1、课后定时检测案43细胞工程基础对点练考纲对点夯基础考点一植物的组织培养()1下图是某组织培养过程的简图。下列有关说法，正确的是()花粉粒愈伤组织胚状体植株A花药离体培养的条件与种子萌发的条件完全相同B若花粉粒核中有两个或多个染色体组，则所得植株为二倍体或多倍体C过程都是细胞分化过程，因此起作用的激素只有生长素D该过程体现了植物细胞的全能性2“白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是()A除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶B通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG
2、诱导和灭活的病毒诱导C杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁D愈伤组织形成“白菜甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程考点二动物的细胞培养与体细胞克隆()细胞融合与单克隆抗体()3下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是()A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B克隆培养法培养过程中少数细胞的基因型会发生改变C二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的D恶性细胞系的细胞可进行传代培养4下列事实属于细胞克隆的是()A棉花根尖细胞经诱导形成幼苗B单细胞的DNA在体外大量扩增C培养动物杂交瘤细胞D小鼠体细胞经诱导培育成小鼠52020上海虹口区高三模拟下图为单克隆抗体制备过程示意图，图中X、Y
3、细胞分别是()AT淋巴细胞、骨髓瘤细胞BT淋巴细胞、杂交瘤细胞CB淋巴细胞、骨髓瘤细胞 DB淋巴细胞、杂交瘤细胞提能强化练考点强化重能力62020江苏南京市、盐城市高三调研下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是()A用胰蛋白酶处理动物组织后，可用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液B少数细胞在连续培养50代后可获得不死性，是某些基因选择性表达的结果C根据在高倍镜下观察到基因突变的比例可推知某化学药品的毒性DPEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养能得到优良动物个体7将鱼的体细胞核植入去核的卵母细胞中，所得的重组细胞可培育为克隆鱼。下图中能正确表示动物克隆技术原理的是()82019天津河
4、北区高三质量检测下图是通过植物体细胞杂交技术获得“番茄马铃薯”植株的技术流程图，下列说法正确的是()A图中过程表示再分化的过程B植物体细胞融合完成的标志是原生质体融合C已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则“番茄马铃薯”属于三倍体D人工种子是由发育到f过程的结构包裹上人工种皮制备而成的大题冲关练综合创新求突破92018海南卷，31甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质。为了改善黄瓜的品质，科学家采用农杆菌转化法将一种甜蛋白基因成功导入黄瓜细胞，得到了转基因植株。回答下列问题：(1)用农杆菌感染时，应优先选用黄瓜_(填“受伤的”或“完好的”)叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，选用这种叶片的理由是_。(2
5、)若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白，则表明该重组质粒中_已转移到植物细胞中且能够表达；用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为11，则说明甜蛋白基因已经整合到_(填“核基因组”“线粒体基因组”或“叶绿体基因组”)中。(3)假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产，若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗，应选用_作为外植体进行组织培养。(4)通常，基因工程操作主要有4个步骤，即目的基因获取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。因此，基因工程的含义可概括为_。102020湖南省怀化市高三模拟单克隆抗体特异性强、灵敏度
6、高，可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示：(1)过程常用的方法是_。(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生_免疫。从小鼠体内分离的细胞是_，细胞应具有的特点是_。(3)体外培养细胞，首先应保证其处于_的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度等。(4)对于转基因成功的细胞还要进行克隆化培养和_检测。(5)若要预防H7N9禽流感，可用图中的_作为疫苗。112019河南省洛阳市高三第二次统一考试草莓营养价值高且有保健功效，但却容易受到病毒的感染。科学家常采用两种方法培育新品种：其一，培育无病毒组培苗；其二，将草莓轻型黄边病毒的外壳蛋白基因(
7、SMYELVCP)导入草莓基因组中培育出转基因抗病毒草莓。请分析回答下列问题：(1)若培育无病毒组培苗，通常取植株的_进行组织培养。(2)利用PCR技术扩增目的基因 SMYELVCP，其前提是_，以便根据这一序列合成引物。为保持pH基本不变，需要在PCR反应体系中加入_。(3)重组载体上应含有特定的_(填“复制原点”、“启动子”或“标记基因”)，它能被受体细胞的_所识别，以便于催化转录过程。为检测目的基因是否转录出mRNA，常采用分子杂交技术，该技术的具体做法是_。(4)草莓根系分布浅、蒸腾量大，对水分要求严格。我国西北一些地区曾大量种植草莓，但由于降雨量少，致使许多地方的草莓长成半死不活状，
8、其失败的原因主要是违背了_原理。122019四川省高三下学期二诊考试由于“人人杂交瘤技术”存在杂交瘤细胞体外传代不稳定、抗体亲合力低等缺陷，目前单克隆抗体大多是鼠源性的，应用于人体治疗时存在诸多问题。科学家通过基因工程技术，可以最大程度降低抗体的鼠源性，降低甚至消除人体对抗体的排斥反应。回答下列问题：(1)从经过抗原免疫个体的_细胞中提取mRNA，通过_方法获取目的基因。将目的基因在体外大量扩增可以采用_技术。(2)为防止目的基因与质粒发生自身环化与随意连接，在切割目的基因和质粒时，应该注意_。为了使重组质粒更易导入受体菌完成转化过程，可以采用_处理受体菌。(3)检测受体细胞是否合成抗体的方法
9、是_。基因工程制备的单抗与杂交瘤技术制备的单抗相比，最突出的优点是_。132020四川达州模拟现代生物工程技术推动了医药学、免疫学和生态学的发展，依据现代生物工程技术的相关知识和原理回答下列问题：(1)胚胎移植时，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生_反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。通过试管动物技术培养发育成的早期胚胎，再经过_可产生多个基因型相同的后代。(2)单克隆抗体的制备中，将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再用特定的_培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞后，还需进行_，经过多次筛选，就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。最后获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是_。(3)
10、科学家将生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过_等方法，导入哺乳动物的受精卵中，获得转基因动物，再利用_技术获得大量的转基因克隆动物作为乳腺生物反应器，来生产生长激素，用于治疗矮小症。142020山东济南高三模考蓝藻兼具微生物和植物的优点，是一种独特的基因工程受体系统。很多蓝藻含有质粒，但其质粒不能直接作为运载体，需要构建成穿梭质粒表达载体，才能使目的基因在蓝藻中有效的复制和表达。回答下列问题：(1)据图1推测，与普通基因表达载体相比，穿梭质粒表达载体既能在_中复制，也能在_中复制。为了筛选转入了穿梭质粒表达载体的蓝藻，应在选择性培养基中添加_。(2)若大肠杆菌作为受体细
11、胞时，应选用_处理使其成为感受态细胞。采用基因枪法将目的基因导入蓝藻前，可使用_(填“纤维素酶和果胶酶”或“溶菌酶”或“胶原蛋白酶”)去除蓝藻的细胞壁。(3)已知DNA复制时，子链的延伸方向是53。使用PCR技术检测转基因蓝藻中是否存在人胸腺素基因可选择图2中1、2、3、4四种单链DNA片段中的_作为引物，此过程还需要_酶。课后定时检测案431解析：花药离体培养所需条件要求更高，需要MS培养基，另外还需要适宜的pH、温度和光照，而种子萌发需要适宜的温度、水分等，A错误；花粉培养形成的植株称为单倍体，B错误；在细胞分化过程中有多种激素起作用，其中起主要作用的是细胞分裂素和生长素，C错误；在该过程
12、中，单个细胞最终培养成了植株，体现了植物细胞的全能性，D正确。答案：D2解析：除去细胞壁的酶有纤维素酶和果胶酶；诱导植物原生质体融合不能用灭活的病毒；杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁；愈伤组织形成“白菜甘蓝”植物体属于再分化过程。答案：C3解析：动物细胞在培养过程中有接触抑制现象，细胞在培养瓶中会贴壁生长，最终会形成一层细胞，相互接触后停止生长。克隆培养法培养的过程中，仅有极少数细胞的基因型会发生改变。二倍体细胞的传代培养一般传至10代后就不易传下去了。恶性增殖细胞系的细胞具有不死性，可以进行传代培养。答案：A4解析：细胞克隆是将一个细胞进行培养，使之不断分裂，形成一个细胞群的过程。培
13、养动物杂交瘤细胞属于细胞克隆。答案：C5解析：制备单克隆抗体的细胞来源于B淋巴细胞和骨髓瘤细胞。据图分析，给小鼠注射抗原，使得小鼠产生免疫反应，形成能产生抗体的B淋巴细胞，因此X是B淋巴细胞；而Y是体外培养的骨髓瘤细胞。答案：C6解析：用胰蛋白酶处理动物组织后，可用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，A正确；少数细胞在连续培养50代后可获得不死性，这是某些基因突变的结果，B错误；基因突变在高倍镜下是观察不到的，C错误；由于动物细胞的全能性受到限制，动物细胞融合形成的杂种细胞不能培育成动物，D错误。答案：A7解析：图A表示受精作用过程；图B表示细胞融合过程；图C可表示动物克隆技术的原理；图D表示
14、的是将鱼的卵细胞核植入去核的体细胞中。答案：C8解析：据图分析可知，表示人工诱导原生质体融合的过程，A错误；植物体细胞融合完成的标志是再生出新的细胞壁，B错误；由于番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，因此植物体细胞杂交得到的“番茄马铃薯”属于异源多倍体中的异源六倍体，C错误；人工种子是用胚状体包裹上人工种皮制成的，图中f阶段为胚状体阶段，D正确。答案：D9. 解析：(1)用农杆菌感染时，应先选用黄瓜受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，理由是叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞。(2)若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白，则表明该重组质粒中甜蛋白基因已经转移到植物细胞中且能够
15、表达；用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为11，则说明甜蛋白基因已经整合到核基因组中。(3)假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产，若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗，应选用茎尖作为外植体进行组织培养。(4)通常，基因工程操作主要有4个步骤，即目的基因的获取、表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。因此，基因工程的含义可概括为按照人们的愿望进行设计，并通过体外重组和转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出符合人们需要的新生物类型。答案：(1)受伤的叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞(
16、2)甜蛋白基因核基因组(3)茎尖(4)按照人们的愿望进行设计，并通过体外重组和转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出符合人们需要的新生物类型10解析：(1)过程是将重组DNA导入动物细胞，常用的方法是显微注射技术。(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，其目的是使小鼠产生免疫反应，进而使小鼠体内产生能分泌所需抗体的已免疫的B细胞(或浆细胞)，而产生已免疫的B细胞(或浆细胞)的过程属于体液免疫。从小鼠体内分离的细胞能分泌抗体，因此是已免疫的B细胞(或浆细胞)。细胞是从细胞中筛选出来的、能分泌所需抗体的已免疫的B细胞(或浆细胞)；由于导入了无限增殖调控基因，所以细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体。(3
17、)体外培养细胞需借助动物细胞培养技术，应保证其处于无菌、无毒的环境中。(4)对于转基因成功的细胞还要进行克隆化培养和(专一)抗体检测，才能获得足量所需要的细胞。(5)疫苗为毒性弱的抗原，因此要预防H7N9禽流感，可以用图中的抗原蛋白作为疫苗。答案：(1)显微注射技术(2)体液B淋巴细胞(或浆细胞)既能无限增殖，又能产生特异性抗体(3)无菌、无毒(4)(专一性)抗体(5)抗原蛋白11解析：(1)植物的茎尖或根尖等分生区细胞几乎不含病毒，因此培育无病毒组培苗通常采用植株茎尖或根尖等分生区进行组织培养。(2)利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物
18、。为保持pH基本不变，需要在PCR反应体系中加入缓冲液。(3)为保证目的基因的表达，重组载体上应含有特定的启动子，它能被受体细胞的RNA聚合酶所识别，以便于催化转录过程。为检测目的基因是否转录出mRNA，常采用分子杂交技术，该技术的具体做法是：从转基因生物中提取mRNA，用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。如果显示出杂交带，则表明目的基因转录出了mRNA。(4)我国西北一些地区曾大量种植草莓，但由于降雨量少，致使许多地方的草莓长成半死不活状，其失败的原因主要是没有考虑生物与环境相适应，违背了生态工程遵循的协调与平衡原理。答案：(1)分生区附近(如茎尖)(2)要有一段已知目的基因的核苷酸序列缓
19、冲液(3)启动子RNA聚合酶从转基因生物中提取mRNA，用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。如果显示出杂交带，则表明目的基因转录出了mRNA(4)协调与平衡12解析：(1)获取制备单克隆抗体的目的基因，可以从经过抗原免疫个体的浆细胞中提取mRNA，然后通过逆转录的方法获得DNA，将目的基因在体外大量扩增可以采用PCR技术。(2)为防止目的基因与质粒发生自身环化与随意连接，在切割目的基因和质粒时，应该注意使用不同限制酶切割目的基因与质粒。为了使重组质粒更易导入受体菌完成转化过程，可以采用CaCl2 处理受体菌。(3)检测受体细胞是否合成抗体的方法是抗原抗体杂交。基因工程制备的单抗与杂交瘤技术制
20、备的单抗相比，最突出的优点是不具有特异细胞的抗原性、能避免产生排斥反应。答案：(1)浆逆转录PCR(2)使用不同限制酶切割目的基因与质粒CaCl2(3)抗原抗体杂交不具有特异细胞的抗原性、能避免产生排斥反应13解析：(1)胚胎移植时，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。通过试管动物技术培养发育成的早期胚胎，再经过胚胎分割和胚胎移植可产生多个基因型相同的后代。(2)单克隆抗体的制备中，将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞后，还需进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤
21、细胞。获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是：每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。(3)科学家将生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射技术等方法，导入哺乳动物的受精卵中，获得转基因动物，再利用动物体细胞核移植技术获得大量的转基因克隆动物作为乳腺生物反应器，来生产生长激素。 答案：(1)免疫排斥胚胎分割和胚胎移植(2)选择性克隆化培养和抗体检测每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体(3)显微注射技术动物体细胞核移植14解析：(1)据图1推测，与普通基因表达载体相比，穿梭质粒表达载体既能在大肠杆菌中复制，也能在蓝藻中复制。为了筛选转入了穿梭质粒表达载体的蓝藻，应在选择性培养基中添加卡那霉素。(2)若大肠杆菌作为受体细胞，应选用CaCl2处理使其成为感受态细胞。采用基因枪法将目的基因导入蓝藻前，要去掉其细胞壁，纤维素酶和果胶酶可用于去除植物细胞壁，胶原蛋白酶用于动物细胞培养中使细胞分散开，因此去除蓝藻的细胞壁可用溶菌酶。(3)据图2分析，由于DNA复制时，子链的延伸方向是53，因此设计引物时应选择2、3，PCR还需要热稳定的DNA聚合酶(或Taq酶)。答案：(1)大肠杆菌蓝藻卡那霉素(2)Ca2溶菌酶(3)2和3热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)
