酶与底物的接触面积B由乙图可知，浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好C由丙图可知，固定化酯酶一般重复使用3次之后酶活力明显下降D由甲图可知，固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强
6、解析固定化酶优点是不溶于水，易与产物分离，可反复使用，能连续化生产且稳定性好，A项错误；由乙图可知，海藻酸钠浓度为3%时酶活力最高，即包埋效果最好，B项正确；由丙图可知，固定化酯酶重复使用3次以内酶活力变化不大，重复使用3次之后酶活力明显下降，C项正确；由甲图可知，游离酯酶在温度超过40时活性即迅速下降，固定化酯酶在温度超过45时活性才开始缓慢下降比，说明后者对温度变化适应性更强，D项正确。11如图所示为固定化酵母进行葡萄糖发酵的装置，下列说法不正确的是(B)A为使固定化酵母可以反复使用，实验过程一定要在无菌条件下进行B加入反应液后应保持活塞1始终打开，活塞2则必须关闭C装置的长导管主要是为了
7、释放CO2并防止杂菌进入反应柱D加入的反应液浓度不能过高以免酵母细胞因失水过多而死亡解析加入反应液后应关闭活塞1为酵母菌的厌氧发酵提供无氧环境。12小球藻可用于污水净化，其繁殖能力(生长量)在一定程度上可以反映藻细胞消耗N、P等的能力。科研人员比较游离小球藻和用海藻酸钠固定化后的小球藻生长量变化，结果如图。相关叙述错误的是(C)A本研究中固定化小球藻采用的方法是包埋法B实验中可用CaCl2浸泡凝胶珠使其形成稳定结构C结果表明固定化小球藻的生长期较短、生长速率低D使用固定化小球藻有利于重复使用且可避免水体二次污染解析由题图可知，固定化小球藻生长量出现高峰比游离的小球藻晚，说明其生长期较长。二、非
8、选择题13某同学进行苹果汁制作实验，工艺台如下图所示。请回答：(1)图中用KMnO4溶液浸泡苹果的目的是_消毒_。黑曲霉提取液中含有的_果胶酶_可以水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过_吸附_方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去_未被固定的酶等_。(2)实验中，操作流程A和B的先后顺序为_AB_。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是_阀1_。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的_乙醇_混合，如果出现_浑浊(沉淀)_现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调_慢_。(3)实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境
9、中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制做实验，说明固定化酶可被_重复_使用。解析(1)苹果汁的制作需要果胶酶，该酶来自图中的黑曲霉。果胶酶将果胶催化水解，提高了果汁的澄清度；酶固定常用吸附法。(2)先提取果胶酶再进行苹果汁的制作，防止苹果汁时间过久变质。澄清过程应关闭阀1，避免提取液进入固定化柱中降低了果汁质量，如果果胶未完全水解，可降低流速，延长反应时间。(3)固定化酶的优点之一是被固定的酶可以重复使用。14某一实验小组的同学，欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验，实验材料及用具齐全。(1)酵母细胞的固定采用的方法是_包埋法_。(2)该实验小组的同学在制备固定 化酵母细胞时应注意
10、：配制CaCl2溶液时应用蒸馏水；海藻酸钠溶液应用_小火或间断_加热；海藻酸钠溶液必须_冷却至室温_才能加入酵母细胞；注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应以恒定速度缓慢地滴入_CaCl2溶液_中形成_凝胶珠_。(3)该实验小组用如图所示的装置来进行葡萄糖发酵。为使该实验中所用到的固定化酵母细胞可以反复运用，实验过程中，一定要在_无菌_条件下进行。加入反应液后的操作是关闭_活塞1和活塞2_。装置的长导管的作用是_释放CO2，减小反应柱内压力并可防止其他微生物污染_。解析(1)由于细胞相对酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法。(2)配制海藻酸钠溶液：小火、间断加热、定容，如果加热太快，
11、海藻酸钠会发生焦糊。海藻酸钠溶液与酶母细胞混合；冷却后再混合，注意混合均匀，不要进入气泡。注射器中的海藻酸钠和酵母菌细胞的混合物应滴入氯化钙溶液中形成凝胶珠。(3)为使该实验中所用到的固定化酵母细胞可以反复运用，实验过程中，一定要在无菌条件下进行。加入反应液后为了在无氧条件下进行酒精发酵，应关闭活塞1和活塞2。装置的长导管起到释放CO2，减小反应柱内压力并可防止其他微生物污染的作用。15为了探索海藻酸钠固定化对绿球藻生长的影响，以及固定化藻对含Zn2污水的净化作用，科研人员用筛选到的一株绿球藻进行实验，流程及结果如下。请回答下列问题：(1)实验中的海藻酸钠作用是_包埋绿球藻(包埋剂)_，CaC
12、l2的作用是_与海藻酸钠反应形成凝胶球(凝固剂)_。(2)为洗去凝胶球上残余的CaCl2和其他污染物，并保持绿球藻活性，宜采用_培养液(生理盐水)_洗涤。图1中1.0%海藻酸钠组培养24h后，移去凝胶球，溶液呈绿色，原因是_海藻酸钠浓度过低(凝胶球孔径过大)_。(3)为探索固定化藻对含Zn2污水的净化作用，应选用浓度为_2.0%_海藻酸钠制备凝胶球。(4)图2中空白凝胶球组Zn2浓度下降的原因是_凝胶吸附Zn2_。结合图1和图2分析，固定化藻的实验组2448 h间Zn2浓度下降速度较快的主要原因是_绿球藻生长(增殖)速度快_；7296h间Zn2浓度下降速度较慢的原因有_绿球藻生长(增殖)速度减
13、慢，溶液中Zn2浓度较低_。解析(1)海藻酸钠在固定化绿球藻的过程中作为包埋剂。CaCl2可与海藻酸钠反应，促使海藻酸钠形成凝胶球。(2)利用培养液或生理盐水等洗涤凝胶球不至于造成绿球藻过量吸水或失水，从而保持正常的活性状态。1.0%海藻酸钠组移去凝胶球，溶液呈绿色，说明绿球藻逸出了凝胶球，原因是制备凝胶球时，使用的海藻酸钠浓度过低，导致凝胶球孔径过大。(3)图1显示，在不同浓度的海藻酸钠的作用下，当海藻酸钠浓度为2.0%时，固定化的绿球藻数量最多，故探索固定化藻对含Zn2污水的净化作用，应选用浓度为2.0%的海藻酸钠制备凝胶球。(4)空白凝胶球中无绿球藻，故该组Zn2浓度下降是空白凝胶有吸附作用所致。图1显示，固定化藻的实验组2448 h间绿球藻数量增加快，而7296 h间绿球藻数量基本不同，这是导致两个时间段Zn2浓度下降速度不同的原因。
