1、非常“组合4”主观题模拟真演练(四)12020辽宁省大连市高三一模微卫星DNA是广泛分布于真核生物基因组中的简单重复序列。由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，因此，微卫星DNA可以作为分子标记，并有着广泛应用。(1)为了分离捕获到某种生物的微卫星DNA分子标记，可以用同位素标记的特定简单重复序列作为探针，与该生物的_文库进行杂交，然后再经多个步骤筛选获取微卫星DNA。(2)扩增分离到的微卫星DNA序列的PCR反应体系中含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物及热稳定DNA聚合酶等。其中dNTP的作用是_；该技术的前提是_，以便根据这
2、一序列合成引物，所以引物应选用图中_(填图中标号)。(3)PCR的基本反应步骤为_，其产物量以_形式扩增。(4)根据“微卫星DNA”的特点判断，这种分子标记可应用于_(填字母)。A人类亲子鉴定B种群遗传多样性研究C诱导基因突变D冠状病毒遗传物质测序22020山东省实验中学高三模拟人乳铁蛋白(hLF)对细菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人员开展人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体构建及转染研究，主要流程如下图，图中Ase 、Nhe 、Sal 、BamH 代表相关限制酶切点，neor为新霉素抗性基因，BLG基因为B乳球蛋白基因，GFP基因为绿色荧光蛋白基因。请回答下列相关问题：(1)过程中，不能从人
3、肌肉细胞中提取RNA用于RTPCR，是因为_。在RTPCR过程中，加入的引物需在5端添加_两种限制酶的识别序列，以便于hLF基因插入pEB中。(2)过程中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是_。(3)将转染后的山羊乳腺上皮细胞先置于含新霉素的培养液中培养，能够存活的细胞应该是导入_的细胞，再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞中_，以筛选出转染成功的细胞。(4)要获得转基因山羊，还需要将成功表达hLF的乳腺上皮细胞的细胞核移植到山羊去核卵母细胞中，再借助_技术孕育出羊羔。32020黑龙江省哈尔滨市三中高三第二次模拟3月30日，自然期刊报道了清华大学生命学院王新泉和医学院张林琦课题组关于新冠病
4、毒(SARSCoV2)的重要研究成果。该研究解析了新冠病毒表面S蛋白(抗原)与人受体蛋白ACE2的高分辨率晶体结构(新冠病毒主要通过S蛋白与受体ACE2结合侵染人体细胞)，揭示了受体ACE2特异性介导新冠病毒侵染细胞的结构基础，为治疗性抗体药物开发以及疫苗的设计奠定了坚实的基础。(1)研究发现，新冠病毒主要侵染人体肺部细胞，对机体其他部位细胞侵染能力相对较弱，可能原因是_。(2)人们可利用胚胎干细胞具有发育全能性的特点，在培养液中添加_，诱导其分化成肺泡样细胞，用来培养足量的新冠病毒以用于科学研究。(3)若用小鼠来生产新冠病毒疫苗，可将_注入到小鼠体内，再从脾脏中分离出B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融
5、合，并用_筛选出杂交瘤细胞。对上述筛选出的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，该步骤的目的是_。(4)培养杂交瘤细胞时，需要定期_，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。与传统血清抗体相比，单克隆抗体主要的优点是_。42020安徽省安庆市高三第三次模拟我国科学家利用生物工程技术成功地培育出了人溶菌酶转基因猪。回答下列问题：(1)为获取大量的人溶菌酶基因，常用_技术进行扩增，该技术的原理是_。(2)培育人溶菌酶转基因猪过程中，其核心步骤是_。目的基因进入受体细胞，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为_。(3)将受精卵培养至早期胚胎，胚胎的培养液成分一般比较复杂，除一
6、些无机盐和有机盐外，还需要维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及_等物质。体外培养受精卵时，需要提供一定浓度的CO2，其目的是_。(4)受精卵经早期胚胎培养后进行胚胎移植，移植到受体子宫中，早期胚胎的_会形成胎盘和胎膜。也可在移植前对早期胚胎进行胚胎分割而得到两个或多个胚胎，要注意将内细胞团进行均等分割，否则_。非常“组合4”主观题模拟真演练(四)1(1)基因组(2)合成DNA的原料、提供能量有一段已知目的基因的核苷酸序列和(3)DNA解链引物结合到互补链互补链的合成(变性、复性/退火、延伸)(加热解链冷却引物结合加热互补链合成)指数(约为2n)(4)AB解析：(1)由于微卫星DNA是简
7、单重复序列，可以用同位素标记的特定简单重复序列作为探针，与该生物的基因组文库进行杂交，然后再经多个步骤筛选获取微卫星DNA。(2)dNTP在PCR过程中作为合成DNA分子的原料和提供能量。PCR技术的前提是有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，这两个DNA引物分别与目的基因双链各一端序列相互补，所以引物应选用图中和。(3)PCR的基本反应步骤为目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环，因而每一次循环后目的基因的量可以增加一倍，即成指数形式扩增(约为2n，其中n为扩增循环的次数)。PCR技术的步骤可简单概括
8、为变性、复性/退火、延伸。(4)微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列，且重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性，因此可用于人类亲子鉴定、物种间亲缘关系鉴定、物质和遗传多样性的研究等，AB正确；诱导基因突变的因素有物理因素、化学因素和生物因素，与微卫星DNA的特性无关，C错误；冠状病毒的遗传物质是RNA，其测序与微卫星DNA的特性无关，D错误。2(1)hLF基因在人肌肉细胞中不转录(表达)Sal 和BamH (2)使人乳铁蛋白基因在山羊的乳腺细胞中表达(或使目的基因表达)(3)pEB质粒或pEBL质粒(或普通质粒或重组质粒)是否有绿色荧光(或是否有荧光)(4)早期胚胎培养和胚胎移植解析：
9、(1)人肌肉细胞是高度分化的细胞，hLF基因在人肌肉细胞中不转录(表达)，故过程中，不能从人肌肉细胞中提取RNA用于RT PCR。Sal 和BamH 在质粒上挨着，切割质粒时不会破坏其他基因，故在RT PCR过程中，加入的引物需在5端添加Sal 和BamH 两种限制酶的识别序列，以便于hLF基因插入pEB中。(2)过程重组载体的构建，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是使人乳铁蛋白基因在山羊的乳腺细胞中表达。过程重组载体导入受体细胞，使用人工膜制成的脂质体将重组质粒导入受体细胞，依据的主要原理是生物膜具有一定的流动性。(3)neor为新霉素抗性基因，具有抗新霉素的作用，故将转染后的山羊乳腺上
10、皮细胞先置于含新霉素的培养液中培养，能够存活的细胞应该是导入pEB质粒或pEBL质粒的细胞，GFP基因为绿色荧光蛋白基因，作为标记基因，可再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞中是否有绿色荧光，以筛选出转染成功的细胞。(4)要获得转基因山羊，还需要将成功表达hLF的乳腺上皮细胞的细胞核移植到山羊去核卵母细胞中，再借助早期胚胎培养和胚胎移植技术孕育出羊羔。3(1)ACE2蛋白基因主要在人体肺部细胞表达(2)分化诱导因子(3)新冠病毒(S蛋白)(特定的)选择性培养基筛选出足量的能分泌抗新冠病毒(S蛋白)抗体的杂交瘤细胞(4)更换培养液特异性强、灵敏度高、可大量制备解析：(1)病毒是专性寄生物，新冠病
11、毒主要侵染人体肺部细胞，对机体其他部位细胞侵染能力相对较弱，根据题目信息可知，新冠病毒对其他部位细胞侵染能力较弱的原因是能特异性识别新冠病毒的受体ACE2基因主要在人体肺部细胞中表达。(2)胚胎干细胞具有发育的全能性，在培养液中添加分化诱导因子，诱导其分化成肺泡样细胞，以满足培养新冠病毒的要求，为科学研究创造条件。(3)若用小鼠来生产新冠病毒疫苗，则需要将新冠病毒表面S蛋白注入到小鼠体内，再从脾脏中分离出B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，并用特定的选择培养基将杂交瘤细胞筛选出来，对上述筛选出的符合要求的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，进一步找到能分泌新冠抗体(抗S蛋白)的杂交瘤细胞，然后再
12、进行扩大培养获得抗体。(4)培养杂交瘤细胞时，需要定期更换培养基，以便给杂交瘤细胞创造有利的生长条件，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。与传统血清抗体相比，单克隆抗体主要的优点是特异性强、灵敏度高、并可大量制备。4(1)PCRDNA双链复制(2)基因表达载体的构建转化(3)血清维持培养液的pH(4)滋养层会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育解析：(1)为获取大量的目的基因，常用PCR技术进行扩增，该技术的原理是DNA分子双链复制。(2)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。目的基因进入受体细胞，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。(3)胚胎的培养液成分除一些无机盐和有机盐外，还需要维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及动物血清等物质。体外培养受精卵时，需要提供一定浓度的CO2，其目的是维持培养液的pH。(4)囊胚的滋养层会形成胎盘和胎膜，内细胞团发育成胎儿各组织器官。胚胎分割要注意将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
