1、第3讲胚胎工程1(2013江苏单科，13)软骨发育不全为常染色体显性遗传病，基因型为HH的个体早期死亡。一对夫妻均为该病患者，希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子。下列做法错误的是 ()。A首先经超数排卵处理后进行体外受精B从囊胚中分离细胞，培养后检测基因型C根据检测结果筛选基因型为hh的胚胎D将胚胎培养至原肠胚期后移植到子宫解析由题干信息可知，这对夫妻的基因型均为Hh，他们可能生下一个基因型为hh的正常婴儿，因此可通过“试管婴儿”技术，选育出健康的胚胎进行移植；应将胚胎培养到原肠胚前的囊胚阶段进行移植，D项做法错误。答案D2(2012浙江理综)下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，
2、正确的是()。A绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性B卵裂球细胞的体积随分裂次数增加而不断增大C囊胚的滋养层细胞具有发育全能性D原肠胚发育分化形成内外两个胚层解析同种动物的精卵细胞的表面通常具有相互识别的特异性蛋白，这是同种动物的精卵能结合的原因之一，故A正确；受精卵通过卵裂产生的细胞团称为卵裂球，随着卵裂的进行细胞逐渐变小，故B错误；滋养层细胞不具有发育的全能性，故C错误；囊胚发育分化形成内外两个胚层，故D错误。答案A3(2012山东理综，35)毛角蛋白型中间丝(KIF )基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF 基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。(1)过程中最常用的运载工具是_，所需要
3、的酶是限制酶和_。(2)在过程中，用_处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5% CO2的气体环境中，CO2的作用是_。(3)在过程中，用_处理以获取更多的卵(母)细胞。成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行_处理。(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_。在胚胎移植前，通过_技术可获得较多胚胎。解析此题综合考查基因工程、细胞工程、胚胎工程等知识。(1)构建基因表达载体时，一般需用同一种限制酶切割目的基因和载体，以产生相同黏性末端，并用DNA连接酶连接成重组表达载体。常用的载体是质粒。(2)利用胰蛋白酶或胶原蛋白酶可将动物组织分散成单个细胞。动物细胞培养
4、时，需将细胞置于5% CO2的气体环境中，CO2的作用是维持培养液的pH。(3)运用超数排卵处理法可获得更多的卵母细胞，常用的激素是促性腺激素。成熟卵细胞在核移植前要进行去核处理。(4)核移植时获得的重组细胞经过早期胚胎培养，可以获得早期胚胎。为获得更多胚胎，可以使用胚胎分割法。答案(1)质粒DNA连接酶(2)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)维持培养基(液)的pH(3)促性腺激素去核(4)(早期)胚胎培养胚胎分割4(2013福建理综，33)克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆
5、猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答：(1)图中重组细胞的细胞核来自_细胞，早期胚胎移入受体子宫后继续发育，经桑椹胚、囊胚和_胚最终发育为克隆猪。(2)在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl2 cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl2mRNA的分子数，从而反映出Bcl2基因的转录水平。图中X表示_过程。从基因组数据库中查询Bcl2mRNA的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成_用于PCR扩增，PCR过程第一轮循环的模板是_。解析(1)重组细胞的细胞核来自具有优良性状的亲本，据图可知，应由良种猪提供细胞核，所以细胞核来自良种猪的体细胞；早期胚胎发育过程经历了桑椹胚、囊胚和原肠胚等阶段。(2)由图可知，X过程是由mRNAcDNA的过程，此过程属于中心法则里的逆转录或反转录过程。PCR扩增需要的条件是模板、原料、能量、酶和引物，而查询核苷酸序列，目的是要合成相关的引物，模板就是Bcl2 cDNA。答案(1)体原肠(2)逆(反)转录引物Bcl2cDNA
