1、课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段一、选择题1引物的作用是(C)A打开DNA双链B催化合成DNA子链C使DNA能够从引物的3端开始复制D提供模板解析引物的作用是使DNA开始从3端开始复制。2下列有关多聚酶链式反应(PCR)的叙述，错误的是(C)A变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键B复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸DPCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度更高解析变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，A正确；复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成，B正确；延伸过程中
2、需要热稳定DNA聚合酶、ATP、四种脱氧核苷酸，C错误；PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度更高，D正确。故选C。31970年，特明和巴尔德摩证实了RNA病毒能依赖RNA合成DNA的过程，并发现了催化此过程的酶。下面为形成cDNA的过程和PCR扩增过程示意图。请根据图解分析，下列说法不正确的是(D)A催化过程的酶的逆转录酶B从图示可以看出要将碱基对之间的氢键断开可以用核酸酶H和高温处理C从图中信息分析可知，过程为DNA复制，催化过程的酶能耐高温D如果RNA单链中有碱基100个，其中A占25%，U占15%，则通过该过程合成的一个双链DNA片段中有胞嘧啶30个解析由题干可知通过反转录过程
3、合成的一条双链DNA片段中有胞嘧啶60个。核酸酶H和高温都可以解开螺旋。4PCR技术又称聚合酶链式反应，现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段，它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增。你认为下列符合在体外进行PCR反应条件的一组是(D)稳定的缓冲液环境DNA模板合成引物四种脱氧核苷酸DNA聚合酶DNA解旋酶限制性核酸内切酶温控设备ABCD解析PCR技术又称聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA分子的核酸合成技术。该过程需要稳定的缓冲液环境、DNA模板、合成引物、四种脱氧核苷酸(原料)、DNA聚合酶(催化延伸过程)、温控设备(提供适宜的稳定)，故D项正确；PCR技术通过高温变性解链，
4、不需要DNA解旋酶，也不需要限制性核酸内切酶，、错误，因此，A、B、C项错误。5下列关于DNA复制和PCR技术的描述中，正确的是(C)ADNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5端延伸DNA链BDNA复制不需要引物C引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合DPCR扩增的对象是氨基酸序列解析DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，故DNA复制需要引物。DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链，而不能从5端延伸DNA链。引物通过碱基互补配对原则与DNA母链相结合。PCR扩增的对象是DNA，不是氨基酸序列。二、非选择题6风靡全球的基因编辑技术可实现对目的基因的“编辑”和特定DNA片段的敲除、加入等。为了探究
5、NgAgogDNA基因编辑系统能否引发斑马鱼的Fabplla基因发生突变导致其眼睛发育缺陷，科研人员进行了以下研究：(1)首先推测构成 NgAgo蛋白的_氨基酸序列_，合成mRNA，并将其与单链gDNA混合后注射到斑马鱼胚胎细胞中，再进行早期胚胎培养获得幼体。(2)进一步探究斑马鱼眼睛缺陷是否由Fabplla基因发生突变引起的，可从_严重眼睛缺陷的斑马鱼胚胎_细胞中提取Fabplla基因研究其在斑马鱼胚胎发育中的功能。结果：NgAgogDNA系统引发的眼睛缺陷可通过外源添加Fabplla基因的mRNA来恢复，而且对Fabplla基因测序结果发现其序列与对照组相同。初步结论：_斑马鱼眼睛缺陷是由
6、Fabplla基因转录受阻导致的，而非基因突变引起的_。(3)PCR技术扩增Fabplla基因时，需要提供模板、原料、_Taq酶_、引物等条件。将模板DNA加热至9095 的目的是_使目的基因DNA受热变性后解旋为单链(或变性)_，下一过程称为_复性_。解析(1)为了探究NgAgogDNA基因编辑系统能否引发斑马鱼的Fabplla基因发生突变导致其眼睛发育缺陷，首先要构建NgAgogDNA，即推测构成NgAgo蛋白的氨基酸序列，合成mRNA，并将其与单链gDNA混合后注射到斑马鱼胚胎细胞中，再进行早期胚胎培养获得幼体。(2)要探究斑马鱼眼睛缺陷是否是由Fabplla基因发生突变引起的，可采用P
7、CR技术，即从严重眼睛缺陷的斑马鱼胚胎细胞中提取Fabplla基因，对其使用PCR技术进行扩增，并研究该基因在斑马鱼胚胎发育中的功能。NgAgogDNA系统引发的眼睛缺陷可通过外源添加Fabplla基因的mRNA来恢复，而mRNA是转录形成的，而且对Fabplla基因测序结果发现其序列与对照组相同，这说明斑马鱼眼睛缺陷是由Fabplla基因转录受阻导致的，而非基因突变引起的。(3)PCR技术扩增Fabplla基因时，需要提供模板、原料、耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)、引物等条件。将模板DNA加热至9095 的目的是使目的基因DNA受热变性后解旋为单链(或变性)；下一过程称为复性，即温度下降到50 左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
