1、一、选择题(每小题4分，共24分)1利用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇，从而减少了对石油资源的依赖，下图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析错误的一项是(C)A要得到微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样B图中过程常用的微生物B是酵母菌C微生物A和微生物B可利用的碳源相同D可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用解析：根据图解可知，微生物A的碳源是纤维素，故要想获得微生物A最好选择富含纤维素的土壤采集，A项正确；图中过程表示生产乙醇的过程，常用微生物是酵母菌，B项正确；微生物A所用碳源为纤维素，微生物B所用碳源为纤维素降解物，C项错误；微生物A之所以能利用纤维质原料是因为其
2、含有纤维素酶，故可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用，D项正确。2在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是(A)A用液体培养基可获得大量菌体B纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长C用液体培养基可以使菌体充分利用培养基中的营养物质D用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌解析：使用液体选择培养基培养纤维素分解菌，一方面可以获得大量纤维素分解菌，另一方面便于稀释涂布平板。3通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是(D)A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105倍的土壤稀释液0.1 mL，分别涂布于各组平板上C将培养皿倒置，37 恒温培
3、养2448小时D选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数解析：检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37 恒温培养2448小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30300的平板进行计数。4下图甲为纤维单胞菌(能产生纤维素酶)的获取过程。下列有关叙述错误的是(C)A培养基都应以纤维素为唯一碳源B图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌C所用的接种方法可对培养的微生物进行计数D可用刚果红染料鉴定，看菌落周围是否出现透明圈解析：培养液中以纤维素作为唯
4、一碳源时，只有能利用该物质的微生物才能生长繁殖，A项正确；对培养基的灭菌利用的是高压蒸汽灭菌法，对接种环采用火焰灼烧法进行灭菌，B项正确；的接种方法是平板划线法，利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离，但是不能对微生物进行计数，计数一般采用稀释涂布平板法，C项错误；当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，D项正确。5下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是(D)A根据培养基的状态可将其分为液体培养基和固体培养基B可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C利用刚果红培养基上是否形
5、成透明圈来筛选纤维素分解菌D在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌解析：在尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。6原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述，不正确的是(C)A应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用B配制以多环芳烃为唯一碳源的选择性培养基C将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上D在选择性培养基上能形成分解圈的即为所需菌种解析：筛选能够利用多环芳烃为碳源的菌种，则在被原油污染的土壤中应该含有，所以配制来源于被原
6、油污染的土壤稀释液，A正确；配制选择性培养基，该培养基与通用培养基成分的主要区别是以原油(多环芳烃)为唯一碳源，B正确；在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养基上，将土壤稀释液灭菌后会杀死原有菌种，C错误；题干有个信息“有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈”，所在选择性培养基上能形成分解圈的即为所需菌种，D正确。二、非选择题(共26分)7(12分)利用木纤维转化为新能源乙醇的原理是微生物能产生分解纤维素的酶。下图是工业上利用微生物分解纤维素生产乙醇的基本工作流程，回答相关问题。(1)图中所需的微生物若来自土壤，要统计该活菌数目，宜采用稀释涂布平板法接种，根据土壤样品的
7、稀释倍数和接种稀释液的体积统计平板上的菌落数，就能推测出样品中的活菌数。(2)分解木纤维的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种成分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶的作用是将纤维二糖分解成葡萄糖。(3)接种的微生物是酵母菌，为降低乙醇生产成本，可利用固定化酶(或固定化细胞)技术使酶能够重复使用。(4)在微生物的实验室培养过程中，对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿倒置培养。解析：(1)接种微生物的方法一般有平板划线法和稀释涂布平板法，要统计土壤样品中该活菌的数目，宜采用稀释涂布平板法接种；根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大约推测
8、出样品中的活菌数。(2)纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，其中的葡萄糖苷酶可将纤维二糖分解成葡萄糖。(3)酵母菌可以进行无氧呼吸产生酒精，故环节接种的微生物是酵母菌。为降低乙醇生产成本，可利用固定化酶(固定化细胞)技术使酶能够重复使用。(4)对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌；为避免培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置；在培养基上产生的单个菌落是同一种，在生态学中可以被称为种群。8(14分)植物的秸秆、枝叶等纤维物质是地球上最多的可再生资源，以纤维素类物质生成燃料乙醇的研究越来越受重视。纤维素酶糖化法是目前常用的方法，其操作过程如下图所示：(1)该方法中，微生物X与微生物
9、Y不同，微生物Y是酵母菌，若从土壤中获得微生物X，请写出分离的流程图：土壤取样选择培养梯度稀释将菌液涂布到特定的选择培养基上挑选产生透明圈的菌落。为了鉴别微生物X，培养基的成分为CMCNa、酵母膏、KH2PO4、琼脂、土豆汁等；在该培养基中，CMCNa的作用是提供碳源(或便于鉴别)。(2)若经选择，微生物X为木霉，则其内分解纤维素的酶至少包括C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶三种组分，这三种酶协同作用，将纤维素分解为葡萄糖。(3)在操作过程中，过程需密闭发酵以保证乙醇的产生。(4)操作发现，糖液浓度过高时，葡萄糖的产生会受到抑制，其原因是产物(葡萄糖)过多，反馈抑制了分解秸秆的酶的活性。解析：微生物Y能发酵糖液产生乙醇，故微生物Y是酵母菌。鉴别纤维素分解菌的培养基中，CMCNa能被CX酶和C1酶分解为纤维二糖，可使被刚果红染色的培养基的红色褪去，便于鉴别，也为微生物的生长提供碳源。纤维素酶是一种复合酶，至少包括C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶三种组分。酵母菌发酵产生乙醇是无氧呼吸的过程，在操作过程中应密闭发酵。随着产物(葡萄糖)的增多，反应将会受到抑制，其机理为酶的活性受到反馈抑制。
