1、第13单元 细胞工程、基因工程（含生物技术的安全性与伦理问题）（A）注意事项：1答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试题卷和答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。2选择题的作答：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。3非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。4考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。第卷（选择题）一、单项选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。1下列有关基因工程的叙述，错误的是（ ）A
2、限制酶用于断开特定部位的磷酸二酯键BDNA连接酶将黏性末端的氢键连接起来C目的基因须有运载体导入受体细胞D最后需要检测目的基因是否已成功表达2除了在细胞内可进行DNA复制外，在体外利用PCR技术也能复制DNA。下列有关二者共同特点的叙述，不正确的是（ ）A将亲代DNA双链解开并不都需要用解旋酶B解链过程中都破坏了DNA双链中的氢键C都具有边解旋边复制和半保留复制的特点D在DNA聚合酶作用下复制时都遵循碱基互补配对原则3抗菌肽对治疗癌症有一定作用，下图表示抗菌肽合成过程。下列相关叙述错误的是（ ）A用PCR克隆目的基因不需要DNA解旋酶B基因表达载体含有启动子和终止子C筛选菌种时用基因探针检测相
3、关蛋白质D分离纯化的目的是获得较纯净的抗菌肽4下列生物技术操作对遗传物质的改造，不会遗传给子代的是（ ）A将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌，筛选获得基因工程菌B将花青素代谢基因导入植物体细胞，经组培获得花色变异植株C将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，培育出产低乳糖牛乳的奶牛D将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，进行基因治疗5下列关于植物体细胞杂交和植物组织培养技术的叙述，正确的是（ ）A植物组织培养过程需在无菌且无光的条件下进行B植物体细胞杂交过程能体现出细胞膜具有流动性的特点C杂种细胞的细胞核融合完成是细胞融合完成的标志D植物体的叶肉细胞能在一定条件下经脱分化形成胚状体6下图列举了几种植物
4、的育种方式，下列相关叙述正确的是（ ） A甲过程形成的c细胞的染色体数一定是a细胞的两倍B乙方式中射线处理后获得的材料大部分出现有利性状C与杂交育种相比，丙方式能克服远缘杂交不亲和的障碍D细胞c发育成新植株涉及到同源染色体的联会与分离7下列关于动物克隆和胚胎工程技术的叙述，错误的是（ ）A克隆羊多利是将乳腺细胞的核移植到去核卵细胞中培育成的B用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞C经超数排卵并配种后获得受精卵，不能直接移植到受体代孕产仔D运用胚胎移植技术培育的试管牛属于动物克隆范畴8动物细胞培养和植物组织培养的比较如下表所示，其中对应错误的是（ ）9高等动物胚胎干细胞分裂过程中，发生
5、在同一时期的是（ ）ADNA的复制和同源染色体的分离B染色体的出现和纺锤体的出现C染色单体的形成和着丝粒的分裂D中心体的复制和染色体组数的加倍10下图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述不正确的是（ ）A可用灭活的仙台病毒诱导细胞融合B两两融合的细胞都能在HAT培养液中生长C杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D细胞膜的流动性是细胞融合的基础11下列关于胚胎发育和生物工程的叙述，错误的是（ ）A在动物的饲料中添加一定量的促性腺激素能促使超数排卵B早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血
6、清C卵细胞膜和透明带发生生理反应是防止多精入卵的两道屏障D内细胞团具有发育的全能性，进一步扩大会导致透明带的破裂12近20年来，我国的胚胎工程专家相继成功地对家兔、绵羊和牛等动物进行了分割胚胎移植。下列有关叙述错误的是（ ）A目前，经胚胎分割产生的同卵双胎的成功率最高B分割胚胎移植所需要的主要仪器为实体显微镜和显微操作仪C胚胎移植中，供体和受体相当于双亲中的父本和母本D胚胎分割产生的后代个体表现型不完全相同13下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是（ ） A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的T淋巴细胞B是去除骨髓瘤细胞的细胞核后进行细胞融合C中的融合细胞同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤
7、细胞的特性D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群14下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，错误的是（ ）A用同样方法从等体积猪血和猪肝中提取的 DNA 量相近B实验中利用DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同的原理C用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行沸水浴加热D菜花提取的DNA滤液中，加入冷酒精有利于提取DNA15随着转基因技术的发展，“基因污染”应运而生，关于“基因污染”，下列说法不正确的是（ ）A转基因作物可通过花粉扩散到它的近亲作物上B“基因污染”可能会破坏原有环境的稳定C基因污染难以消除，是一种可被扩散的污染D外源基因来源于自然界，不存在安全性问题二、不定项选择题：本题共5小题，每小题
8、3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。16如图为烟草植物组织培养过程的流程图。下列有关叙述错误的是（ ） A对过程获取的根组织块应做较彻底的灭菌处理 B过程是脱分化，培养基中需加入一定比例的生长素和细胞分裂素 C过程是再分化，不需要光照，其实质是基因的选择性表达 D一般将愈伤组织包裹上人工种皮以获得人工种子17如图表示克隆过程中核移植成功率与供核细胞分化程度的关系。下列叙述正确的有几项（ ） 动物体细胞核移植实验的成功说明高度分化的动物体细胞具有全能性 动物体细胞核移植过程中选用的卵母细胞应培养至减数第二次分裂中期 实验中得到的
9、重组胚胎不一定需要移入代孕动物体内才能发育成新个体 实验结果表明核移植的成功率与供核细胞分化程度呈负相关 A一项 B二项 C三项 D四项18下图为受精作用及胚胎发育示意图，a、b代表两个发育时期，相关叙述错误的是（ ）A过程需用促性腺激素处理使精子获能B若对胚胎进行分割，需注意将b均等分割C在过程中，细胞均没有发生分化Db与a相比，每个细胞内核DNA总量不变19科学家将含人体-抗胰蛋白酶基因的表达载体注射到羊的受精卵中，该受精卵发育的雌羊乳汁中含有-抗胰蛋白酶。下列相关叙述正确的是（ ）A乳腺细胞的中心体参与-抗胰蛋白酶的分泌B胚胎干细胞内-抗胰蛋白酶基因能进行复制C卵细胞中不一定含有-抗胰蛋
10、白酶基因D唾液腺细胞内能表达-抗胰蛋白酶基因20下图为农杆菌Ti质粒的T-DNA区段结构示意图。农杆菌附着植物细胞后，T-DNA首先在农杆菌中从右边界到左边界被剪切、复制，然后进入植物细胞并整合到染色体上，继而诱发细胞异常生长和分裂，形成植物肿瘤，以下有关叙述正确的是（ ）ATi质粒存在于农杆菌的拟核DNA处B植物肿瘤的形成与A、B两个基因的表达有关C清除植物肿瘤组织中的农杆菌后肿瘤不再生长D利用T-DNA 进行转基因时需要保留LB、RB序列第卷（非选择题）三、非选择题：本题共5小题，共55分。21（10分）下图表示细胞融合技术示意图，据图回答相关问题：（1）若想培育出有性杂交后代，则d细胞是
11、_，其发育成新个体的过程中，细胞_（填“是”或“否”）具有联会行为。（2）在培育出体细胞杂交植株过程中，植物体细胞融合完成的标志是_，d细胞须通过_技术才能发育成体细胞杂交植株。（3）单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。若a是小鼠骨髓瘤细胞，则b是_细胞，经筛选得到的d细胞具有的特点是_，获得的单克隆抗体具有_的特点。与植物细胞融合相比，动物细胞融合特有的促融方法是使用_；动物细胞培养过程中的气体环境是_。制备的单克隆抗体与抗癌药物结合可制成“生物导弹”，直接作用于癌细胞。此处叙述的“抗癌药物”_（填“是”或“否”）抗原。用“生物导弹”治疗癌症的方法优于化疗的原因是
12、_。（4）某病毒衣壳外的包膜上有5种蛋白棘突（包括GP蛋白和VP系列蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。若利用转基因技术生产该病毒蛋白疫苗，则目的基因是_基因，以此病毒包膜蛋白作为疫苗比较安全的原因是 。22（12分）随着科学技术的发展，人们可以根椐需求来改选生物的性状，在许多领域取得可喜的成果。例如培育出转肠乳糖酶基因的“低乳糖奶牛”，这头奶牛的奶中不含乳糖或乳糖含量很低。请回答下列问题：（1）培养转基因哺乳动物时，与用早期胚胎细胞相比较，受精卵的优势是_。（2）若受精卵经过体外培养，形成_，再移植到受体母牛体内，移植到受体母牛子宫内的胚胎能够存活的原因是_。培养过程中，在培
13、养液中添加一定量的_，以防止杂菌污染，还应定期更换培养液，其目的是_。（3）构建基因表达载体时，需要获取仅在_细胞中特异性表达基因的启动子，以使乳汁中的乳糖含量 。23（11分）下图为我国首例完全自主培育的克隆猫“大蒜”的培育过程示意图。这次成功培育克隆猫是世界上为数不多的成功案例之一，标志着我国在克隆领域又迈进了一大步。请回答下列有关问题：（1）进行过程和时，需要为培养细胞提供无菌、无毒的环境，其具体操作有_（答出2点即可）。（2）核移植前需将采集到的卵母细胞培养至_期。从细胞水平分析，与取体细胞的细胞核进行移植相比，过程直接将猫“大蒜”的体细胞注人去核卵母细胞的优势是_。（3）过程通常用去
14、核卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大易操作、营养物质丰富外，还因为它的细胞质中可能含有_；去核其实是去除_。（4）图中过程称为_，进行过程前，应对代孕猫和供体猫做同期发情处理，目的是_。24（10分）稻瘟病是水稻最重要的病害之一，为达到防治目的，科研人员通过转基因技术培育出了抗稻瘟病水稻新品种。回答下列问题：（1）构建基因表达载体时，通常用不同种限制酶切割目的基因形成两个末端，其目的是。（2）通过RT-PCR技术以抗稻瘟病基因的RNA为模板扩增出cDNA。在PCR过程中，两个引物是 酶的结合位点；用cDNA单链与该抗性水稻植株的单链DNA进行分子杂交，可能出现游离的单链区，其原因是 。（3）如
15、果一个抗性基因整合到非抗性水稻的一条染色体上，得到的二倍体转基因抗性植株自交，子代中抗性与非抗性植株的数量比为。（4）关于转基因生物安全性问题的争论，主要表现在三个方面： 。25（12分）水稻胚乳中含直链淀粉和支链淀粉，直链淀粉所占比例越小糯性越强。科研人员将能表达出基因编辑系统的DNA序列转入水稻，实现了对直链淀粉合成酶基因（Wx基因）启动子序列的定点编辑，从而获得了3个突变品系。（1）将能表达出基因编辑系统的DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时，所需的酶是_，重组载体进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程称为_。（2）根据启动子的作用推测，Wx基因启动子序列的改变影响了_，从而改变了W
16、x基因的转录水平。与野生型水稻相比，3个突变品系中Wx基因控制合成的直链淀粉合成酶的氨基酸序列_（填：发生或不发生）改变，原因是_。（3）为检测启动子变化对Wx基因表达的影响，科研人员需要检测Wx基因转录产生的mRNA（Wx mRNA）的量。检测时分别提取各品系胚乳中的总RNA，经_过程获得总cDNA。通过PCR技术可在总cDNA中专一性的扩增出 Wx基因的cDNA，原因是_。（4）各品系Wx mRNA量的检测结果如图所示，据图推测糯性最强的品系为_，原因是_。第13单元 细胞工程、基因工程（含生物技术的安全性与伦理问题）（A）答案第卷（选择题）一、单项选择题：本题共15小题，每小题2分，共3
17、0分。每小题只有一个选项符合题目要求。1【答案】B【解析】本题考查基因工程。每种限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定位点进行切割，断开磷酸二酯键，A项正确；DNA连接酶将黏性末端的磷酸二酯键连接起来，B项错误；目的基因不能直接导入受体细胞，需要与运载体结合，构建基因表达载体后才能导入受体细胞，C项正确；基因工程的最后步骤需要检测目的基因是否已成功表达，D项正确。2【答案】C【解析】本题考查PCR技术、DNA复制等。在细胞内进行DNA复制时，需要解旋酶打开双链之间的氢键，在体外进行PCR扩增时，利用高温即加热至9095变性破坏双链之间的氢键，A、B两项正确；细胞内进行DNA复制时是边解旋
18、边复制的，在体外进行利用PCR技术扩增DNA时是先解链后复制的，即先将亲代DNA受热变性后解链为单链，再降低温度使引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，C项错误；不管是在细胞内进行DNA复制，还是在体外利用PCR技术扩增DNA，在DNA聚合酶作用下复制时都遵循碱基互补配对原则，D项正确。3【答案】C【解析】用PCR克隆目的基因时，利用高温变性，不需要DNA解旋酶；基因表达载体一般由目的基因、标记基因、启动子和终止子等组成；基因探针可检测目的基因是否导入受体细胞或目的基因是否转录成mRNA，但不能检测相关蛋白质；分离纯化的目的是获得较纯净的抗菌肽。4【答案】D【解析】将含
19、胰岛素基因表达载体的重组质粒转入大肠杆菌获得的转基因菌，可以通过二分裂将胰岛素基因传给后代，A不符合题意；将花青素代谢基因导入植物体细胞，再经植物组织培养获得的植株所有细胞均含有花青素代谢基因，花青素代谢基因会随该植物传给后代，B不符合题意；将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，培育出产低乳糖牛乳的奶牛所有细胞均含有肠乳糖酶基因，可以遗传给后代，C不符合题意；该患者进行基因治疗时，只有淋巴细胞含有该腺苷酸脱氨酶基因，性原细胞不含该基因，故不能遗传给后代，D符合题意。故选D。5【答案】B【解析】本题考查植物体细胞杂交和植物组织培养技术的知识内容。植物组织培养应在无菌条件下进行，再分化过程中需要光诱导细胞
20、中叶绿素的合成，A项错误；植物体细胞杂交过程中需要诱导原生质体的融合，此过程体现了细胞膜具有流动性的特点，B项正确；植物体细胞融合完成的标志是融合的原生质体形成新的细胞壁，进而成为杂种细胞，C项错误；植物体的叶肉细胞能在一定条件下经脱分化形成愈伤组织，再经再分化形成胚状体，D项错误。6【答案】C【解析】本题考查植物体细胞杂交、育种、植物组织培养等知识内容。不同种的细胞内染色体数目不一定相同，c细胞的染色体数不一定是a细胞的两倍，A项错误；基因突变具有多害少利性，乙方式中射线处理后获得的材料小部分出现有利性状，B项错误；丙方式为细胞工程育种，与传统杂交育种相比，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍
21、，C项正确；细胞c发育成新植株是植物组织培养的过程，进行有丝分裂，没有同源染色体的联会与分离，D项错误。7【答案】D【解析】本题考查动物克隆和胚胎工程技术。克隆羊多利是将乳腺细胞的核移植到去核卵细胞中培育成的，A项正确；在动物体细胞核移植中，用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，B项正确；经超数排卵并配种后获得受精卵要发育成早期胚胎才可移植到受体代孕产仔，C项正确；运用胚胎移植技术培育的试管牛属于有性生殖的产物，而动物克隆属于无性生殖，D项错误。8【答案】B【解析】动物细胞培养的培养基是液体培养基，成分主要是葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清，植物组织培养的培养基是固体培养基
22、，成分主要是矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、有机添加剂，B项错误。9【答案】B【解析】本题考查胚胎干细胞分裂过程中的有关变化。DNA的复制发生在分裂间期，同源染色体的分离发生在减数第一次分裂后期，A项不符合题意；染色体和纺锤体的出现均发生在有丝分裂前期，B项符合题意；染色单体的形成在分裂间期，着丝粒的分裂在有丝分裂后期，C项不符合题意；中心体的复制在分裂间期，染色体组的加倍发生在有丝分裂后期着丝点分裂后，D项不符合题意。10【答案】B【解析】诱导动物细胞融合的方法有电激、聚乙二醇、灭活的病毒（如灭活的仙台病毒）等，A正确；两两融合的细胞包括免疫B细胞与免疫B细胞融合的具有同种核的细胞、骨髓瘤
23、细胞与骨髓瘤细胞融合的具有同种核的细胞、免疫B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞，骨髓瘤细胞虽然能无限增殖，但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，免疫B细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不具有无限增殖的本领，所以在HAT筛选培养液中，两两融合的具有同种核的细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，B错误；因每个免疫B细胞只分泌一种特异性抗体，因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌的抗体，不一定都是人类所需要的，还需要进一步把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细胞筛选出来，C正确；动物细胞融合是以细胞膜的流动性为基础的，D正确。11【答案】A【解析】本题考查胚胎发育和胚胎工程的知识内容。促性腺
24、激素的化学本质是蛋白质，不能口服，应该静脉注射，A项错误；早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清，B项正确；卵细胞膜反应和透明带反应是防止多精入卵的两道屏障，C项正确；囊胚的内细胞团具有发育的全能性，可发育成胎儿的各种组织，进一步扩大会导致透明带的破裂，D项正确。12【答案】C【解析】本题考查胚胎分割和胚胎移植。到目前为止，最常见的是经分割产生的同卵双胎，而同卵多胎成功的比例都很小，A项正确；分割胚胎移植所需要的主要仪器为实体显微镜和显微操作仪，B项正确；胚胎移植中，供体雄性个体和供体雌性个体相当于双亲中的父本和母本，C项错误；胚胎分割产生的后代表现型可能不同，因为表现型可能会受到
25、环境的影响，分割后的细胞一般在不同的母畜子宫内发育，因而表现型可能不同，D项正确。13【答案】D【解析】本题考查单克隆抗体的制备过程。是从已免疫的小鼠脾脏中获得的具有免疫能力的B淋巴细胞，A项错误；过程为B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程，原理是细胞膜具有一定的流动性，B项错误；如果只考虑两两融合，可能有3种融合细胞，即杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞，B淋巴细胞自身融合的细胞，只有杂交瘤细胞同时具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特性，C项错误；过程表示用抗体阳性检测筛选出能无限增殖并能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞群，D项正确。14【答案】A【解析】本题考查DNA粗提取与鉴定实验。猪血液中红细胞没有
26、DNA，因此等体积的猪血提取的DNA量小于猪肝，A项错误；实验中利用DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同的原理，B项正确；用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行沸水浴加热，C项正确；DNA在冷酒精中的溶解度很低，加入冷酒精有利于提取DNA，D项正确。15【答案】D【解析】本题考查转基因生物的安全性问题。基因污染是可以随着自然界中的生物扩散的，如转基因作物可通过花粉散落到它的近亲作物上，从而污染生物基因库，A项正确；杂草、害虫从它的近亲获得抗性基因，具有新的性状，可能破坏生态系统的稳定性，B项正确；基因污染指基因工程中目的基因转移到生物体内可能对生物多样性、生态环境和人体健康造成潜在风险和威胁，基因
27、污染随遗传物质复制而复制，难以清除，而且会随着生物的繁殖过程不断增殖，C项正确；外源基因一般来源于自然界，但也可能存在安全性问题，D项错误。二、不定项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。16【答案】ACD【解析】对过程获取的根组织块应进行消毒处理，如果采用灭菌技术，会使根组织块失去活力，无法进行组织培养，A项错误；过程表示脱分化，需选用营养充分、植物激素比例合适的培养基，B项正确；过程发生再分化，其实质是基因的选择性表达，需要在光照条件下进行，C项错误；将胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等包裹上人工种皮可
28、获得人工种子，D项错误。17【答案】C【解析】动物体细胞核移植实验的成功说明高度分化的动物体细胞的细胞核仍具有全能性，项错误；动物体细胞核移植过程中选用的卵母细胞应培养至减数第二次分裂中期，项正确；非洲爪蟾是两栖动物，其重组细胞发育成的重组胚胎不需要移入代孕动物体内，只有哺乳动物才需要移入代孕动物体内，项正确；据图分析可知，随着供核细胞分化程度增高，核移植成功率下降，项正确。18【答案】ABC【解析】促性腺激素的作用是促进母畜排卵，不能使精子获能；图中a、b分别表示囊胚和原肠胚，对胚胎进行分割一般选用囊胚而不用原肠胚，因为囊胚之后，细胞已开始分化；受精卵形成幼体过程中，其细胞增殖均为有丝分裂，
29、故囊胚和原肠胚的每个细胞内核DNA总量不变。19【答案】BC【解析】高尔基体是细胞内蛋白质的加工包装车间，乳腺细胞的高尔基体参与-抗胰蛋白酶的分泌；胚胎干细胞内-抗胰蛋白酶基因能随着细胞的分裂而进行复制；基因工程导入的基因一般为单个基因，减数分裂过程同源染色体分离，卵细胞中不一定含有-抗胰蛋白酶基因；唾液腺细胞内-抗胰蛋白酶基因不表达。20【答案】ABD【解析】本题考查农杆菌Ti质粒的T-DNA区段结构示意图。根据以上分析可知，Ti质粒存在于农杆菌的拟核DNA处，A正确；图中A、B两个基因的表达可以合成生长素和细胞分裂素，在这两种激素的作用下诱发植物的异常生长和分裂，形成植物肿瘤组织，B正确；
30、由于T-DNA携带目的基因已经进入植物细胞并整合到染色体上，因此清除植物肿瘤组织中的农杆菌后，植物细胞内仍然具有A、B两个基因，故肿瘤还会生长，C错误；根据题意，T-DNA首先在农杆菌中从右边界到左边界被剪切、复制，然后进入植物细胞并整合到染色体上，因此利用T-DNA 进行转基因时需要保留LB、RB序列，D正确。第卷（非选择题）三、非选择题：本题共5小题，共55分。21（10分）【答案】（1）受精卵 否 （2）杂种细胞再生出细胞壁 植物组织培养 （3）经免疫的B淋巴 既能无限增殖，又能产生特定的抗体 特异性强、灵敏度高、可大量制备 灭活的病毒 95%的空气和5%的CO2 否 不损伤正常细胞，且
31、用药剂量少，毒副作用小 （4）GP蛋白 蛋白质不能侵染细胞，不破坏细胞结构22（12分）【答案】（1）全能性高，能直接发育形成新个体 （2）桑葚胚或囊胚 受体母牛对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应 抗生素 防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害 （3）（优良）奶牛乳腺 降低【解析】（1）培育转基因哺乳动物时，与用早期胚胎细胞相比较，受精卵的优势是全能性高，能直接发育形成新个体。（2）移植到受体母牛体内的早期胚胎一般为桑葚期胚或囊胚，移植到受体母牛子宫内的胚胎能够存活，是因为受体母牛对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，在动物细胞培养过程中，为防止杂菌污染，在培养液中添加一定量的抗生素；定
32、期更换培养液的目的是防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害。（3）构建基因表达载体时，需要获取仅在（优良）奶牛乳腺细胞中特异性表达基因的启动子，以使乳汁中的乳糖含量降低。23（11分）【答案】（1）对培养皿和所有培养用具进行无菌处理；定期更换培养液（2）M（或减数分裂中） 避免取核过程对细胞核造成损伤（3）促进（或激活）细胞核全能性表达的物质 纺锤体染色体复合物（4）胚胎移植 使供、受体生殖器官的生理变化相同，为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境 24（10分）【答案】（1）不同的黏性 防止酶切产物自身环化（连接）（2）热稳定DNA聚合 DNA分子含有内含子、非编码区等序列，mRNA分子中没
33、有相应互补的碱基序列（cDNA链和单链DNA存在没有互补配对的序列，仍然为两条游离的单链），所以出现游离的单链区 （3）31 （4）食物安全、生物安全和环境安全【解析】（1）构建基因表达载体时，为了防止酶切产物自身环化（连接），通常用不同种限制酶切割目的基因形成两个不同的黏性末端。（2）通过RT-PCR技术以抗稻瘟病基因的RNA为模板扩增出cDNA。在PCR过程中，两个引物是热稳定DNA聚合酶的结合位点。因为DNA分子含有内含子、非编码区等序列，mRNA分子中没有相应互补的碱基序列（cDNA链和单链DNA存在没有互补配对的序列，仍然为两条游离的单链），所以用cDNA单链与该抗性水稻植株的单链D
34、NA进行分子杂交，可能出现游离的单链区。（4）转基因生物安全性问题的争论主要表现在食物安全、生物安全和环境安全三个方面。25（12分）【答案】（1）限制性核酸内切酶和DNA连接酶 转化 （2）RNA聚合酶与启动子的识别和结合 不发生 编码直链淀粉合成酶的碱基序列中不含启动子 （3）逆转录（或：反转录） 引物是根据Wx基因的一段已知序列设计合成的（或：引物能与Wx基因的cDNA特异性结合） （4）品系3 品系3的Wx mRNA最少，控制合成的直链淀粉合成酶最少，直链淀粉合成量最少，糯性最强【解析】本题考查基因工程的知识点，要求学生掌握基因工程的操作工具和操作步骤是解决问题的关键。识记并理解基因工
35、程中工具酶的种类和作用，把握基因表达载体构建的过程，理解启动子的功能和编码蛋白质的基因的结构，这是该题考查的难点；把握PCR扩增技术的操作过程和引物的作用，这是突破第（3）问的关键。（1）将目的基因与Ti质粒构建基因表达载体时，需要限制酶的切割，将目的基因插入载体时需要DNA连接酶的连接，重组载体进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程叫做转化。（2）根据以上分析可知，启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点，如果启动子序列改变将会影响RNA聚合酶与之结合和识别，进而影响基因的转录水平，在真核生物中，编码蛋白质的序列是基因中编码区，编码区中不包括启动子序列，因此直链淀粉合成酶的基因碱基序列中不含有启动子，因此3个突变品系中Wx基因中控制合成直链淀粉酶的氨基酸序列不发生改变。（3）以mRNA为模板合成cDNA的过程为逆转录，利用PCR技术扩增Wx基因的cDNA，需要以Wx基因合成的引物，这样引物能够在总cDNA中与Wx基因的cDNA特异性结合，从而利用PCR扩增技术转移性扩增出Wx基因的cDNA。（4）识图分析可知，图中品系3的Wx基因的mRNA的含量最少，那么合成的直链淀粉酶最少，直链淀粉合成量最少，因此该水稻胚乳中含的直链淀粉比例最小，糯性最强。
